微生物实验细菌培养接种

1、会计学1微生物实验细菌培养接种微生物实验细菌培养接种去筋膜黄牛肉绞碎去筋膜黄牛肉绞碎500g500g加入加入1000ml1000ml蒸馏水蒸馏水直接煮沸直接煮沸2 2小时小时调整酸碱度至调整酸碱度至pH 7.6pH 7.6过滤，补足失水过滤，补足失水重新校正重新校正pH一次一次分装，高压灭菌，分装，高压灭菌，1515磅（磅（121.3121.3）15152020分钟分钟检菌如无细菌生长检菌如无细菌生长（液体透明）即可应用（液体透明）即可应用脱脂纱布脱脂纱布过滤，按过滤，按比例加入比例加入1 1蛋白胨、蛋白胨、0.5%0.5%NaClNaCl，0.1%K2HPO40.1%K2HPO4加热溶解补足

2、水至加热溶解补足水至1000ml1000ml44浸泡过夜煮沸半小时浸泡过夜煮沸半小时手衣发钱材料：普通平板材料：普通平板 （1 1份份/ /组）组）盖上，标记盖上，标记 , , 置置 3737，18-24h18-24h后观察后观察。材料：血平板材料：血平板 （1 1份份/ /组）组） 距口1520cm用力咳嗽三次置空气中（避日光照射）30分钟飞飞 沫沫空空 气气盖上，标记盖上，标记 , , 置置 3737，18-24h18-24h后观察。后观察。表皮葡萄球菌在血表皮葡萄球菌在血琼脂平板培养基上琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落形成不溶血的菌落。甲型溶血性链球菌形甲型溶血性链球菌形成的成的溶血现象

3、也称溶血现象也称为甲型溶血现象或草为甲型溶血现象或草绿色溶血现象，属于绿色溶血现象，属于不完全溶血。不完全溶血。金黄色葡萄球菌形成金黄色葡萄球菌形成的的溶血现象也称为乙溶血现象也称为乙型溶血现象，属于完型溶血现象，属于完全溶血。全溶血。菌种：混合菌液菌种：混合菌液材料：普通平板材料：普通平板用具：接种环用具：接种环方法：分区划线方法：分区划线1区区2 2区区3 3区区4 4区区原始区域半固体培养基斜面培养基 细菌培养接种细菌培养接种法法-斜面斜面接种、液体接种、半固体接种、液体接种、半固体菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面材料：斜面、液体、半固体培养基用具：接种环、接种针液体培养基普通琼脂平板培养基

4、上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。琼脂斜面培养基上大肠埃希菌形成的菌苔生长现象菌苔菌苔（mossy）指细菌生长繁殖后，在培养基 表面形成的一层培养物1、 扩散生长：具有动力的细菌,可见培养物扩散和培养基变混浊。即有鞭毛的细菌：由穿刺线向外扩散生长（羽毛状或云雾状）2、原位生长：没有动力的细菌，可见培养物没有扩散，培养基仍然澄清。即即无鞭毛的细菌： 沿穿刺线生长 2 1 1 2糖糖发酵试验发酵试验不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。 甲基红

5、（甲基红（methyl red）实验）实验M - 甲基红（methyl red）实验葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 甲基红 -葡萄糖丙酮酸 甲基红 +吲哚吲哚（indol）试验）试验I-吲哚（吲哚（indol）试验）试验色氨酸色氨酸吲哚吲哚玫瑰吲哚玫瑰吲哚 对二甲基氨基苯甲醛对二甲基氨基苯甲醛 枸橼枸橼酸盐利用试验酸盐利用试验C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验利用枸橼酸盐生长 +不能利用 - 硫化氢试验硫化氢试验硫化氢试验（醋酸铅培养基）某些细菌分解含硫氨基酸，生成H2S，H2S遇铁盐（如硫化亚铁、醋酸铅等），则形成黑褐色硫化铁（铅）沉淀物，而呈黑色为（）。 尿素酶试验

6、尿素酶试验 产生氨使培养基变碱，指示剂显红色，为阳性。如：变形杆菌为阳性。IMViC试验试验I - 吲哚吲哚（indol）试验试验M - 甲基红甲基红（methyl red）试验试验V - VP（Voges-Proskauer）试验试验C -枸橼酸盐利用枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验试验IMViC试验试验 I M Vi C试验试验 大肠埃希菌大肠埃希菌 + + - - 产气杆菌产气杆菌 - - + + IMViC试验：试验：是吲哚、甲基红、是吲哚、甲基红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定肠道杆菌的鉴定。

7、第三次实验课内容第三次实验课内容1、热力、热力对细菌和芽胞的杀菌对细菌和芽胞的杀菌作用作用2、紫外线、紫外线的杀菌的杀菌作用作用3、常用、常用化学消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感化学消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验试验4、耐药性、耐药性变异；变异；5、细菌、细菌的鞭毛变异；的鞭毛变异；6、高压灭菌器、高压灭菌器的使用；的使用；7、细菌、细菌的鉴定程序；的鉴定程序；8、全自动、全自动微生物分析仪的基本原理及简单操作步骤微生物分析仪的基本原理及简单操作步骤表皮葡萄球菌在血表皮葡萄球菌在血琼脂平板培养基上琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落形成不溶血的菌落。甲型溶血性链球菌形甲型溶血性链球菌形成的成的溶血现

8、象也称溶血现象也称为甲型溶血现象或草为甲型溶血现象或草绿色溶血现象，属于绿色溶血现象，属于不完全溶血。不完全溶血。金黄色葡萄球菌形成金黄色葡萄球菌形成的的溶血现象也称为乙溶血现象也称为乙型溶血现象，属于完型溶血现象，属于完全溶血。全溶血。 甲基红（甲基红（methyl red）实验）实验M - 甲基红（methyl red）实验葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 甲基红 -葡萄糖丙酮酸 甲基红 +枸橼枸橼酸盐利用试验酸盐利用试验C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验利用枸橼酸盐生长 +不能利用 -IMViC试验试验I - 吲哚吲哚（indol）试验试验M - 甲基红甲基红（me

9、thyl red）试验试验V - VP（Voges-Proskauer）试验试验C -枸橼酸盐利用枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验试验IMViC试验试验 I M Vi C试验试验 大肠埃希菌大肠埃希菌 + + - - 产气杆菌产气杆菌 - - + + IMViC试验：试验：是吲哚、甲基红、是吲哚、甲基红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定肠道杆菌的鉴定。第三次实验课内容第三次实验课内容1、热力、热力对细菌和芽胞的杀菌对细菌和芽胞的杀菌作用作用2、紫外线、紫外线的杀菌的杀菌作用作用3、常用、常用化学消毒剂的杀菌作用和抗生