丹参素钠的有关物质检查的实验研究PPT学习教案

1、会计学1丹参素钠的有关物质检查的实验研究丹参素钠的有关物质检查的实验研究一.实验目的通过HPLC研究丹参素钠中可能混有的杂质，研究丹参素钠的固有性质，贮藏条件，考察影响原料药和制剂质量的贮藏条件，为贮藏、处方和加工工艺提供资料。 第1页/共22页二.实验仪器与试剂本实验采用HPLC法测定色谱柱：DiamonsilTM C18 规格：5m,4.6200mm 流动相：甲醇-水（含1%乙酸）缓冲溶液（5:95）流速： 检测波长：280nm 供试品：丹参素钠原料溶于流动相的溶剂第2页/共22页三.实验思路3.1 利用HPLC测验检测丹参素钠中可能混有的结构类似物质。3.2 考察影响丹参素钠原料药和制剂

2、成分的影响因素，为贮藏提供信息。3.3 在杂质可以分离提取的情况下，分离出杂质并且对其进行分析，确定杂质成分。（还未完成）第3页/共22页四.实验过程4.2 供试品的配制 精密量取本品丹参素钠，取流动相5ml溶解本品，稀释10倍作为供试品。 4.1 流动相的配制 取去离子水洗净的500ml棕色试剂瓶，精密量取甲醇20ml，再用500ml量筒取蒸馏水380ml，用10ml量筒取乙酸4ml，混合摇匀后，放入超声仪，除气泡10min。 第4页/共22页4.3 供试品处理 用塑料样品管取少量供试品，分别进行光照、灯照、30加热、50加热、70加热、90加热等处理。4.4 HPLC试验 利用所选的色谱柱

3、和流动相对未处理的供试品以及处理后的供试品进行洗脱，记录色谱图。4.5 色谱图分析处理 分组比较色谱图的主峰以及杂质峰，得出结论。第5页/共22页五.实验结论5.1 供试品HPLC测试得出图谱时，出现最大峰时，出现含量最高的杂质峰第6页/共22页5.2 比较30、50 、70 和90 加热40min后HPLC测试后得到的色谱图。 30加热40min 50加热40min 70加热40min 90加热40min 第7页/共22页分析：名称名称T1T1峰面积峰面积T2T2峰面积峰面积303015.97315.9732237589.1002237589.100 21.96521.965 126810.

4、102126810.102505015.88215.8822284040.0002284040.000 21.80721.807 128375.797128375.797707015.64815.6482154601.5002154601.500 21.53221.532 133112.000133112.000909015.76515.7652372821.2502372821.250 21.66521.665 164736.953164736.953结论：随着温度升高，主杂质A含量升高。丹参素钠本品应该在低温处保存。 第8页/共22页5.3 比较90加热小时、小时和5小时的色谱图，以及冷却

5、2天后继续加热的色谱图。 90加热小时 90加热小时 90加热5小时 第9页/共22页名称名称T1峰面积峰面积T2峰面积峰面积T3峰面积峰面积3.53.5小时小时 13.640 2619930.25018.273 123294.29721.507 13120.0004.54.5小时小时 14.323 3154075.50019.190 146609.12521.927 89245.7195 5小时小时14.315 2291581.75019.240 102740.70323.007 120617.898分析第10页/共22页90加热5小时冷却后90继续加热1小时 90加热2小时第11页/共22

6、页结论：高温加热时间长出现新的杂质B（T3峰），且随着加热时间的增加杂质的含量增加，冷却后此杂质减少甚至消失，再次加热后又会产生，可能为丹参素钠热分解产生。名称名称T1T1峰面积峰面积T2T2峰面积峰面积9090加热后冷却加热后冷却 13.23213.232 9812465.0009812465.000 17.66517.665 176151.297176151.297继续加热继续加热1 1小时小时12.89812.898 9280839.0009280839.000 17.13217.132 501651.844501651.844继续加热继续加热2 2小时小时13.03213.032 86

7、73404.0008673404.000 17.39817.398 519512.688519512.688分析第12页/共22页5.4 比较供试品光照和灯照后的色谱图日照7小时灯照24小时灯照45小时第13页/共22页分析名称名称T1T1峰面积峰面积T2T2峰面积峰面积日照日照7 7小时小时13.76513.7652267644.0002267644.000 18.19818.1986531.0006531.000灯照灯照2424小时小时 13.79813.7982234676.2502234676.250 18.30718.30715239.20015239.200灯照灯照4545小时小时

8、 13.77313.7732053741.7502053741.750 18.24818.24821620.19921620.199结论：供试品中杂质A含量随光照时间增加而增加。第14页/共22页5.5 实验结论 丹参素钠原料药在高温时会出现新的杂质，杂质B含量随温度升高而升高，充分冷却后新出现的杂质B会消失。原料药中的主杂质A含量会随温度升高而升高。丹参素钠中主要成分会随光照时间增长而降低。由以上可知丹参素钠原料药应置于低温避光处保存。第15页/共22页六.实验中问题讨论6.1 流动相的酸度对保留时间的影响6.2 对于高温下出现的B杂质的研究6.3 实验中不足第16页/共22页6.1 流动相

9、酸度对保留时间的影响实验的流动相定的乙酸含量是1%，保留时间是左右，但是仍有小峰难以分离出来，而有一次实验中，配制流动相时我们错误地少加了乙酸，此时的保留时间是16min左右，分离效果更佳，因此接下来的实验可以采用低酸度来增加保留时间提高分离效果。第17页/共22页6.2 关于B杂质1.高温加热后B杂质的含量增加，此时，供试品溶液放置后颜色发生变化，出现淡粉红色，可能为B物质溶解后带的颜色。2.高温后出现大量B杂质并且丹参素钠主峰的峰面积减少，而冷却后B杂质峰减小主峰增大，因此，B杂质可能是丹参素钠热分解产生。第18页/共22页6.3 实验中不足1.流动相是每次实验前配制，去离子水以及乙酸的量不精确，可能会对供试品