探究培养液中酵母菌种群数量的变化PPT课件

1、基 础 回 扣1、酵母菌酵母菌是单细胞真核生物。生长周期短，增殖速度快，还可以用酵母菌作为实验材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判断细胞的死活探究膜的透性）第1页/共30页2、种群数量的变化 种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等 “S”型曲线有一个K值，即环境容纳量。 种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。第2页/共30页探究过程探究过程 1 1提出问题：提出问题： 2 2作出假设：作出假设： 3 3设计实验：设计实验： 4 4进行实验：进行实验： 5 5分析结果和分析结果和 表达交流：表达交流： 6 6得出结论：得出结论：培养

2、液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈“J J”型增长，随着时间型增长，随着时间的推移，由于资源和空间有限，呈的推移，由于资源和空间有限，呈“S S”型增长。型增长。 连续培养连续培养5 5天，每天用显微镜和血球计数天，每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度板计数出酵母菌种群密度各小组汇报实验结果，结合前各小组汇报实验结果，结合前4 4天的结果，天的结果，画出酵母种群增长的画出酵母种群增长的曲线图曲线图并进行分析。并进行分析。 酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈“J J”型增长，但型增长，

3、但随着时间的推移，由于资源和空间有限，随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈将呈“S S”型增长，并最终将全部死亡。型增长，并最终将全部死亡。 第3页/共30页3 3设计实验：设计实验： 将将10mL10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中； 将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀； 将试管在将试管在2828条件下连续培养条件下连续培养5d5d； 每天取样计数酵母菌数量；每天取样计数酵母菌数量； 分析结果，得出结论。分析结果，得出结论。是否设置对照组和多组重复实验？是否设置对照组和多组重复实验？为什么要连续

4、培养？为什么要连续培养？如何取样计数如何取样计数？记录表怎样设计记录表怎样设计？计数时有哪些注意事项计数时有哪些注意事项？第4页/共30页计数室计数室计数室（中间大方格）的长和宽各为计数室（中间大方格）的长和宽各为1mm1mm，深度为，深度为0.1mm0.1mm，其体积为，其体积为_mm_mm3 3 ，合，合_mL_mL。1mm0.1110-4血球计数板血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器一种专门计数较大单细胞微生物的仪器第5页/共30页计数室计数室计数室分为计数室分为25中格中格（双线边双线边）每一中格又分为每一中格又分为16小格小格计数室是由计数室是由_个小格组成个小格组成251

5、6=400第6页/共30页如何计数？如何计数？五点取样法五点取样法样方法样方法每每mL培养液中酵母菌数量培养液中酵母菌数量= =A ( (平均每个中格酵母细胞数平均每个中格酵母细胞数) )25104稀释倍数稀释倍数A1A2A5A3A4第7页/共30页第第 1 1 天天第8页/共30页第第 4 4 天天第第 6 6 天天第9页/共30页第第 7 7 天天死亡死亡第10页/共30页酵母菌数量变化记录表酵母菌数量变化记录表第11页/共30页计数时有哪些注意事项？计数时有哪些注意事项？从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次轻轻震荡几次； 如果酵母菌

6、浓度过大，应先如果酵母菌浓度过大，应先稀释稀释。对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边及夹角相邻两边及夹角计数；计数；对于已经出芽的酵母菌，对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半芽体达到母细胞大小一半时，即可时，即可作为两个菌体计算；作为两个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数已死亡的酵母菌不计数。每个样品一般计数三次，取其每个样品一般计数三次，取其平均值平均值。第12页/共30页培养液中酵母菌种群数量的变化培养液中酵母菌种群数量的变化 第13页/共30页第14页/共30页死亡死亡第15页/共30页在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什在计数前，还应有哪

7、些步骤？需注意些什么？么？ 培养液配制培养液配制 灭菌灭菌 接种接种 培养培养第16页/共30页试管试管编号编号培养液培养液/mL/mL无菌水无菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL温度温度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828 针对针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变培养液中酵母菌种群数量的动态变化化”，有人提出了新的问题，某同学按下表完，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验。成了有关实验。 第17页/共30页温度、营养物质对酵母菌生长的影响温度、营养物质对酵母菌生长的影响 第18页/共30页试管试管编号编

8、号培养液培养液/mL/mL无菌水无菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL温度温度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828第19页/共30页以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.血球计数板的使

9、用第20页/共30页第21页/共30页(5)计数时,如果使用16格25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞 (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数. 第22页/共30页3.计算公式(1)16格25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100400104稀释倍数(2)25格x16格的血

10、球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80400104稀释倍数第23页/共30页1 1 怎样进行酵母菌的计数？怎样进行酵母菌的计数？ 对一支试管中的培养液对一支试管中的培养液( (可定为可定为10ml)10ml)中的酵母菌中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底吸去，稍待片刻，待酵母菌

11、细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度为总数，盖玻片下，培养液厚度为0.1mm0.1mm，可算出，可算出10ml10ml培培养液中酵母菌总数的公式：养液中酵母菌总数的公式：2.52.510104 4x(xx(x为小方格内酵为小方格内酵母菌数母菌数) )第24页/共30页2 2 从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？振荡几次。

12、这是为什么？3 3 本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不需要，请说明理由。设计和操作；如果不需要，请说明理由。4 4 需要做重复实验吗？需要做重复实验吗？ 目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差证估算的准确性，减少误差。 不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数值即可。值即可。 不用重复，只要分组实验获得平均值即可。不用重

13、复，只要分组实验获得平均值即可。第25页/共30页5 5、怎样记录结果？记录表怎样设计？怎样记录结果？记录表怎样设计？6 6 如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样的措施？的措施？第第1 1天天第第2 2天天第第3 3天天第第4 4天天第第5 5天天第第6 6天天第第7 7天天第第1 1组组第第2 2组组第第3 3组组-第第n n组组平均值平均值 摇匀试管取摇匀试管取1mL1mL酵母菌培养液稀释酵母菌培养液稀释n n倍后，倍后，再用血球计数板计数，再用血球计数板计数，所得数值所得数值乘以乘以n n2.52.510104 4，即为即为10mL10mL酵母菌液中酵母菌个数。酵母菌液中酵母菌个数。只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。7 7 对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？第26页/共30页 设计实验：A组为实验组，装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度28。B组装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度5，与A组形成温度条件对照。C组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28，与A组形成营养条件对照。第27页/共30页 计数计数：首先取样，每 天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作