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文档简介
1、细菌室常规检测项目:一 形态学检查(morphological examination)(%1) 各种染色1革兰染色(gramstain):将细菌分为苹兰阳性菌如葡萄球菌属,链球菌属等;范兰阴性菌如人肠埃 希菌沙门菌,志贺菌等。2抗酸染色(acid-fast stain):通过染色将细菌分为两大类:抗酸性细菌利非抗酸性细菌,抗酸性细菌种 类较少,如结核分枝杆菌,麻风分枝杆菌等。正常:未见。抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找 见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示:+每个视野10根+ 每个视野发现110根+100个视野发现1099根+300个视野发现39根± 300个视野发现1-2根3
2、异染颗粒染色(metachromatic granula stain):用于检杳棒状杆菌。4墨汁染色(indian ink negative staining):用背景着色,而细菌本身不着色的染色方法,用于脑脊 液中查找新生隐球菌。正常:未见。5鞭毛染色(flagella stain):鞭毛的数目和位置随细菌种类而不同,可分为周毛菌、单毛菌、双毛菌 和从毛菌,是细菌分类和鉴定的重要依据。如霍乱弧菌是单鞭毛菌。6荚膜染色(capsules stain):荚膜是细菌壁外一层粘液性多聚物,赋予致病菌的侵袭力。染色将荚 膜染成与菌体不同颜色,可作为细菌鉴定的依据。如肺炎链球菌。(%1) 涂片检测(sm
3、ear)1便球杆比检査(stool cocus/bacillus):即革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌之比。正常值:便球杆比:1:3临床意义:健康人肠道内寄居着人量厌氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂养的婴儿肠道内以革兰阳性球 菌为主外,其余人均以革兰阴性杆菌占绝对优势。在肠道发牛致病菌如沙门、志贺、弧菌感染时往往 由于使用抗生索而是革兰阴性杆菌受到抑制,此时球菌/杆菌比值有可能变大。若比值显著增大,常提 示肠道菌群紊乱或发生二重感染。2标本真菌涂片(fungi):经革兰染色如发现革兰阳性卵恻形芽生抱子或假菌丝,可初步报告为:找 到真菌沦子和菌丝。正常值:未见真菌。3痰涂片检查(sputum smear)
4、:临床意义:目的确定标木是否适合做细菌培养,初步判定是否有致病菌存在。首先应确定标木是否为 來自下呼吸道的痰,其标准为革兰染色wbo25/lpf(低倍视野),上皮细胞10/lpfo冇些细菌对做初 步判断:1) 肺炎链球菌:革兰染色为阳性球菌,成双或短链状排列2) 结核分枝杆菌:抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示:+毎个视野10根+ 每个视野发现110根+100个视野发现1099根+300个视野发现39根±300个视野发现12根3) 真菌:经革兰染色如发现革兰阳性卵闘形芽生抱子或假菌丝,可初步报告为:找到真菌抱子和菌 丝。4) 放线菌及奴卡菌:革兰
5、染色后,插件中央部分菌丝为革兰阳性,而四周放射的末梢菌丝为革兰阴 性,切部分菌株有抗酸性。可报告:找见疑似放线菌或奴卡菌。4 淋球菌涂片检查(neisseria gonorrhoeae)临床意义:标木:男性以灭菌盐水清洗床道ii,収床道脓性分泌物涂片;女性床道炎患者清洗床道口 后从阴道后壁从后向前方压迫丿求道使分泌物排出,涂片。子宫颈炎患者先用灭菌盐水淸洗宫颈口和阴 道壁,再用阴道窥镜压迫子宫阴道部使分泌物排出。涂片范兰染色后镜检,屮性粒细胞内冇范兰氏阴 性双球菌貝有诊断价值。报告结果:“中性粒细胞内(或/和)外见到革兰阴性双球菌”。正常:未见。二 细菌分离培养(isolation and c
6、ulture of bacteria)1血培养(blood culture):临床意义:正常人体的血液是无菌的,当人体局部感染向全身播散和出现全 身感染时,血液中可出现细菌,依据程度不同称为菌血症或败血症.菌血症往往需要以多次血培养证实,如 农皮葡萄球菌,即可是致病菌,也是较常见的污染菌.正常:无菌生长。绘终阴性报告时间为7天。亚急性心内膜炎患者标本如56天无菌牛长,应继续 培养至2周方可报告阴性结果。布鲁氏菌培养第3周做出最终阴性报告。厌氧菌培养应在第2周做出 最终阴性报告。真菌血症应在第3周做出最终阴性报告。结核血培养应在第6周做出最终阴性报 告。2尿液培养(urine culture):
7、临床意义:正常人体膀胱小的尿液是无菌的,用膀胱穿刺取出的尿液应 是无菌的。当尿液经尿道排出体外,受到尿道中细菌的污染而混有细菌。取经尿道排岀的中断尿,细 菌数不会超过10必口1,因而,以此界限作为诊断泌尿道系感染的依据。尿液培养反映肾脏、球道、前列腺等的炎症变化,帮助临床选择有效抗菌药物。正常48小时仍无菌生 长可做最终阴性报告。24小时如有细菌生长即做细菌鉴定及药敏。3痰培养:(sputum culture):临床意义:痰中的病原菌不少属于机会致病菌,与正常菌群同在,在 报告时应做说明。对丁机会致病菌,一般仅当其数量超过正常菌群时才可报告鉴定结果及药敏试验结 果。检出致病菌时,除报告该菌的鑒
8、定名称外,还需同时报告正帘菌群情况。通帘以报告甲烈链球菌和奈 瑟氏菌作为正常菌群存在的指标。如:甲型链球菌+奈瑟氏菌+肺炎克雷们氏菌2+此报告表明肺炎克宙们氏菌在数最上多于正帘菌群,诊断为病原菌。未检出致病菌时,应报告“正常菌 群”。4咽拭子培养(pharynx swab culture):临床意义:鼻、咽部的细菌感染病原菌源于口腔,口腔屮既 有需氧菌,也有厌氧菌。同痰培养一样,病原菌不少屈丁机会致病菌,与正常菌群同在,耍止确区分。 未检出致病菌时,应报告“正常菌样”。5穿刺液标本(包括胸腹水、关节液、心包液)的培养(serous cavity effusion culture):临床意义:
9、正常的穿刺液是无菌的,有感染的情况下,只要检出细菌,通常都可视为是病原菌。正常:无菌生长。 6粪便培养(stool culture):临床意义:一方而从肠道人量细菌屮找出致病菌,对肠道疾病进行病原 学诊断并通过药敏试验为临床提供合适的用药;另一方而可对肠道菌群进行监测,在疾病治疗中预防 菌擀紊乱。正常:未检出致病菌。7脑脊液培养(csf culture):临床意义:正常人体脑脊液是无菌的。当人体患冇脑脊髓膜炎时,在脑脊髓液小可以出现病原菌。常见的病原菌冇细菌、真菌和结核菌等。正 常:无菌生长。8化脓及创伤感染标本的培养(purulent secretion culture):临床意义组织或器官
10、的化脓性感染,其病原菌的来源可以分为两类内源性:感染源是炎症局部周围的器官屮的正常菌群(帘在菌群),山于损伤等因素造成常在菌群进入无菌 状态的组织内,发牛感染.外源性:感染源是存在于人体外部口然界的微生物,由于外伤和接接触,外界微生物通过人体表面进入 人体,造成感染.常见细菌冇金黄色葡萄球菌、链球菌、消化链球菌;阳性杆菌冇炭疽芽抱杆菌、破伤风梭菌、产气荚 膜梭菌、溃疡棒状杆菌;阴性杆菌冇肠杆菌、嗜血杆菌、产碱杆菌、假单胞菌、无色杆菌、拟杆菌、 弧菌、气单胞菌;其他有放线菌、奴卡氏菌、念珠菌、结核分枝杆菌。三手工试验1触悔试验(catalase test):具有触陋(过氧化氢解)的细菌,能催化过
11、氧化氢,放出新生态氧,继而 生成分子氧出现气泡。2凝固酚试验(coagulase test):金黄色匍萄球菌产生的结合凝固砒 结合在细胞壁上,使血浆中的 纤维蛋白原变成纤维蛋白附着于细菌表而,发生凝集反应。3 camp试验:b群链球菌具有“camp”因子,能促进匍萄球菌0溶血素的活性,使两种细菌在划线处 呈现箭头形透明溶血区。4 optochin敬感试验:optochin (ethylhydrocupreine,乙基氢化去1t1奎宁的商占占名)町干扰帅炎链球 菌叶酸的生物合成,抑制该菌的生长,故帅炎链球菌对其敏感,其他链球菌对其耐药。5氧化酚试验(oxidase test):该试纸条适用丁 g
12、杆菌的氧化酶实验。具有氧化酶的细菌,首先使细胞 色素c氧化,再由氧化型细胞色索c使盐酸对二甲氨基苯胺氧化,并与a蔡酚结合,生成靛酚蓝而成 蓝色。用于初步判断奈瑟氏菌属及肠杆菌科的非发酵菌。6超广谱卜内酰胺悔的测定(esbls检测):有些大肠和肺克能产生超广谱0内酰胺臨 他不仅能水 解第一代和第二代头抱菌素,还能水解第三代头抱菌素类抗生素,如头抱他陀、头抱曝胯等和单酰胺 酶,使其失去抗菌作用,但对碳青霉烯类无明显作用。7 mrsa和mrs检测:用30ug纸片的头池西的药敏结果及新的折点能预测meca介导的耐药。8d-试验:大环内脂类耐药的匍萄球菌可以改变、诱导克林零索耐药。由erm基因导致23s
13、 rrna甲 基化耐药,与大环内脂类,林可霉素,和 链零素b烈有交叉,又叫mlsb耐药,或只耐大环内脂类 (msra基因编码的泵出机制)四血清学检测1肥达氏反应(widal):正常值:h: b: 80; o: 1<: 80; 甲:b: 80; 乙:b: 80:丙:v: 80临床意义:用标准伤寒、副伤寒菌液与稀释的待检测血淸反应,根据凝集效价判定血淸中冇无抗伤寒或 抗副伤寒杆菌的抗体。在病程的不同时期相隔57天,连续进行血淸学检査,如果血淸滴度随z増高4 倍或4倍以上就更冇诊断价值。2外斐氏反应(weil-felix):正常值:0x9: <1: 80 ; 0xk: <1: 80
14、临床意义:用与立克次氏体冇共同的抗原成分的变形杆菌冶9、x2、xk菌株的o抗原与被检血淸作交叉凝集反应, 借以诊断斑疹伤寒、恙虫病等立克次氏体病。-般认为凝集价>1: 80即冇诊断意义.更为重要的是此种 试验的凝集滴度随病程发展而很快上升(在发病两周末可升高数倍),到恢复后期乂明显下降。3结核抗体的检测仃b-check-1)正常值:阴性临床意义:快速、定性的过筛试验,能特异性地检测出活动性结核病人血淸、血浆或全血中的抗结核杆菌抗体。 主要检测igg和iga,高浓度的igm亦可被检出。接种过疫苗的人体试验不起反应。4支原体培养(解脉支原体uu或人型支原体mh)正常值:阴性临床意义:现已从人
15、类泌尿牛殖道分离出來7种支原体,其中分离率较高而与泌尿生殖道疾病有关, 是解服支原体,其次是人型支原体。人型支原体(m.humenis, mh) 解腺支原体(ureaplasma urealyticum, uu)和生殖器支el体(m.genitalium, mg)都会引起泌球生殖道感染。uu与新生儿疾 病与成人泌球生殖道系统炎症疾病冇关,传播途径为性接触和母婴接触,因此uu感染列为性传播疾 病常引起非淋菌性尿道炎,慢性前列腺炎和附睾炎,不育不孕,妊娠期感染等。mh主要引起泌尿生 殖系统感染包括盆腔炎,急性肾盂肾炎,阴道炎及宫颈炎等。在健康人群中,可能有u.u或m.h寄生, 但103ccu/ml
16、,故本试剂盒检测结果为阴性。检测到104ccu/ml的u.u或m.h有较明确临床意义, 一般需用药治疗。io?104ccu/ml的u.u或m.h,提示支原体轻度感染,供医生诊断治疗时参考。 7革兰阴性菌脂多糖(lps)检测:体液内毒素测定(卷试验)正常范围:copg/ml临床意义:细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁最外层结构具冇多种生物效应, 微量内毒素进入机体后,将会产生发烧、休克及内毒素血症等临床症状。以蛍实骑來检测内毒素,能对 内毒素血症、革兰氏阴性细菌败血症和革兰氏阴性细菌感染的病人做岀早期诊断和治疗。8真菌(1-3)葡聚糖检测(g试验)正常范环1opg/ml临床意义:所彳j真菌的细胞壁上
17、都含冇(1-3)-p-d-w聚糖,而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液都不含这种成分,因此在机体的 体液屮检测到(13)0d葡聚糖时诊断侵袭性真菌感染的冇效依据。9嗜杲性凝集检试验:正常值:阴性或凝集价c: 8临床意义:传染性单核细胞增多症的病原体是eb病毒,病人血清中可测到嗜异性凝集和抗eb病毒的 抗体,此试验可诊断此病。凝集价冇较大增高见于:血淸病、何杰金氏病和ii木血吸虫感染的急性期。 当凝集价达到1: 224以上时可结合病人临床症状确诊为传染性单核细胞增多症。约10%的病人试验 为阴性,以儿童和婴儿为主。10布氏杆菌凝集试验(bacterium burgeri agglutination test):正常值:阴性临床意义:是应用已知菌株检测血清中特异性抗体,目前仍是国际标准诊断布氏病的血清学方法。感 染2周后阳性率可达90%, 35周时,效价最高,1: 160以上冇诊断意义,动态观察升高4倍以上 更冇意义。其对人体感染的阳性检出率为:急性期为94.85%;业急性期为87.50%;慢性期为61.11%0 随着病程的延长和康复,血淸中特异性抗体效价逐渐降低,们亦有持续高效价达数年z久。影响该实验 的因索除影响抗原抗体反应常见因素外,严格学握诊断菌的浓度十分重要诊断菌液的浓度越大,敏感性 越低,反之敬感性提高。
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