HCY临床报告乌鲁木齐

1、同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）临床试验报告研究开始日期： 年 月 日研究完成日期： 年 月 日临床试验负责人（签名）： 临床试验机构（盖章）统计学负责人（签名）统计学负责人单位（签章）产品注册申请人（盖章）： 北京 有限公司注册申请人的联系人： 联系电话： 报告日期：年 月 日原始资料保存地点： 2同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）临床试验报告目录 1、研究摘要22、试验研究人员23、缩略语24、引言25、研究目的36、试验管理37、试验设计38、临床研究结果及分析69、讨论和结论910、有关临床研究中特别情况的说明911、附件10一、研究摘要选择北京九强生物技术有限公司生产的同型半胱氨酸测定试剂

2、盒（循环酶法），与北京 生物工程技术有限公司研制的同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）对100例临床血清样本进行对比试验研究，北京 生物工程技术有限公司研制的同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）与对照试剂具有等效性，且适用于临床辅助诊断。二、试验研究人员姓 名职 务在研究中的职责检验科副主任临床试验负责人/统计学负责人/临床试验人员三缩略语序号缩 略 语全 称1HCYHomocysteine 同型半胱氨酸四、引言北京 生物工程技术有限公司主要从事体外诊断试剂的研究、开发及生产。同型半胱氨酸测定试剂为公司生化试剂领域内的新产品，需与生化仪配套使用，主要用于定量测定人血清中同型半胱氨酸的含量。同型半胱氨酸（h

3、omocysteine，HCY）又称高半胱氨酸，是蛋氨酸去甲基后形成的一种含硫氨基酸，属于蛋氨酸循环的中间产物。有关其代谢紊乱的报道最早来源于先天性胱硫醚合成酶缺乏导致出现同型半胱氨酸尿患者的观察。此后，又相继发现其他几种参与HCY代谢的酶或辅酶改变所引起的代谢紊乱。近几年来，随着测定技术方法的改进，已经能够对正常人血浆中以各种形式存在的HCY进行测定，并且发现在心、脑及外周血管疾病、慢性肾功能不全、牛皮癣、维生素B12缺乏等疾病的患者中存在HCY的代谢紊乱。对同型半胱氨酸的研究始于20世纪70年代，1969年首次提出高同型半胱氨酸血症可致动脉粥样硬化并可形成血栓后，人们逐渐发现人体血清中同型

4、半胱氨酸的含量与冠心病、脑血管疾病、外周血管疾病和静脉血栓的发生和发展有着密切的关系，而且随着同型半胱氨酸含量的增加发生血管疾病的危险也呈递增趋势。 目前市售同型半胱氨酸测定试剂盒，主要是采用酶法进行测定。北京 生物工程技术有限公司的同型半胱氨酸测定试剂盒为自主研发，采用酶法其方法原理为：同型半胱氨酸被转化为游离型后，通过与共价底物反应，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）转化为NAD+，样本中的同型半胱氨酸的浓度与NADH的变化成正比。北京 生物工程技术有限公司委兰州军区乌鲁木齐总医院对同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）与

5、已批准上市产品进行对比临床试验研究。申请人和临床研究单位间基于此次临床试验研究建立委托合作关系,无其他合作关系。五、研究目的对北京 生物工程技术有限公司生产的同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）进行临床试验研究，结合临床症状和诊断，评估其与已批准上市产品的等效性。六、试验管理1、此次临床试验研究由冉继华主要负责， 等参加。2、实验室质量控制情况1） 严格按照产品说明书进行操作，确保了试验结果准确。2） 在每次实验中都检测质控血清，测定值均应在规定范围之内。3） 临床试验应指定专人负责，操作人员均经过良好的训练，具备娴熟的操作技能。4） 对比研究用试剂选用了已批准上市的质量较好的同类产品。3、统计/数

6、据管理情况1） 试验数据分别在SPSS和EXCEL软件上进行分析，以避免由于软件问题引起的误差，确保统计结果的有效性。2）对原始数据进行存档。4、研究中发生的问题及其处理措施整个研究过程进行顺利，未出现任何意外情况。七、试验设计1. 试验总体设计及方案的描述对试剂盒的性能指标：试剂空白、准确性、灵敏度、测定线性范围以及批内精密度进行检测。同时选择已批准上市的同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）产品与本品对临床样本进行对比试验。如果对同一份血清或血浆样本，双方试剂检测结果一致时，认同检测结果。如果对同一份样本检测结果不一致，选用第三种试剂或方法进一步检测，结果遵从多数原则。2. 试验设计及研究方法

7、选择（1） 性能指标检测试剂空白以蒸馏水为检测样本时，吸光度应不小于0.800A。试剂空白吸光度变化率以蒸馏水为检测样本时，每分钟吸光度变化值(A/min)的绝对值应不大于0.100A分析灵敏度Hcy含量为10umol/L时，测定吸光度变化率(减掉试剂空白吸光度变化率) A 0.002Abs/min。准确性以定值质控血清为标本，测定值在给定的范围内。线性范围在0-50umol/L范围内，设定浓度为：0， 12.5，25.0，37.5，50umol/L进行检测，测定结果的相关系数r0.990。批内精密性同一批试剂分别同时测定高低值两个标本，变异系数（CV）8.0%。（2） 样本量及样本量确定的依

8、据选择依据：已批准上市同类产品与本品对比试验具有临床和统计学意义。为了体现结果的广泛性和代表性，考察性别、年龄等因素是否会对结果产生影响，我们选择对象包括男性也包括女性，年龄从11岁到83岁：对照组：70例正常人样本，其中男性39名，女性31名，年龄41.03±15.42岁；所有受试者均无动脉粥样硬化、冠心病等疾病的患者。疾病组：经临床诊断为动脉粥样硬化、冠心病等疾病的患者30例，男性19例，女性11例，年龄41.37±13.92岁。（3） 样本选择依据、入选标准、排除标准和剔除标准。按照医院正常模式收集血清样本。样本保存时间28天（02，未长时间暴露于空气中）；患者组均为

9、临床诊断确定为动脉粥样硬化、冠心病等疾病的患者；对照组均为临床诊断确定为无动脉粥样硬化、冠心病等疾病的患者；剔除表观出现浑浊变质、高度溶血迹象的样本。（4） 样本采集、保存、运输方法等所有样本均来自本院检验科，全部为血清样本。血清采集方法为：采集空腹静脉晨血，经3000r/min离心30 min，分离收集上层血清，密封后保存于4冰箱。（5） 对比试验产品的确立。本次临床试验采用与已上市的同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）作对比研究。北京九强生物技术有限公司生产的同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）目前已经在临床上应用，在市场上已经获得好评。（6） 临床研究用产品的相关情况 临床试验研究用产品：名

10、称：同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法） 来源：北京 生物工程技术有限公司规格：R1-66 ml，R2-18ml批号：090812 效期：12个月 保存条件：2-8 对比用已批准上市的同类产品：名称：同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）来源：北京九强生物技术有限公司规格：R1：2×20ml，R2：1×7ml，R3：1×6ml批号：09-1120P 效期：12个月 保存条件：2-8批准文号：国食药监械(准)字2006第3400161号分析仪器：雅培Aeroset2000型全自动生化分析仪。（7） 质量控制方法每次试验使用校准品校准，测定质控值应在允许范围内，方可表明试剂盒对

11、其它样本的检测结果是可以接受的，否则试验无效重新进行检测。每次试验复核人严格按要求对操作过程及结果进行复核确认。（8） 临床研究数据的统计分析方法。 采用EXCEL2003和SPSS13.0软件进行统计学分析，分组计算同型半胱氨酸检测值的平均值（）和标准差(SD)，对所有样本在两试剂盒上的检测结果进行相关性分析，根据P值判断相关的显著性水平。（9） 研究过程中方案的修改临床研究过程严格按照临床考核方案进行，未做任何修改。八、临床研究结果及分析1、样本检测结果对两组数据进行t检验，由t界值表查得P值，t1.66<1.98，P>0.05两组数据无显著性差异。（结果见表1）北京 生物工程

12、技术有限公司研制的试剂盒和北京九强生物技术有限公司生产的试剂盒对不同组样本检测值的判定结果均相同，两者符合率100%，但不同样本检测浓度值不同。表1：样本测定结果组别例数检测结果（umol/L）±SD参考值范围内样本（例数）九强生物 九强生物 对照组708.5±2.78.5±2.87070病理组3022.6±3.423.2±3.6002、两试剂盒相关性分析以北京九强生物技术有限公司生产的试剂盒的检测值为X坐标，以北京 有限公司研制的试剂盒的检测值为Y坐标，绘制坐标图。对两试剂盒检测结果进行相关性分析，相关系数为0.9950，两试剂盒总体检测结果

13、很接近。 （见图1）图1:对比试剂测定值相关性分析3.性能分析（1）空白吸光度以蒸馏水为检测标本时，吸光度值为1.559和1.573，均不小于0.800A，符合要求。（2）试剂空白吸光度变化率以蒸馏水为检测样本时，每分钟吸光度变化值(A/min)的绝对值0.001，不大于0.100A。（3）准确性 四川迈克试剂盒测定朗道质控血清，测定值均在给定的参考值范围内。（结果见表2）表2：准确性测定结果 单位：umol/LQC（迈克）LEVEL1（0110021）LEVEL2（0210053）靶值7.822.4参考范围6.7-8.919.0-25.8测定值7.97.68.023.322.723.5（4）

14、灵敏度样本浓度为10umol/L时，测定反应前后吸光度差值测定值，计算平均值（结果见表3），灵敏度结果大于A 0.002Abs/min，符合要求。表3：灵敏度测定结果10umol/L分析灵敏度A (Abs)10umol/L的A均值(Abs)0.0320.0300.031（5）线性范围在0-50umol/L范围内，依次配制浓度为0， 12.5，25.0，37.5，50umol/L浓度标本进行线性测定，测定的线性相关系数为0.9997> 0.990。（结果见表4。）表4：线性范围测定结果单位： umol/L rab理论浓度50.037.525.012.50-测定浓度49.336.324.61

15、1.60.2-51.236.124.112.90.1-50.437.525.313.30.4-平均值50.336.624.712.60.2 0.9997 0.9936 +0.04（6）精密性（批内精密性）测定高、低值标本，变异系数CV均小于8.0%。（结果见表5）表5：批内精密度测定结果标本1浓度（umol/L）标本2浓度(umol/L)18.925.328.623.638.525.948.723.058.325.668.324.778.425.588.823.298.024.8109.025.98.624.8SD0.31.1CV%3.494.44测定高、低值标本，变异系数CV均小于8.0%。

16、4.参考值验证本试剂盒所测70例正常人标本，测定值均小于15umol/L，符合设定的参考值范围。九、讨论和结论通过上述实验，对本公司试剂盒的各项性能指标进行了评估，对设定的参考值范围进行了验证，结果均达到要求。本实验中，北京九强生物技术有限公司生产的试剂盒和北京 生物工程技术有限公司研制的试剂盒同时对70例正常人标本进行了测定，结果均在正常参考值范围内，对30例患者标本测定，结果均超出正常参考值范围，临床符合性好。二者测定结果相关性良好，结果无显著性差异。因此，我们得出结论，北京 生物工程技术有限公司研制的同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）与对比试剂盒有很好的符合率，在测定的准确性和临床适用性方面

17、均能达到要求，能够满足临床使用要求。十、有关临床研究中特别情况的说明临床研究进行正常，无异常情况发生。附件一：主要参考文献1. 杨纪龙，杜秀丽等译.统计学.科学出版社.20022.国家食品药品监督管理局体外诊断试剂临床研究技术指导原则2007,4.28附件二：临床研究中所采用的所有诊断试剂产品的使用说明书（附后）附件三：临床研究中的所有试验数据（附后）。附件四：临床试验主要研究人员的简历（附后）表1对照组检测结果样本编号检测结果（umol/L）样本编号检测结果（umol/L）九强生物 九强生物 18.48.0366.67.226.06.93712.912.139.78.9387.27.9413

18、.714.4398.98.259.89.6406.65.7612.512.64113.314.277.17.7424.33.587.58.14313.212.297.47.2445.44.8107.88.1455.65.4116.65.84610.29.8126.46.6479.310.11313.512.8486.16.3145.45.04912.412.2159.610.4504.75.2165.86.55112.712.8174.74.25210.710.01810.210.2539.19.1196.35.5549.310.3204.25.25512.611.8217.47.05613.613.6228.47.7579.99.82312.511.9584.43.52410.810.7595.95.8259.39.6605.35.5266.87.56112.111.6276.87.1627.68.0288.89.7639.38.3299.19.5646.57.3308.07.26511.711.73111.511.8665.85.5328.18.0676.55.83311.911.9687.67.6344.84.4695.25.3358.27.6709.89.8表2 病理组检测结果样本编号检测结果（umol/L）样本编号检测结果（umol/L）九强