病理液基细胞学及HPV

1、病理液基细胞学及病理液基细胞学及HPV液基细胞学检查（液基细胞学检查（TCT）1人乳头状瘤病毒检测（HPV）2远程病理会诊3免疫组化检查与诊断4检查项目新1液基细胞学检查（TCT）什么是液基细胞学检查什么是液基细胞学检查 液基薄层细胞学检查是新近发展的较成熟的一种脱落细胞学的检查方法。它的优势就是制片技术的先进，制出高质量的细胞涂片。 外观比较外观比较优点优点背景干净细胞成分多，形态保存良好细胞分布均匀且单层的细胞薄片可重复制片液基薄层细胞学检测明显提高了细胞样本的检测质量，明显提高了肿瘤细胞的检测率，及早发现肿瘤，及早及时治疗。适用范围适用范围妇科液基细胞学 TCT+HPV联合检查是早期宫颈

2、癌筛查的重要手段非妇科液基细胞学 胸腹水脱落细胞学检查 痰液脱落细胞学检查 尿沉渣细胞学检查 支气管刷片细胞学检查2人乳头状瘤病毒检测（HPV）HPVHPV检测的意义检测的意义高危型HPV的持续感染是宫颈癌发生发展的主要因素HPV分型检测的意义： 1、用于宫颈病变的筛查 2、指导ASCUS、LISL、HISL患者的进一步处理 3、对宫颈癌的复发有预测作用 定量：病毒载量是除亚型之外导致肿瘤发生发展的另一个关键因素定量：病毒载量是除亚型之外导致肿瘤发生发展的另一个关键因素 大量研究提示除大量研究提示除亚型外，亚型外，HPVHPV的的致癌性还与感染致癌性还与感染者的病毒载量相者的病毒载量相关，病毒

3、载量被关，病毒载量被认为是一个潜在认为是一个潜在的识别的识别CIN-CIN-及以上病理等级及以上病理等级的生物学指标。的生物学指标。 Nicolas Wentzensen,et al. 2012.Human Papillomavirus Load Measured by Linear Array Correlates with Quantitative PCR in Cervical Cytology Specimens. J. Clin. Microbiol. 50:1564 1570Maelle Saunier, et al. 2008. Analysis of Human Papillo

4、mavirus Type 16 (HPV16) DNA Load and Physical State for Identification of HPV16-Infected Women with High-Grade Lesions or Cervical Carcinoma. J. Clin. Microbiol. 46:3678 3685Xi LF, et al. 2011. Viral load in the natural history of human papillomavirus type 16 infection: a nested case-control study.

5、J. Infect. Dis. 203:14251433.Gravitt PE, et al. 2007. High load for most high risk human papillomavirus genotypes is associated with prevalent cervical cancer precursors but only HPV16 load predicts the development of incident disease. Int. J.Cancer 121:27872793.13842 specimens HPVHPV病毒载量与宫颈癌发生关键因素病

6、毒载量与宫颈癌发生关键因素凯杰HC2杂交捕获技术13高危不分型半定量凯普21分型PCR+膜杂交法21种HPV分型定性检测罗氏cobas 多重荧光PCR法14种高危型同时HPV16/18分型定性检测豪洛捷AptimamRNA检测14种高危型HPV16,18/45分型定性检测硕世21HPV分型定量检测多重荧光PCR法21种HPV分型同时标准化定量各亚型HPV检测主要方法及进展2003年2006年2012年2014年2015年不分型分型定性定量硕世21HPV分型定量检测：首个、唯一采用标准化定量的HPV分型检测HPV检测精准医疗的应用： “分型+定量”CFDA批准：国械注准20153400364，苏

7、械注准20152700105，专利号：ZL 201110087602.1系统组成：全自动核酸提取仪、实时荧光定量PCR仪、21HPV分型定量检测试剂盒、HPV分型定量报告软件硕世21HPV分型定量检测系统，采用宫颈脱落细胞取样处理标准化专利技术和多重荧光PCR定量技术，可在2.5小时内快速、准确地区分受检样本中21种HPV基因亚型，包括13种高危型HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68，5种中危型HPV26、53、66、73、82和3种低危型HPV6、11、81；并同步对21种HPV亚型病毒载量进行标准化定量。硕世硕世HPVHPV检测技术的创新与突破

8、检测技术的创新与突破1 1：分管分型技术：分管分型技术分型分型更为精准更为精准传统分型技术（膜杂交/液体芯片杂交） 创新分型技术（硕世分管分型）PCR扩增+膜/液态芯片杂交，时间长PCR扩增同步分型，时间短PCR扩增产物开盖进行杂交，易污染实时荧光PCR闭管扩增分型，不易污染所有靶标在同一管中扩增，易竞争抑制每管仅扩增3种型别，分型准确硕世21HPV分型定量检测：准确分型，风险分层21种HPV亚型13种高危型HPV中国人群最常见 癌前病变高危险型HPV16型HPV52型HPV58型HPV33型HPV18型一般高危型HPV31、35、39、45、51、56、59、68型5种中危型HPVHPV26

9、、53、66、73、82型3种低危型HPVHPV6、11、81型2%0%癌前病变风险阴道镜阈值 10%30%Nicolas Wentzensen， 2015 硕世HPV检测技术的创新与突破2：标准定量硕世分型定量检测系统方案硕世分型定量检测系统方案建立了病毒载量建立了病毒载量的数学模型，弥的数学模型，弥补了取样的不均补了取样的不均一性，并把数学一性，并把数学模型实体化为定模型实体化为定量分析软件！量分析软件！ HPVHPV分型分型/ /定量系统相关性能定量系统相关性能1 1、分型检测的灵敏度和特异性均在、分型检测的灵敏度和特异性均在95%95%以上；以上；2 2、HPV21HPV21个亚型检测

10、限：个亚型检测限：10104 4 copies/ml copies/ml（20 copies/20 copies/反应）；反应）；3 3、HPV16HPV16亚型定量检测以参考值亚型定量检测以参考值16600 copies/1000016600 copies/10000个细胞判断个细胞判断CIN-CIN-及以上及以上病理等级时，灵敏度为病理等级时，灵敏度为72.62%72.62%（95%95%置信区间：置信区间：66.81%77.92%66.81%77.92%）；特异度为）；特异度为72.24%72.24%（95%95%置信区间：置信区间：66.19%77.76%66.19%77.76%）；）

11、；20 copies/反应反应硕世硕世21HPV21HPV分型定量报告单分型定量报告单HPV风险分层列表HPV阳性亚型每10000个细胞数量中的病毒载量，对应显示为：6.82107HPV亚型病毒载量的百分比 HPVHPV检查的临床价值检查的临床价值HPV准确分型是判断HPV持续感染状态的基础，是筛选宫颈癌高危人群的基础；HPV高危亚型病毒载量提示高度病变的风险，跟踪和随访提示病毒的清除或疾病的进展。健康人群通过体检筛查出感染HPV高危亚型的人群，进行定期随访管理，可以最终消除宫颈癌。中国子宫颈癌的形势依然严峻新发病例9.89万死亡病例3.05万发病率呈上升趋势&年轻化趋势2016年20

12、16年中国国家癌症中心公布的估计数据，2015.对不同年龄段的女性如何进行宫颈癌筛查对不同年龄段的女性如何进行宫颈癌筛查? ? 21岁 21-29岁 30-65岁 65岁 子宫切除后已接种HPV疫苗无需筛查细胞学筛查（3年一次）首选 HPV联合细胞学筛查（5年一次）可接受 细胞学筛查（3年一次）之前筛查有足够良好结果后无需筛查无需筛查遵照不同年龄段的筛查建议（与未接种疫苗妇女相同）3030岁及以上女性岁及以上女性HPVHPV检测联合细胞学筛查检测联合细胞学筛查 适用范围适用范围妇科液基细胞学 TCT+HPV联合检查是早期宫颈癌筛查的重要手段非妇科液基细胞学 胸腹水脱落细胞学检查 痰液脱落细胞学检查 尿沉渣细胞学检查 支气管刷片细胞学检查硕世21HPV分型定量检测：准确分型