高考生物一轮复习 2-1-10-39 生物技术在其他方面的应用优质课件

1、1第第39讲生物技术在其他方面的应用讲生物技术在其他方面的应用234物理和化学性质物理和化学性质 5析出析出 溶解溶解 析出析出 水解水解 80 60 80 二苯胺二苯胺 蓝蓝 6血细胞吸水破裂血细胞吸水破裂 瓦解细胞膜瓦解细胞膜 溶解溶解DNA 7NaCl溶液溶液 蛋白酶蛋白酶 高温高温 冷却的酒精溶液冷却的酒精溶液 二苯胺二苯胺 蓝色蓝色 8加蒸馏加蒸馏水水2次次加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；加加到含到含DNA的的2 mol/L的的NaCl溶液中，使溶液中，使NaCl溶液溶液的物质的量浓度下降到的物质的量浓度下降到0.14 mol/L，使，使DNA

2、析出析出用纱布用纱布过滤过滤3次次过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液；液；滤取滤取0.14 mol/L的的NaCl溶液中析出的溶液中析出的DNA(黏稠物黏稠物)；过滤溶有过滤溶有DNA的的2 mol/L的的NaCl溶液溶液用用NaCl溶液溶液4次次加加2 mol/L的的NaCl溶液，溶解提取的细胞核物溶液，溶解提取的细胞核物质；质；用用0.14 mol/L的的NaCl溶液使溶液使DNA析出；析出；用用2 mol/L的的NaCl溶液，溶解滤取的溶液，溶解滤取的DNA黏稠黏稠物；物；用用2 mol/L的的NaCl溶液，溶解丝状物用于鉴溶液，溶解丝状物用于

3、鉴定定DNA910111213材料保存温度材料保存温度花菜花菜辣椒辣椒蒜黄蒜黄20 20 14探究不同材料和不同保存探究不同材料和不同保存 温度对温度对DNA提取量的影响提取量的影响 DNA断裂断裂 等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下， 从蒜黄提取的从蒜黄提取的DNA量最多量最多 15低温抑制了相关酶的活性，低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢降解速度慢 将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置 一段时间，吸取上清液一段时间，吸取上清液 161718蒸馏水蒸馏水 滤液滤液 DNA在不同浓度在不同

4、浓度NaCl溶液中溶液中 溶解度不同，通过控制溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质溶液的浓度去除杂质 蒸馏水蒸馏水 0.14 19滤液滤液 酒精酒精 白白 二苯胺二苯胺 蓝蓝 2021DNA双链复制双链复制 22变性变性 90 23复性复性 50 延伸延伸 72 24变性、复性、延伸变性、复性、延伸 指数指数 252627理化理化 大小大小 性质性质 溶解度溶解度 28相对分子质量相对分子质量 较小较小 较慢较慢 较大较大 外部外部 较短较短 较快较快 2930正电或负电正电或负电 带电性质的差异带电性质的差异 迁移速度迁移速度 31步骤步骤操作操作样品样品处理处理通过红细胞的洗涤通

5、过红细胞的洗涤(除去杂蛋白，以利于后续步骤除去杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化的分离纯化)、血红蛋白的释放、血红蛋白的释放(在蒸馏水和甲苯的在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞破裂，细胞膜被溶解，释放出血红作用下，红细胞破裂，细胞膜被溶解，释放出血红蛋白蛋白)、分离血红蛋白溶液、分离血红蛋白溶液(经过离心使血红蛋白和经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来其他杂质分离开来)等操作收集到血红蛋白溶液等操作收集到血红蛋白溶液粗分粗分离离利用透析法去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小利用透析法去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质的杂质纯化纯化利用凝胶色谱法分离相对分子质量不同的蛋白质利用凝胶色谱法分离相对分

6、子质量不同的蛋白质纯度纯度鉴定鉴定采用采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯化的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯化的蛋白质是否达到要求是否达到要求3215/16 三三 333435引物引物和引物和引物局部发生碱基互补配对而失效局部发生碱基互补配对而失效 引物引物自身折叠后会出现局部碱基互补配自身折叠后会出现局部碱基互补配 对而失效对而失效 DNA聚合酶只聚合酶只 能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上片段的引物链上 36373839血红蛋白的释放血红蛋白的释放 凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的装填 相对分子质量的大小相对分子质量的大小 杂蛋白杂蛋白(或血浆蛋

7、白或血浆蛋白) 离心后的上清液中没有黄色离心后的上清液中没有黄色 三三 40 均匀一致地移动均匀一致地移动 414243比较项比较项目目分离分离DNAPCR技术技术 分离蛋白质分离蛋白质实验原实验原理理DNA在不同浓度在不同浓度NaCl溶液中溶解溶液中溶解度不同，且不溶度不同，且不溶于冷酒精于冷酒精利用利用DNA热热变性原理体变性原理体外扩增外扩增DNA依据相对分子依据相对分子质量的大小不质量的大小不同来分离蛋白同来分离蛋白质质44实验过实验过程程选取材料选取材料破碎破碎细胞释放细胞释放DNA除杂除杂DNA析出析出与鉴定与鉴定变性变性复性复性延伸延伸样品处理样品处理凝凝胶色谱操作胶色谱操作实验

8、结实验结果果获得较纯净的获得较纯净的DNA获得大量获得大量DNA相对分子质量相对分子质量不同的蛋白质不同的蛋白质得以分离得以分离实验意实验意义义为为DNA研究打下研究打下基础基础解决了解决了DNA研究中材料研究中材料不足的问题不足的问题为蛋白质的研为蛋白质的研究和利用提供究和利用提供了原材料了原材料4546水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏 47实验步骤实验步骤关键点关键点鲜玫瑰花清水鲜玫瑰花清水二者质量比为二者质量比为_水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏在蒸馏瓶中加几粒沸石，防止液在蒸馏瓶中加几粒沸石，防止液体体_；控制蒸馏的控制蒸馏的_油水混合物分层油水混合物分层呈呈_色的乳浊液，加入色的乳浊液，加入NaCl使使_分

9、离油层分离油层用用_把油水分离把油水分离除水除水加入加入_吸收水分，再吸收水分，再过滤除去过滤除去玫瑰精油玫瑰精油出油率玫瑰精油质量出油率玫瑰精油质量/原料质量原料质量1 4 过度沸腾过度沸腾 时间和速度时间和速度 乳白乳白 乳化液明显分层乳化液明显分层 分液漏斗分液漏斗 无水无水Na2SO4 48实验步骤实验步骤关键点关键点石灰水石灰水浸泡橘浸泡橘皮皮石灰水的作用：破坏细胞结构，分解石灰水的作用：破坏细胞结构，分解_，防止橘皮压榨时滑脱，提高，防止橘皮压榨时滑脱，提高_；为了能使橘皮均匀的浸泡，可将其为了能使橘皮均匀的浸泡，可将其_漂洗漂洗目的是目的是_，漂洗完后要沥干水分漂洗完后要沥干水分

10、压榨压榨 果胶果胶 出油率出油率 粉碎粉碎 洗去石灰水，防止影响精油的质量洗去石灰水，防止影响精油的质量 49压榨压榨加入与橘皮同质量的质量分数为加入与橘皮同质量的质量分数为0.25%的的_和质量分数为和质量分数为5%的的_溶液，溶液，并调节并调节pH至至_，目的是，目的是_过滤、过滤、离心离心加入加入_，使之沉淀并变澄清，然后用，使之沉淀并变澄清，然后用_过滤，除去糊状残渣。然后进行离过滤，除去糊状残渣。然后进行离心，除去心，除去_的固体物，用的固体物，用_或或者吸管分离上层橘皮油者吸管分离上层橘皮油静置静置分离的产品放在分离的产品放在_的冰箱中，静置的冰箱中，静置57 d，使杂质沉淀，吸取

11、上层橘皮油，使杂质沉淀，吸取上层橘皮油再过滤再过滤用用_过滤，取滤液，和上层橘皮油混过滤，取滤液，和上层橘皮油混合合小苏打小苏打 硫酸钠硫酸钠 78 使橘皮油易与水分离使橘皮油易与水分离 明矾明矾 布袋布袋 质量较小质量较小 分液漏斗分液漏斗 510 滤纸滤纸 50不溶于不溶于 易溶于易溶于 萃取萃取 石油醚石油醚 51实验流程实验流程关键点关键点选取胡萝卜选取胡萝卜胡萝卜要新鲜，用清水洗净，沥干胡萝卜要新鲜，用清水洗净，沥干粉碎粉碎粉碎要彻底并过筛，有利于粉碎要彻底并过筛，有利于_干燥干燥温度不能太高，否则会导致温度不能太高，否则会导致_萃取萃取在一定范围内，温度要在一定范围内，温度要_、时

12、间、时间要要_，保证萃取的效果，保证萃取的效果过滤过滤除去除去_浓缩浓缩使用使用_装置浓缩，获得胡萝卜素装置浓缩，获得胡萝卜素有效成分充分溶解有效成分充分溶解 胡萝卜素分解胡萝卜素分解 高高 长长 杂质杂质 蒸馏冷凝蒸馏冷凝 纸层析纸层析 5253晾干晾干 高温烘干过程中，植物甲中的物质高温烘干过程中，植物甲中的物质 W易被破坏；新鲜的植物甲含水量高，用于提取的极性有机易被破坏；新鲜的植物甲含水量高，用于提取的极性有机 溶剂会被水稀释，进而降低对物质溶剂会被水稀释，进而降低对物质W的提取效果的提取效果 使原料和溶剂充分混匀使原料和溶剂充分混匀 去除提取液中的色素去除提取液中的色素 54丙酮沸点

13、低于乙醇，蒸馏时物质丙酮沸点低于乙醇，蒸馏时物质W分解较少分解较少 在温度较低的情在温度较低的情 况下操作，防火况下操作，防火 555657压榨压榨 橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解， 水中蒸馏会导致原料焦糊等问题水中蒸馏会导致原料焦糊等问题 58干燥去水干燥去水 破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出 油率油率 59能够承受的压力范围能够承受的压力范围 相当于橘皮质量相当于橘皮质量0.25%的的NaHCO3和和5%的的Na2SO4 78 60离心离心 上层橘皮油上层

14、橘皮油 滤液与吸出的上层橘皮油滤液与吸出的上层橘皮油 61提取提取方法方法蒸馏蒸馏压榨压榨萃取萃取实验实验原理原理利用水蒸气将挥利用水蒸气将挥发性较强的芳香发性较强的芳香油携带出来油携带出来通过机械加通过机械加压，压榨出果压，压榨出果皮中的芳香油皮中的芳香油使芳香油溶解在使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获发溶剂后就可获得芳香油得芳香油方法方法步骤步骤水蒸气蒸馏；水蒸气蒸馏；分离油层；分离油层；除水过滤除水过滤石灰水浸石灰水浸泡、漂洗；泡、漂洗；压榨、过压榨、过滤、静置；滤、静置；再次过滤再次过滤粉碎、干燥；粉碎、干燥；萃取、过滤；萃取、过滤；浓缩浓缩62适用适用范围范围适用于提取玫适用于提取玫瑰油、薄荷油瑰油、薄荷油等挥发性强的等挥发性强的芳香油芳香油适用于柑橘、柠适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料檬等易焦糊原料的提取的提取适用范围广，要适用范围广，要求原料的颗粒要求原料的颗粒要尽可能细小