MMP3生物学特性与神经系统疾病相关的研究进展

1、MMP3 生物学特性与神经系统疾病相关的研究进展#胡涂，曾乐平，黄菊芳*510152025（中南大学基础医学院人体解剖与神经生物学系，长沙 410000）摘要：基质金属蛋白酶 3（Matrix metalloproteinase3，MMP3）是 MMPs 家族的主要成员之一，其前肽区(Propeptide ,Pro)和铰链(hinge ,H)之间的具有 Zn2+活性位点的接触反应性核团(Catalytic domain) 是其核心反应部位。它在机体内表达的变化和活性的异常参与了许多疾病的病理过程，使其成为临床医学领域针对疾病病理过程研究的热点。本文将从结构，功能，生物化学特性，及其与非肿瘤疾病

2、相关性的最新研究进展等方面来阐述 MMP3。关键词：MMP3；Timp1；基因多态性；神经系统疾病Research progress on biological characteristics of MMP3and its involvement with nerve diseasesHu Tu, Zeng Leping, Huang Jufang(Department of human anatomy and neurobiology in College of basic medicine of Central Southuniversity, ChangSha 410000)Abstra

3、ct: Matrix metalloproteinase 3 (MMP3) is attached to the family of Matrixmetalloproteinases (MMPs). And the catalytic domain(located between the propeptide (Pro) andthe hinge), containing an active site with Zn2+, is the cardinal active site of MMP3 . As thechange of gene expression and the abnormal

4、 activity of it contribute to the pathologic process inmany diseases, MMP3 has become a hot spot in one of the clinical medical areas which is relatedto the research on the pathologic process in diseases. This review is aimed at introducing andelaborating MMP3 through structure, function, biochemist

5、ry, and the the relationship withdisorders of the nervous system.Keywords: Matrix metalloproteinase-3; Tissue Inhibitor Of Metalloproteinase 1; Genepolymorphism; nerve diseases基质金属蛋白酶 3(Matrixmetalloproteinase3，MMP3）因其功能的特殊性包括对3035细胞外基质的降解，重塑以及对多种基质金属蛋白酶前体（ProMMPs）（包括：proMMP1、ProMMP3、ProMMP7、ProMMP8

6、、ProMMP9、ProMMP13）的完全激活1-3，使其成为临床医学领域中研究许多疾病病理过程的重要环节，研究出 MMP3 促进相关疾病发生发展的作用机制也成为了深入认识这些疾病的基础。因此，近年来 MMP3 与疾病相关性研究的范围越来越深入与宽泛。本文试图对 MMP-3 结构特点，生物学功能，活性调节，及其与非肿瘤疾病相关性的最新研究进展作出阐述，以便加强对 MMP-3 的了解和认识，为对其进一步的研究奠定基础。1MMPs 蛋白家族基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases， MMPs）是一系列 Zn2+依赖型肽链内切酶，最早是在 1962 年由 Gross 和 L

7、apiere 所发现并报道的胶原酶（MMPs 家族中的一类）开40始提出1。它们几乎可以降解所有的细胞外基质成分。基金项目：教育部新教师基金资助项目（20100162120072）与国家自然基金资助项目（81100663）作者简介：胡涂，（1986-），男，硕士，主要研究方向：急性高眼压后视网膜节细胞死亡机制研究。通信联系人：曾乐平，（1978-），男，讲师，主要研究方向：神经损伤与修复。 -1-1.1 基质金属蛋白酶的分类传统的分类方法根据底物的特异性将 MMPs 家族分为：胶原酶：包括 MMP1、MMP8和 MMP13，底物为：、型胶原蛋白和蛋白多糖；明

8、胶酶：包括 MMP2和 MMP9，底物为：、型胶原蛋白和弹性纤维；基质溶解素：包括：MMP3、4550556065MMP7、MMP10 和 MMP11，底物为：纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、型胶原及 MMP-1、MMP-8、MMP-9；膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP 和MT3-MMP，底物为：明胶型胶原、MMP24。然而，近年来，由于 MMPs 家族成员及其底物种类越来越多地被发现，目前国际上普遍采用的分类方法是以分子结构特点将其分成 5种分泌型金属蛋白酶，包括小区域型 MMPs（Minimal-domain MMPs）、单纯含色素结合蛋白 区 域 型 MMPs （ Si

9、mple hemopexin-domain-containing MMPs ） 、 明 胶 链 型 MMPs（Gelatin-binding MMPs）、蛋白酶活性隐匿型 MMPs（Furin-activated secreted MMPs）以及玻璃体结合蛋白样嵌入式 MMPs（Vitronectin-like insert MMPs）和 3 种膜型金属蛋白酶，包括跨模型 MMPs（Transmembrane MMPs）、糖基磷脂酰肌醇铆钉样 MMPs（GPI-anchoredMMPs）以及 2 型跨模型 MMPs（Type II transmembrane MMPs）5。1.2 基质金属蛋白

10、酶的共性不同种类的基质金属蛋白酶之间分子量大小和空间结构各有差异，但是它们都包含了一些共同的结构域和蛋白序列：一个氨基末端信号序列（Pre），可以引导整个 MMPs 去向内质网；一个和 Zn2+活性相关的硫醇基团（SH）连接的前肽，可将 MMPs 维持在酶原（无活性）的状态；一个有 Zn2+结合位点的接触反应性核团,负责与底物接触和反应。此三种结构共同构成了分泌型金属蛋白酶的第一种即小区域型 MMPs，其它 7 种 MMPs 就是在此基础上加上了一些特异性的序列和核团而成5。因此各类基质金属蛋白酶在降解细胞外基质的作用方面存在共性,主要包括：发挥酶的活性条件为：中性 pH 值、内在活性 Zn2

11、+和外在 Ca2+的存在；螯合剂和金属蛋白酶的组织抑制剂（Tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP）可抑制其酶的活性；它们都是以无活性的酶原形式分泌，需要被一些蛋白水解酶（如：胰蛋白酶、纤溶酶）或通过化学修饰（如：有机汞等）激活3才能发挥其生物学效应。2MMP3 的结构和生物学功能2.1 MMP3 的简介基质金属蛋白酶 3（Matrixmetalloproteinase3，MMP3），是 MMPs 家族中非常重要7075的一员，隶属于单纯含色素结合蛋白区域型 MMPs（Simple hemopexin-domain-containingMMPs）。人

12、类的 MMP3 基因定位在染色体 1lq22.3 区，长度约 1.8kb。它完整的一级结构由 Juan Sau 等在 1988 年时提出，证明了其空间结构有着包含了一个 17 个氨基酸残基的信号肽的 477 个残基。这个发现与 1986 年 Whitham, S. E.等提出的基质溶解素 1 的一级结构完全一致6,所以它又被人们称为基质溶解素 1（Stromelysin-1）。2.2 MMP3 的结构MMP3 的空间结构除了上述的小区域型 MMPs 所有的基本结构域和蛋白序列之外，在接触反应性核团靠近 Zn2+结合位点的一端通过一个铰链连接了一个由四个重复基团构成的血色素结合蛋白区域。(见图一

13、)此区调节着金属蛋白酶、组织抑制剂、细胞表面分子和蛋白-2-水解底物之间的相互作用。MMP3 的全长、酶原形式和活性形式的分子量分别为 54.0kDa、8085909510010552.2kDa 和 42.8kDa。基因注册编号为：J03209，X05232。5MMP3 的前肽区包括了 3 个 -螺旋和之间的连接环，其中螺旋 1 和螺旋 2 之间的连接环是蛋白酶敏感型的“诱饵区域”。螺旋 3 之后的一个延长肽位于接触反应核团的底物结合裂口处，此区有高度保守的半胱氨酸开关结构（Cysteineswitch motif），它形成 Zn2+活性部位的四位配体，保持了酶原的无活性状态。而它的接触反应性

14、核团含有 5 个 -折叠、3 个 -螺旋和数个连接环以及一个催化 Zn2+、一个结构 Zn2+和三个 Ca2+。其中底物连接口由第个 -折叠和螺旋 B 组成，其中的三个组氨酸共同构成了 Zn2+活性位点。此区还含有一个“蛋氨酸转角”，是支持活性 Zn2+周围结构的基础。在血色素结合蛋白区域中四个重复基团是一种刀刃状的 -折叠，其中首个和尾部基团一个二由稳定的二硫键连接2。2.3 MMP3 的生物学功能MMP3 的最主要的功能是降解细胞外基质(ECM)和基膜(BM)。已知 ECM 是由细胞分泌到细胞外间质中的大分子物质，构成复杂的网架结构，支持并连接组织结构、调节组织的发生和细胞的生理活动。EC

15、M 的组成为：蛋白聚糖、结构蛋白（如胶原和弹性蛋白）、黏着蛋白。其中胶原和蛋白聚糖为 ECM 的基本骨架“主体框架”部分，在细胞表面形成纤维状复合物，这种复合物通过纤维粘连蛋白和层黏连蛋白以及其他分子“粘合剂”部分直接与细胞表面受体连接；或附着到受体上。由于受体多数是膜整合蛋白，并与细胞内的骨架蛋白相连，所以细胞外基质通过膜整合蛋白将胞外和胞内练成一个整体。研究表明MMP3 的底物包括了第、和型胶原蛋白，明胶，层黏连蛋白，纤维黏连蛋白和蛋白多糖等细胞外基质成分1, 2。另有研究表明：MMP3 由于其对于间质胶原酶的激活作用，且间质胶原酶对型胶原蛋白的降解作用，所以可以说 MMP3 也间接参与了

16、型胶原蛋白的降解7。由此可见，MMP3 不仅仅破坏了 ECM 的“主体框架”部分，也破坏了“粘合剂”部分，使得细胞的支持结构被破坏，组织间和细胞间的正常生理活动的异常，进而引起一系列的细胞病理性反应。研究表明，MMP3 能够对多种已部分激活的 ProMMPs 进行进一步的完全激活,包括:ProMMP1、ProMMP3、ProMMP7、ProMMP8、ProMMP9、ProMMP133。Robert Visse等提出：前体 MMPs（ProMMPs）被翻译并分泌出细胞后，需要在细胞间通过蛋白酶的水解作用断裂其前肽区（Pro），而后在已经被完全激活的各种 MMPs 的作用下实现它们的完全激活6。而

17、 MMP3 在细胞外对于 ProMMPs 的完全激活起到了非常重要的作用。3mmp3 的活性调节在体内，机体会严格地调控 MMPs 的表达，激活及其与底物相互作用的过程。因此，110115其活性调节的三个关键水平是基因转录水平的调节、酶原激活和 MMPs 抑制剂的调节，MMP3 也是如此。这三个环节相互配合共同地维持 MMP3 在机体中的稳态。3.1 基因转录水平的调节大多数 MMPs（包括 MMP3 在内）的基因转录调节介导了 MMPs 生物学的表达变化。许多的细胞因子、细胞外基质成分、致癌物、原癌基因产物均能诱导细胞表达 MMPs。这些刺激的调节通过一系列位于启动子的顺势作用元件来实现。研

18、究发现，一个高度保守的顺势作用元件 AP-1 存在于这些可诱导 MMPs 表达的基因的启动子上，此位置位于相对转录起始点的-65 和-79 之间8。有关 MMPs 活化的信号传导机制的研究发现，MAPK 传导途径与其-3-表达相关。MAPK，丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPKs）是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。研究证实，MAPKs 信号转导通路存在于大多数细胞内，120125130135140145150它在将细胞外次级信号转导至细胞及核内，并引起细胞生物学反应（如细胞增殖、分化、转化及凋亡等）的过程中具有至关重要的作用。当次

19、级信号被接受后可以激活绑定在启动因子的 AP-1 连接位点上的 AP-1 转录因子复合体(它是一种 Fos 和 Jun 家族成员的二聚体)进而刺激 MMP3 的基因转录。AP-1 敏感型 MMPs 的启动子区域还包含了一个或多个多瘤病毒增强子 A 绑定蛋白 3（PEA3）元件，PEA3 与 ETS 转录因子绑定和 AP-1 元件合作共同激活 MMP3的启动子9。H. Husslein 等在人类滋养层细胞中 MMP3 的表达、调控及功能特点的研究中发现，被 IL-1 激活的 MAPK 可以增加 MMP3 的表达，而 UO126（一种双重 MAPK 激酶MEK1/MEK2抑制剂）可以明显的降低由

20、IL-1 引导的 MMP3 的表达和/或分泌10。进一步研究发现，在基因转录水平的调节中，MMP3 受到白细胞介素 1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNF-)、表皮生长因子、血小板衍生生长因子、一氧化氮等的上调；而受到类固醇激素、转化生长因子 、干扰素 等的下调7。对于这些调控因子的研究中，Wei-Ping Chen 等发现，在白介素-1beta 诱发型鼠软骨细胞中，Morin（桑色素）抑制了 MMP3 和 MMP13 的表达，增加了 TIMP-1 的表达11。3.2 酶原激活在 MMPs 家族中几乎所有成员都是以酶原的形式（pro MMPs）分泌到细胞外基质中，之后只有通过酶原激活经水解去除前

21、肽区才能使其成为有活性的 MMPs 以发挥它们正常的生理功能。研究表明,ProMMPs 的激活包括在体内的由蛋白水解酶激活（途径一）和体外通过化学修饰激活（途径二）两条主要途径,当然在低 PH 和热处理时也可以引起 ProMMPs 的活化。在途径一中，ProMMP 在蛋白水解酶的作用下，其前肽区的第一和第二个 -螺旋之间“诱导”区域（此区域的裂口处有一段几乎所有 MMP 中都存在的相似的氨基酸残基序列）裂解，引起保守序列中 Cys 的 SH 基的 Zn2+-Cys 连接的断开，最后在细胞间已活化的 ProMMP的作用下将前肽残余完全移除完成最终的完全活化。而在途径二中，ProMMP 在化学修饰

22、的作用下改变前肽区第三个 -螺旋后的延长肽区被称为“半胱氨酸开关巯基”的结构造成前肽区的 Zn2+-Cys 连接的断开，最后也是在细胞间已活化的 ProMMP 的作用下将前肽残余完全移除完成最终的完全活化2。由此可见，MMPs 的活化过程的关键步骤是分离活性中心催化性 Zn2+与前肽区中 PRCGV/NPD 保守序列中 Cys 的 SH 基的 Zn2+-Cys 连接。已证实有多种蛋白酶和非蛋白酶水解剂可以激活 MMPs 如纤溶酶、SH 反应剂、变性剂等以及热处理热处理均具有水解 MMPs 前肽的作用，且 ProMMPs 只有在前肽被水解掉之后才能进一步被已激活的 MMPs 完全水解激活。而 P

23、roMMP3 在体内的活化机制是：在尿激酶-纤溶酶原活化剂或组织纤溶酶原活化剂的催化下形成的纤溶酶水解分离前肽激活 MMP3；由此进一步引发MMPs 家族其他成员的活化；而部分细胞因子、蛋白水解酶、等也参与了 MMP3 酶原的活化7。（见图一）另有研究表明，如果将 proMMP3 中的 Tyr 或 Leu 诱变为 Ala 也可以导致proMMP3 的自发激活，所以也可以将其认为是 MMP3 的第三种活化方式12。-4-155160165170175180图 1 ProMMP3 的酶原激活(据参考文献2,7 修改)Figure1.Stepwise activation of ProMMP3. M

24、MP3 secreted as inactive Zymogens can be activated by plasminactivated by Urokinase-plasminogen activator or Tissue plasminogen activator from plasminogen. The catalyticdomain is represented as a pretzel rod, with the active-site cleft shown in white (not to scale),containing thecatalytic-site (Zn).

25、 The propeptide is schematically shown as a black line containing the bait region (blackrectangle) and the cysteine switch (C).SH indicates the sulfhydryl of the cysteine. Activation by plasmin ismediated by cleavage of the bait region; this party activates the MMP3. Full activation is achieved by c

26、ompletedremoval of the propeptide by intermolecular processing.3.3 MMP3 的抑制剂天然的 MMPs 抑制剂有主要在液相起作用的 -巨球蛋白等以及在组织中起主要作用的组织金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitor metalloproteinase，TIMPs）。TIMPs 是一组能够特异性抑制 MMPs 活性的多功能因子，它在人体是以形成未糖基化 TIMP1-MMP3 活性基团复合物来抑制 MMP3 的活性。研究表明，TIMP-1 的 N-端结构在抑制 MMP3 活性的反应中几乎占据了全部的作用，而 C-端可能仅仅与

27、 MMPs 的蛋白定位或是与 TIMP1-MMPs 复合物的形成有关13,在它的 N-端结构中，一段高度保守氨基酸序列（Cys1-Thr2-Cys3-Val4）和一种称之为“C-connector”的结构参与了复合物中 3/4 的分子间的联系14。在 TIMP1 抑制 MMP3活性的过程中，保守氨基酸序列中的 Cys1 会将 MMP3 接触反应性基团中的 Zn2+周围的水分子排除出复合物内，破坏 MMP3 水解底物所需的环境；“C-connector”的作用则是占据MMP3 一部分活性位点的位置，而这个位置则是在 MMP3-底物复合物中 MMP3 与底物 N-端已裂开肽键位置的氨基酸残基反应的

28、位置。提示 TIMP1 不仅仅破坏了 MMP3 与底物作用和反应的环境，它的特定的结构还占据了 MMP3 与底物接触反应的位置。由此可见，N-端的高度保守的序列和 C-connector 主要参与了抑制 MMP3 活性的反应。虽然，它的其他一些TIMP1 片段也与 MMP3 有反应，但是其作用都比较微弱。值得注意的是金属蛋白酶抑制剂常常是由分泌金属蛋白酶的同一细胞所合成并分泌。提示两者构成的 TIMP1/MMP3 缓冲对共同参与了细胞外基质的降解和重塑过程，维持着细胞外基质的稳态。由 TIMP1/MMP3 平衡被打破所造成的细胞外基质的破坏参与了许多疾病的病理过程。-5-4MMP3 与神经系统

29、疾病的关系在神经系统中， MMP3 的高表达会引起神经元与神经元之间，神经元与胶质细胞之间，神经元与血管周围细胞之间的连接受损，使得神经元细胞失去细胞外基质对其的支持作用而185190195200丧失其正常功能和结构的改变15。Ye S，Watts GF 等的调查发现，在外界刺激因子一定的情况下，MMP3 基因的转录启动子区域的多态性与其 MMP3 的表达直接相关。而这种多态性受到一个位于-1171 位置的 5A/6A 区域启动子的多态性决定16 。该区域 MMP3 基因启动子区域常见多态性区域，即位于转录起始点上游 1171bp 处含有 5 个一串阿糖腺苷（A）的等位基因或者是 6 个一串阿

30、糖腺苷（A）的等位基因。有学者做过的体外启动子活性试验呈现出 MMP3-1171 位置 5A 等位基因启动子的活性是 MMP3-1171 位置为 6A 等位基因启动子活性的两倍，表明 6A 等位基因有可能连接了一个阻遏子17,18 。因此，MMP3 基因的多态性与神经系统疾病的相关性研究成为热点。在中风病人 MMP3 基因多态性与其疾病相关性的研究中,Su Kang Kim 等人发现,他们通过基因测序法所选出来的 MMP3 基因碱基序列中 3种单核苷酸多态性（ SNPs） rs520540 (Ala362Ala), rs602128 (Asp96Asp), and rs679620(Lys45

31、Glu)与缺血性中风有关而与出血性中风的关系却没有被发现19。而 Robert C. Kaplan等针对其研究的结果20提出了：在血管性疾病中 MMP3 基因 SNPs 的作用仅仅使用他们先前提出的1612 5A/6A 等是不能完全解释清楚的，它需要之后大量的在 MMP3 基因序列中不同位置的检测来进一步完善两者之间的相关性阐述。另外，Dong-Hee Choi 等发现 MMP3与氧化应激引起的多巴胺能神经元死亡有关21。他们指出，人类 DJ-1 蛋白对多巴胺能神经元有在氧化应激时的保护作用，而这种蛋白可以被 MMP3 所降解，从而使它的这种保护作用消失引起多巴胺能神经元的死亡加速帕金森病的发

32、展。由此提示,MMP3 与神经系统疾病的相关性主要通过影响机体对神经元的一些保护机制和作用来实现的。这方面的研究也对神经系统疾病的治疗提供了新的思路和作用靶点。2055MMP3 与其他疾病的关系除了上述疾病外，MMP3 的表达异常还与其他很多疾病相关，包括病理性骨关节，器官损害等。特别是在病理性骨关节中，针对 MMP3 表达的控制以寻求和完善对这些疾病预防和治疗的方法也是近年来医学工作者热衷于研究的方向。在 MMP3 的表达异常和器官损害相关性研究中，Ai IngLim 等在肾损害的研究中提出进行性肾损害中管状间隙的损伤是比较常见的发病途径，而肾小管上皮细胞（PTEC）在这个过程中的作用不容忽

33、视。肾损伤因210215220子（KIM-1）由于其作为肾损害的标记物所以也是肾损害过程中非常重要的一个因素。在他们的研究过程中发现，PTEC 的表达和 KIM-1 的释放受到 MMPs 的调控，而 MMP3 调控了人工培养 PTEC 中 KIM-1 的本体和加速脱落。而且由 PTEC 引起的 KIM-1 的释放以及 MMP-3的上调与活性氧的生成有关。因此，他们认为 MMP-3 在 PTEC 引起 KIM-1 脱落中扮演了诱导性的角色而最终影响到肾损害22。在病理性骨关节和 MMP3 异常表达的相关性研究中，很多学者发现在许多类型的病理性骨关节中，MMP3 的表达都有不同程度的增加。例如：Y

34、uze Wang 等在关于关节软骨营养和退化的研究中发现在软骨退化时，除了 MMP3 相对增加，型胶原蛋白的表达和聚集蛋白聚糖 mRNAs 都有所减少23。还有 Kaito, Takashi MD 等在关于内风湿性关节症（RA）的研究中发现 RA 的活动可以被疾病活性分数（DAS）-C reactive protein（CRP）和 MMP-3加强了，而且他还发现生物抑素的治疗降低了 CRP 和 MMP3 的表达，限制了关节结构的损-6-害24。在骨关节炎模型中，AitanaBraza-Boïls 等发现 MMP-3 的血清水平与膝关节炎第九周后小鼠膝关节内的病理性改变有关，所以他们认

35、为 MMP-3 是观察骨关节炎早期改变的敏感型生物标记25。综上所述，在与疾病相关性的研究提示：MMP3 的基因多态性，血清水平等与部分疾病早期病理性改变有关。提示也许可以将其作为疾病早期的诊断指标，以方便相225230235240关疾病的诊断。6 展望MMP3 作为基质金属蛋白酶家族中的重要的一员，很早就被人们所发现。早期对它的研究集中在 MMP3 的结构特点和功能特性，证明了 MMP3 在细胞外基质的降解过程中发挥着突出的作用。在很多疾病中，特别是转移性疾病如：肿瘤，炎性浸润的病程发展过程中，MMP3 的表达增加会促进疾病的发展，增加对病情控制的难度。这部分研究结果的公布为广大学者对 MM

36、P3 的认识提供了巨大的帮助，为之后与疾病相关性的研究提供了启示。近年来的研究热点包括：MMP3 基因多态性与疾病相关性以及 MMP3 作为疾病诊断的生物标记物等的研究。在神经系统疾病中，MMP3 的表达增加能够破坏神经元之间的紧密连接和水解一些神经功能活动所需的蛋白，如人类 DJ-1 蛋白21，从而造成神经元一系列的病理性表现。所以，近年来，对于神经系统疾病与 MMP3 的相关性研究也越来越受到广大学者的重视。已知急性青光眼早期也会出现视网膜节细胞的丢失，从已知的 MMP3 作用以及 Kim EM 等的观点来看，这种病理性表现可能也与 MMP3 在眼高压后的异常表达有关。这个研究方向的进行也

37、许可以使得一些激酶抑制类药物得到发展，从而降低节细胞的丢失，减少病人视野的丢失。综上所述，MMP3 对细胞外基质的降解作用参与了许多疾病的病理过程。我们通过总结对其前期的一些研究进展可以得出：将来 MMP3 可以作为许多疾病的检测靶点来提示相关疾病的得病风险率，从而可以针对性的实施预防措施和治疗方案。当然，目前的 MMP3与疾病相关的研究还需要广大学者不断地努力和工作来完善。这些研究结果必将对疾病病理过程的认识，临床诊断和治疗方法的完善产生深远的影响。245参考文献 (References)1 Kleiner DE, Stetler-Stevenson WG. Matrix metallopr

38、oteinases and metastasisJ. Cancer Chemother Pharmacol.1999, 43 Suppl: S42-512502552602652 Visse R, Nagase H. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function,and biochemistryJ. Circ Res. 2003, 92(8): 827-839.3 王爱民. 基质金属蛋白酶J. 国外医学.临床生物化学与检验学分册. 1995, (06): 24

39、5-248.4 金霞, 张健慧. 基质金属蛋白酶基因多态性的研究进展J. 国外医学（遗传学分册）. 2005, 28(2): 4.5 Egeblad M, Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progressionJ. Nat RevCancer. 2002, 2(3): 161-174.6 Saus J, Quinones S, Otani Y et al. The complete primary structure of human matrix metalloproteinase-3.Ide

40、ntity with stromelysinJ. J Biol Chem. 1988, 263(14): 6742-6745.7 董晓蕾, 张群燕, 蔡辉. 基质金属蛋白酶 3 在类风湿关节炎中的表达及调控J. 中国骨质疏松杂志. 2010,16(1): 4.8 Westermarck J, Kahari VM. Regulation of matrix metalloproteinase expression in tumor invasionJ. FASEB J.1999, 13(8): 781-792.9 Johansson N, Ahonen M, Kahari VM. Matrix

41、metalloproteinases in tumor invasionJ. Cell Mol Life Sci. 2000,57(1): 5-15.10 Husslein H, Haider S, Meinhardt G et al. Expression, regulation and functional characterization of matrixmetalloproteinase-3 of human trophoblastJ. Placenta. 2009, 30(3): 284-291.11 Chen WP, Hu PF, Bao JP et al. Morin exer

42、ts antiosteoarthritic properties: an in vitro and in vivo studyJ. ExpBiol Med (Maywood). 2012, 237(4): 380-386.12 陈华江, 王杰军. 基质金属蛋白酶的结构及其调节机制J. 国外医学（肿瘤学分册）. 2001, 28(1): 4.13 孙桂玲, 张莉, 管耘园. 基质金属蛋白酶抑制剂与冠心病J. 临床心血管病杂志. 2003, 19(10): 3.-7-27027528028529014 Gomis-Ruth FX, Maskos K, Betz M et al. Mechanism

43、 of inhibition of the human matrix metalloproteinasestromelysin-1 by TIMP-1J. Nature. 1997, 389(6646): 77-81.15 Braza-Boils A, Ferrandiz ML, Terencio MC et al. Analysis of early biochemical markers and regulation bytin protoporphyrin IX in a model of spontaneous osteoarthritisJ. Exp Gerontol. 2012,

44、47(5): 406-409.16 Ye S, Watts GF, Mandalia S et al. Preliminary report: genetic variation in the human stromelysin promoter isassociated with progression of coronary atherosclerosisJ. Br Heart J. 1995, 73(3): 209-215.17 Ye S, Watts GF, Mandalia S et al. Preliminary report: genetic variation in the human stromelysin promoter isassociated with progression of coronary atherosclerosisJ. Br Heart J. 1995, 73(3): 209-215.18 Woo