分子遗传学复习题

1、1、 比较正向遗传学和反向遗传学，你怎么认为？正向遗传学大规模随机诱变， 产生发育异常的突变个体，然后再寻找突变的基因正向遗传学(forward genetics)经典的遗传学方法，开始研究突变表型以确定突变基因。最早的一个工具是分子遗传学家提出遗传的筛选。该技术的目的是为了确定突变，产生一定的表型。经常用诱变剂来促进这个过程。分离后，突变基因分子可以确定。正向遗传学筛查是分子遗传学家最初可使用的一种方法。该技术意在检定产生特定表型的变异。为了提高变异的速度，常使用诱变剂来实现。而一旦分离出变异体，就可以鉴定出对应的突变基因。传统的遗传学手段大致可以分为“正向遗传学”（forward gene

2、tics）和“反向遗传学”（reverse genetics）两类。正向遗传学是指，通过生物个体或细胞的基因组的自发突变或人工诱变，寻找相关的表型或性状改变，然后从这些特定性状变化的个体或细胞中找到对应的突变基因，并揭示其功能。例如遗传病基因的克隆。反向遗传学的原理正好相反，人们首先是改变某个特定的基因或蛋白质，然后再去寻找有关的表型变化。例如基因剔除技术或转基因研究。简单地说，正向遗传学是从表型变化研究基因变化，反向遗传学则是从基因变化研究表型变化。(本站摘自<生物谷>,08-7-10)反向遗传学反向遗传学(Reversed Genetics)经典遗传学的认知路线为由表及里，即通

3、过杂交等手段观察表型性状的变化而推知遗传基因的存在与变化。随着分子遗传学及相关实验技术的发展，已经能够在分子水平上进行操作，有目的地对DNA进行重组或者定点突变(in vitro site-directed mutagenesis)等。因此，现代遗传学中就出现了另一条由里及表的认知路线，即通过DNA重组等技术有目的地、精确定位地改造基因的精细结构以确定这些变化对表型性状的直接影响。由于这一认知路线与经典遗传学刚好相反，故将这个新的领域作为遗传学的一个分支学科，称为反向遗传学。例如，将报告基因(reporter gene)，即编码易于检测的蛋白质或酶的某些基因，分别与某些待测的DNA片段重组，转

4、染合适的细胞，通过测定报告基因的产物即可推断该片段在基因表达调控中的作用。反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生命的发生与发展规律。反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上,通过对靶基因进行必要的加工和修饰,如定点突变、基因插入缺失、基因置换等,再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组,让其装配出具有生命活性的个体,研究生物体基因组的结构与功能,以及这些修饰可能对生物体的表型、性状有何种影响等方面的内容。与之相关的研究技术称为反向遗传学技术。2、 设计一个遗传筛选试验？3、 调控元件1、增强子（Enhancer） 位于结构基因附近，能够

5、增强该基因转录活性的一段DNA顺序称为增强子（enhancer）（图）。增强子的特点（Characteristics of Enhancer） 增强子的作用特点包括： 在转录起始点5'或3'侧均能起作用； 相对于启动子的任一指向均能起作用； 发挥作用与受控基因的远近距离相对无关； 对异源性启动子也能发挥作用； 通常具有一些短的重复顺序。增强子的种类(Types of Enhancer) 2、终止子（Terminator） 位于基因编码区下游，能够终止RNA转录合成的特殊DNA序列称为终止子（terminator）。原核生物的终止子均具有回文结构，可分为依赖因子和不依赖因子的终止

6、子两种类型。真核生物的终止子则与polyA尾的添加相偶联。 3、沉默子（Silencer） 位于结构基因附近，能抑制该基因转录表达的DNA序列称为沉默子（silencer）。沉默子是一种负性调控元件。其作用特征与增强子类似，在组织细胞特异性或发育阶段特异性的基因转录调控中起重要作用（图）。4、绝缘子（Insulator） 在基因组内建立独立的转录活性结构域的边界DNA序列称为绝缘子/隔离子（insulator）。绝缘子能够阻止邻近的增强子或沉默子对其界定的基因的启动子发挥调控作用。 绝缘子的抑制作用具有“极性”的特点，即只抑制处于绝缘子所在边界另一侧的增强子或沉默子，而对处于同一染色质结构域内

7、的增强子或沉默子没有作用（图）。 绝缘子由多种组分所构成，它们自主协同阻断增强子或沉默子的作用。原核生物大多数基因表达调控是通过操纵子机制实现的。操纵子通常由 2个以上的编码序列与启动序列、操纵序列以及其他调节序列在基因组中成簇串联组成。启动序操纵子 操纵子列是RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列。多种原核基因启动序列特定区域内，通常在转录起始点上游-10及-35区域存在一些相似序列，称为共有序列。大肠杆菌及一些细菌启动序列的共有序列在-10区域是TATAAT，又称Pribnow盒（PribnowBox），在-35区域为 TTGACA。这些共有序列中的任一碱基突变或变异都会影响RNA聚合

8、酶与启动序列的结合及转录起始。因此，与共有序列的一致度决定启动序列的转录活性大小。操纵序列是原核阻遏蛋白的结合位点。当操纵序列结合阻遏蛋白时会阻碍RNA聚合酶与启动序列的结合，或使RNA聚合酶不能沿DNA向前移动，阻遏转录，介导负性调节。原核操纵子调节序列中还有一种特异DNA序列可结合激活蛋白，使转录激活，介导正性调节。 5乳糖操纵子乳糖操纵子包括调节基因、启动基因、操纵基因和结构基因。乳糖操纵子大肠杆菌的lac操纵子受到两方面的调控：一是对RNA聚合酶结合到启动子上去的调控（正调控）；二是对操纵基因的调控（负调控）。在含葡萄糖的培养基中大肠杆菌不能利用乳糖，只有改用乳糖时才能利用乳糖。调控机

9、理是：当在培养基中只有乳糖时由于乳糖的代谢产物异乳糖是lac操纵子的诱导物，它可以结合在阻遏蛋白的变构位点上，使构象发生改变，破坏了阻遏蛋白与操纵基因的亲和力，不能与操纵基因结合，于是RNA聚合酶结合于启动子，并顺利地通过操纵基因，进行结构基因的转录，产生大量分解乳糖的酶，这就是当大肠杆菌的培养基中只有乳糖时利用乳糖的原因。在含乳糖的培养基中加入葡萄糖时，不能利用乳糖的原因，即在lac操纵子的调控中，有降解物基因活化蛋白（CAP），当它特异地结合在启动子上时，能促进RNA聚合酶与启动子结合，促进转录（由于CAP的结合能促进转录，称为阳性调控方式）。但游离的CAP不能与启动子结合，必须在细胞内有

10、足够的cAMP时，CAP首先与cAMP形成复合物，此复合物才能与启动子相结合。葡萄糖的降解产物能降低细胞内cAMP的含量，当向乳糖培养基中加入葡萄糖时，造成cAMP浓度降低，CAP便不能结合在启动子上。此时即使有乳糖存在，RNA聚合酶不能与启动子结合，虽已解除了对操纵基因的阻遏，也不能进行转录，所以仍不能利用乳糖。常染色质与异染色质的区别与联系（1）两者结构上连续,化学性质上没有差异,只是核酸螺旋化程度(密度)不同.（2）异染色质在间期的复制晚于常染色质.（3）异染色质间期仍然高度螺旋化状态,紧密卷缩(异固缩),而常染色质区处于松散状态,染色质密度较低.（4）异染色质在遗传功能上是惰性的,一般

11、不编码蛋白质,主要起维持染色体结构完整性的作用常染色质间期活跃表达,带有重要的遗传信息.常染色体：赖氨酸 9 of Histone H3 is unmethylated. 赖氨酸 4 of Histone H3 is methylated异染色体（相反）DNA微阵列（DNA Microarray）也叫寡核苷酸阵列（Oligonucleitide array），是生物芯片中的一种。该技术的原理是在固体表面上集成已知序列的基因探针，被测生物细胞或组织中大量标记的核酸序列与上述探针阵列进行杂交，通过检测相应位置杂交探针，实现基因信息的快速检测。DNA微阵列技术的主要流程：芯片的制备：DNA芯片的制备

12、方法有光引导原位合成法、化学喷射法、接触式点涂法、原位DNA控制合成、非接触微机械印刷法TOPSPOT和软光刻复制等。目前已能将40万种不同的DNA分子放在1 cm2的芯片上。样品的制备：包括样品DNA或RNA的分离提纯和用PCR技术对靶基因片段扩增以及对靶基因标记。杂交反应：选择合适的反应条件使生物分子间的反应处于最适反应条件。芯片杂交属固-液相杂交，影响杂交的有诸多因素，其中包括：靶标浓度、探针浓度、杂交双方的序列组成、盐浓度、温度及洗涤条件。芯片信号的检测与分析：样品中靶基因与固定在芯片上的探针发生特异性杂交而结合在芯片上的不同点，荧光素分子受特定波长的激发光照射出特定波长的荧光。通过特

13、定的扫描仪获取杂交后的信号。DNA微阵列技术最突出的特点就是可一次性检测多种样品，获得多种基因的差别表达图谱，已成功地运用cDNA微阵列同时检测l万多个基因的表达。因此，DNA微阵列是对不同材料中的多个基因表达模式进行平行对比分析的一种高产出的、新的基因分析方法。与传统研究基因差异表达的方法相比，它具有微型化、快速、准确、灵敏度高，以及在同一芯片上同时大信息量平行检测的优势。DNA微阵列技术在基因表达图谱的绘制、寻找目的基因和功能基因等研究方面已取得了显著的成绩。但其不足之处在于所点样的序列并不都是试验需要检测的，且试验所需要的分析仪器比较复杂。另外，DNA微阵列技术在分析低丰度转录体方面比较

14、有限，要确保某种低丰度转录体包含于DNA微阵列上，需挑选非常大量的克隆进行扩增点样.5.3 真核生物RNA的合成与加工mRNA的加工修饰包括：5端形成帽子结构、3端加polyA、剪接除去内含子和甲基化。5-端加帽成熟的真核生物mRNA的5-端有m7GPPPN结构，称为甲基鸟苷帽子。它是在RNA三磷酸酶，mRNA鸟苷酰转移酶，mRNA（鸟嘌呤-7）甲基转移酶和mRNA（核苷-2）甲基转移酶催化形成的。不同的甲基化可形成3种帽子类型：0、1和2。鸟苷以5-5三磷酸键与RNA的5-端相连。当G第7位C被甲基化形成m7GPPPN时，此结构称为“帽子0”。存在于单细胞生物。如果RNA的第1位核苷酸的2-

15、O位也甲基化，形成m7GPPPNm，称为“帽子1”，普遍存在；如果RNA的第1、2位核苷酸的2-O位均甲基化（2位必需是A），成为m7G-PPPNmNm，称为“帽子2”，此结构发生很少。真核生物帽子结构的复杂程度与生物进化程度关系密切。5帽子的功能mRNA 5-端帽子结构是翻译起始所必要的，为核糖体识别mRNA提供了信号，并协助核糖体与mRNA结合使翻译从AUG开始。帽子结构可增加mRNA的稳定性，保护mRNA免遭53核酸外切酶的攻击。在3-端加尾巴大多数真核mRNA在3-端都有约150200nt的Poly（A）尾巴。Poly（A）尾是转录后在核内加上的。根据Poly（A）尾巴的特点可从众多的

16、RNA中分离mRNA。真核基因的3端有AATAA、YGTGTGYY（Y为嘧啶）序列，作为mRNA 3-端加polyA尾的信号。hnRNA链被RNase在加尾巴信号下游1130nt处切断磷酸二酯键，polyA聚合酶催化在3-OH上逐一引入100250个A。Poly（A）尾巴的功能防止核酸外切酶对mRNA信息序列的降解，起缓冲作用。可能与mRNA从细胞核转送到细胞质有关。但是相当数量的没有polyA尾巴的mRNA如组蛋白mRNA，也能通过核膜进入细胞质。Poly（A）尾巴可能对真核mRNA的翻译效率具有某种作用，使mRNA较容易被核糖体辨认。3-脱氧腺苷（冬虫夏草素）是多聚腺苷酸化的特异抑制剂，但

17、它不抑制hnRNA的转录，它的存在可阻止细胞中出现新的mRNA，表明多聚腺苷酸化对mRNA的成熟是必要的。mRNA甲基化真核mRNA往往有甲基化位点，主要是在N6-甲基腺嘌呤（m6A）。这种甲基化修饰对翻译没有必要，可能在mRNA前体加工中起识别作用。mRNA前体（hnRNA）的拼接真核生物的结构基因中具有可表达活性的外显子，也含有无表达活性的内含子（断裂基因）。内含子的数量与所在基因的大小有关。许多基因中的内含子参与基因表达调控。外显子一般大小为100200pb，内含子1kb。RNA编辑(RNA editing)RNA编辑同基因的选择剪接或可变剪接(alternative splicing)

18、一样，使得一个基因序列有可能产生几种不同的蛋白质，这可能是生物在长期进化过程中形成的、更经济有效地扩展原有遗传信息的机制。RNA编辑是通过比较成熟的mRNA与相应基因的编码信息时发现的，成熟的mRNA序列中有几种意想不到的变化，包括尿嘧啶（U）突变为胞嘧啶（C）、胞嘧啶突变为尿嘧啶、尿嘧啶的插入或缺失、多个鸟嘌呤（G）或胞嘧啶的插入等。由于RNA编辑是基因转录后在mRNA中插入、缺失或核苷酸的替换而改变DNA模板来源的遗传信息，翻译出多种氨基酸序列不同的蛋白质，RNA编辑的结果不仅扩大了遗传信息，而且使生物更好地适应生存环境。有些基因的主要转录产物必须经过编辑才能有效地起始翻译，或产生正确的可

19、读框(ORF)。RNA修饰方式分别是N6-甲基腺苷化修饰（N6-methyladenosine, m6A），以及尿苷化修饰（uridylation，U-tail）。前者也就是第5个碱基N6-甲基腺苷（m6A）。RNA剪接（RNA splicing）：从DNA模板链转录出的最初转录产物中除去内含子，并将外显子连接起来形成一个连续的RNA分子的过程。关键是依赖于剪接位点的判定.真核细胞pre-mRNA的剪接位点处存在一定的序列保守性，对于它所对应的cDNA序列而言，内含子5端（供体位点）和3端（受体位点）的碱基几乎都是GU和AG，因此称为GU-AG规则。RNA的再编码mRNA在某些情况下不是以固定

20、的方式翻译，而可以改变原来的编码信息，以不同的方式进行编码 包括：+1/-1移位；核糖体跳跃剪接连接点（splicing junctions)是指在切断和重接位点处的两旁的顺序。在内含子左侧的连接点称为供体（donor)，在内含子右侧的称为受体（acceptor)。在细胞核的结构基因（即编码多肽的基因）中的所有内含子在外显子-内含子连接处均有GU.AG的共同顺序。MicroRNA（miRNA）是一类内生的、长度约20-24个核苷酸的小RNA，几个miRNAs也可以调节同一个基因。可以通过几个miRNAs的组合来精细调控某个基因的表达。据推测，miRNA调节着人类三分之一的基因。MicroRNA

21、存在多种形式，最原始的是pri-miRNA，长度大约为3001000个碱基；pri-miRNA经过一次加工后，成为pre-miRNA即microRNA前体，长度大约为7090个碱基；pre-miRNA再经过Dicer酶酶切后，成为长约2024nt的成熟miRNA。是一种大小约2123个碱基的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成.在不同组织、不同发育阶段中miRNA的水平有显著差异，这种miRNAs表达模式具有分化的位相性和时序性提示miRNAs有可能作为参与调控基因表达的分子，因而具有重要意义。RNA干扰（RNA interfer

22、ence, RNAi）是指由dsRNA介导的同源RNA降解过程。基因沉默，主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类机理：病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内，并利用宿主细胞进行转录时，常产生一些dsRNA。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应，其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA（大约2123 bp），即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶（包括内切酶、外切酶、解旋酶等）结合形成RNA诱导的沉默复合物（RNA-i

23、nduced silencing complex，RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。siRNA不仅能引导RISC切割同源单链mRNA，而且可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase，RdRP）作用下合成更多新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA，从而使RNAi的作用进一步放大，最终将靶mRNA完

24、全降解。同义突变：碱基被替换之后,产生了新的密码子，但由于生物的遗传密码子存在简并现象,新旧密码子仍是同义密码子，所编码的氨基酸种类保持不变，因此同义突变并不产生突变效应。非同义突变：不导致氨基酸改变的核苷酸变异我们称为同义突变，反之则称为非同义突变。一般认为，同义突变不受自然选择，而非同义突变则受到自然选择作用。在进化分析中，了解同义突变和非同义突变发生的速率是很有意义的。常用的参数有以下几种：同义突变频率(Ks)、非同义突变频率(Ka)、非同义突变率与同义突变率的比值(Ka/Ks)。如果Ka/Ks>1，则认为有正选择效应。如果Ka/Ks=1，则认为存在中性选择。如果Ka/Ks<

25、1，则认为有纯化选择作用。无义突变（nonsense mutation ）是指由于某个碱基的改变使代表某种氨基酸的密码子突变为终止密码子，从而使肽链合成提前终止。 编码氨基酸的密码子突变为终止密码子，使肽链合成中断。移码突变：在正常的DNA分子中，碱基缺失或增加非3的倍数，造成这位置之后的一系列编码发生移位错误的改变，这种现象称移码突变。翻译：翻译过程需要的原料：mRNA、tRNA、20种氨基酸、能量、酶、核糖体。翻译的过程大致可分作三个阶段：起始、延长、终止。翻译主要在细胞质内的核糖体中进行，过程：氨基酸分子在氨基酰-tRNA合成酶的催化作用下与特定的转运RNA结合并被带到核糖体上。生成的多

26、肽链（即氨基酸链）需要通过正确折叠形成蛋白质，许多蛋白质在翻译结束后还需要在内质网上进行翻译后修饰才能具有真正的生物学活性。翻译后修饰：前体蛋白是没有活性的，常常要进行一个系列的翻译后加工，才能成为具有功能的成熟蛋白。翻译后修饰包括以下加入官能团的反应：1、 磷酸化加入磷酸根至丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸或组氨酸。2、糖基化将糖基加入天冬酰胺、羟离氨酸、丝氨酸或苏氨酸，形成糖蛋白。3、甲基化烷基化中常见的一种，在赖氨酸、精氨酸等的侧链氨基上加入甲基。4、泛素化 主要在苏氨酸、丝氨酸、半胱氨酸和赖氨酸。5、乙酰化通常于蛋白质的N末端加入乙酰。DNA甲基化与CpG岛： 在人类表观遗传学研究中，最常见的就

27、是CpG二核苷酸中胞嘧啶的甲基化修饰。其主要过程是，在CpG甲基化结合蛋白(Methyl-CpG Binding Proteins,MBDs) 和DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferases, DNMTs)的作用下，使CpG二核苷酸5端的胞嘧啶转变成为5甲基胞嘧啶。在正常人类的DNA中，约有3-6%的胞嘧啶被甲基化。在哺乳动物中，约有50,000,000个CpG二核苷酸，其中70%的被甲基化。而那些可被甲基化的CpG 二核苷酸并非随机的分布于基因组序列中，相反，在基因组的某些区域中，通常是基因的启动子区域，5端非翻译区和第一个外显子区，CpG序列密度非常高，超过均值5倍以上

28、，成为鸟嘌呤和胞嘧啶的富集区，称之为CpG岛(CpG Islands, CGIs)。DNA甲基化检测方法： 根据研究水平，又将这些方法归为3大类，即：基因组甲基化水平(Methylation Content)的分析，候选基因甲基化分析，和基因组层次的DNA甲基化模式(Methylation pattern)与甲基化谱(Methylation Profiling)分析。主要方法分述如下：A 基因组甲基化水平(Methylation Content)的分析:1. 高效液相色谱(High-performance Liquid Chromatography, HPLC) 2. 高效毛细管电泳法(Hig

29、h-performance Capillary Electrophoresis, HPCE) 以上各种方法虽然能够明确检测出目的序列中所有CpG位点的甲基化状况，但并不能对甲基化位点进行定位。B候选基因(Candidate Gene)甲基化分析:1. 甲基化敏感性限制性内切酶-PCR/Southern法( methylation-sensitive restriction Endonuclease -PCR/Southern, MSRE-PCR/Southern) 2. 重亚硫酸盐测序法(Bisulphite Sequencing)该方法首先用重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变

30、成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变，行PCR扩增所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶，最后,对PCR产物进行测序并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法是精确度很高，能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态，但需要大量的克隆测序,过程较为繁琐、昂贵。3. 甲基化特异性的PCR(methylation-specific PCR, MS-PCR) 该方法同样DNA先用重亚硫酸盐处理，随后行引物特异性的PCR。4. 甲基化荧光法(MethyLight)5. 焦磷酸测序(Pyrosequencing)6. 结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bisulfiter

31、estriction analysis, COBRA) C. 基因组范围的DNA甲基化模式(Methylationpattern)与甲基化谱(Methylation Profiling)分析: 1. 限制性标记基因组扫描(Restriction Landmark Genomic Scanning, RLGS)2. 甲基化间区位点扩增(amplification of inter-methylated sites, AIMS) 3. 甲基化CpG岛扩增(Methylated CpG-island amplification, MCA) 4. 差异甲基化杂交(Differential Methyl

32、ation Hybridization,DMH) 5. 由连接子介导PCR出的HpaII小片断富集分析(HpaII tiny fragement Enrichment by Ligation-mediated PCR, HELP) 6. 甲基化DNA免疫沉淀法(Methylated DNA immunoprecipitation, MeDIP)这是一种高效富集甲基化DNA的方法。种种方法都有其局限性，诸如对酶的依赖，PCR扩增的问题，芯片数据分析的标准化问题等等。Methods to Study DNA methylation（1）Locus-specific: Southern blots

33、with methylation-sensitive isoschizomers(e.g. HpaII/MspI) or methylation-specific enzymes (McrBC) DNA methylation-sensitive chop-PCR Bisulfite genomic sequencing Bisulfite treatment converts C (but not methyl-C) to U Bisulfite treat DNA + PCR + clone + sequence clones（2）Genome-wide: Digest DNA with

34、methylation-sensitive or methylationspecificenzymes + microarray hybridization or sequencing Affinity purification or immunoprecipitation of methylatedDNA + microarray hybridization or sequencing Bisulfite treat DNA + high-throughput sequencing去甲基化有两种方式： 1） 被动途径： 由于核因子N F 粘附甲基化的DNA，使粘附点附近的DNA不能被完全甲基

35、化，从而阻断DNM T1 的作用； 2） 主动途径： 是由去甲基酶的作用，将甲基基团移去的过程。在DNA 甲基化阻遏基因表达的过程中，甲基化CpG 粘附蛋白起着重要作用。虽然甲基化DNA 可直接作用于甲基化敏感转录因子E2F、CREB、A P2、CM yc&ouml;M yn、N F2KB、Cmyb、Ets，使它们失去结合DNA 的功能从而阻断转录，但是，甲基化CpG 粘附分子可作用于甲基化非敏感转录因子（SP1、CTF、YY1）,使它们失活，从而阻断转录。人们已发现5 种带有恒定的甲基化DNA 结合域（MBD ) 的甲基化CpG 粘附蛋白。其中M ECP2、MBD1、MBD2、MBD

36、3 参与甲基化有关的转录阻遏；MBD1 有糖基转移酶活性，可将T 从错配碱基对T&ouml;G 中移去，MBD4 基因的突变还与线粒体不稳定的肿瘤发生有关。在MBD2 缺陷的小鼠细胞中，不含M ECP1 复合物，不能有效阻止甲基化基因的表达。这表明甲基化CpG 粘附蛋白在DNA 甲基化方式的选择，以及DNA 甲基化与组蛋白去乙酰化、染色质重组相互联系中的有重要作用。染色质修饰：异染色质甲基化、组蛋白甲基化（复杂、保守，作用：Transcription activation， Transcription repression， Heterochromatin formation，DNA methylation，Imprinting，X chromosome inactivation），去甲基化、DNA为什么要包装在His中？Why DNA needs to bepackaged? Efficient way of geneticinformation storageAn elegant way of ge