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文档简介
1、前言: 我国肝炎发病率不断呈上升趋势,临床上对于治疗肝炎的新药物的研究也在不断发展,肾上腺素(EPI)作对于肝炎症性损伤的保护作用在临床上尚处于研发阶段,有很大的临床应用前景。本实验利用内毒素脂多糖(LPS)会造成小鼠肝脏炎症性损伤,比较是否给予EPI的不同组小鼠间的肝脏是否形成炎症性损伤及其损伤程度,不同剂量的EPI对肝脏的保护作用是否存在剂量关系。第1页/共13页实验材料与试实验材料与试剂剂第2页/共13页实验对象:50只SPF级SD大鼠(由实验室提供) 实验动物介绍: SD大鼠:由美国的Sprague & Dawley农场的R.W.Dawley用杂合的雄性大鼠和Wistar雌性大
2、鼠杂交后育成的一个白化封闭群大鼠。 SPF级动物:机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,但非特定的微生物和寄生虫是容许存在的。一般指无传染病的健康动物,是目前国外使用最广泛的实验动物。筛选标准:体重为200g左右的雄性大鼠第3页/共13页实验仪器与试剂 实验仪器与器材:Beckman全自动生化分析仪CX-5型,静脉注射器,剪刀,镊子,自动分析天平,小试管,移液管实验试剂:LPS(同一厂家生产,同批号),EPI (同一厂家生产,同批号),生理盐水,标记染料(苦味酸,品红) 第4页/共13页实验动物分组及处理方式第5页/共13页分组方法:分为5组,每组10只。采用完全随机分组法。 1、编号:按动
3、物体重从小到大编号并标记。 2、取随机数:给每个编号一个随机数(查随机数表或从计算机获得)。 3、确定组别:根据受试对象获得的随机数决定受试对象的组别。第6页/共13页处理方式: 第一组:为空白对照组,先静脉注射生理盐水6mg/kg,再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。 第二组:为LPS组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴生理盐水2.4ml/kg/h,持续6小时。 第三组:为EPI低剂量组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.12g/kg/min,持续6小时。 第四组:为EPI中剂量组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.3g/kg
4、/min,持续6小时。 第五组:为EPI高剂量组,先静脉注射LPS 6mg/kg,再静脉点滴肾上腺素0.6g/kg/min,持续6小时。 备注:对照组所用生理盐水及其剂量为参考文献所得。 第7页/共13页实验相关检实验相关检测指标的取测指标的取样及观察样及观察第8页/共13页 1、于LPS注射前、注射后两小时采用内眦静脉取血法分别取适量血,检测血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 2、于LPS注射后六小时断头处死并取血,检测血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 3、对实验动物进行解剖,取肝脏,观察其组织病理学改变。第9页/共13页结果的分析方结果的分析方法法
5、第10页/共13页 1、比较第一组与第二组的各项指标:LPS是否对大鼠肝脏造成炎症性损伤及其损伤程度。 2、比较第二组与第三、四、五的各项指标:EPI对LPS造成的大鼠肝脏炎症性损伤是否具有一定的保护作用。 3、对第三、四、五组的各项指标进行比较:不同剂量的EPI对大鼠肝脏炎症性损伤的保护作用是否存在剂量关系。 统计分析:采用SPSS软件作各组间的方差分析比较其差异性。第11页/共13页参考文献: 1、杨文敏,曾其毅中国循证儿科杂志2007年2卷四期 2、Bozkurt S, Ersoy E, Tekyn HE. The cytoprotective effect of iloprost against carbon tetrachloride induced hecrosis in rat l
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