《棉花皱叶病毒检疫鉴定方法》编制说明1．目的和意义棉花皱叶病毒

1、棉花皱叶病毒检疫鉴定方法编制说明1. 目的和意义棉花皴叶病毒(cotton leaf crumple virus, clcrv )属于双生病毒科(geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(begomovirus),是棉花上的重要病毒z 一，对棉花的生产有着严重威胁。该病毒于1954年首次在美国加利福尼亚洲的 陆地棉上发现，目前分布于美国、中东、印度和墨西哥等地，可自然侵染陆地棉、 gossypium spp.、abutilon spp.、althaea spp.、hibiscus spp.、malva spp.、glycine spp.> phaseolus spp.、vicia

2、spp.等多种重要经济作物，导致受侵染作物持续花 叶和畸形。自然界中靠介体昆虫以半持久方式传播，因此传播的机会很大。在我 国，其寄主分布广泛，一旦传入，定殖扩散可能性很大。并且其寄主多为具有重 要经济价值的作物，因此加强相关的基础研究和应用研究，建立检测标准，加强 检疫检测非常必要。2007年5月29 h中华人民共和国农业部第862号公告将该 病毒列入中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录，依法对其实施检疫, 因此开展本项目的研究，制定该病毒的检疫鉴定方法非常必要。标准编写组在查阅资料和深入研究的基础上，建立了棉花皱叶病毒的检疫鉴 定方法，以成熟可靠规范化方法为依据起草标准，制定的标准适用于

3、可能携带棉 花皱叶病毒的植物材料的检测。2. 标准编制的主要工作过程2任务来源本标准是由国家标准委下达的2009年国家标准制订项目计划，计划编号： 2009b252*木标准由中国检验检疫科学研究院负责起草，浙江出入境检验检疫 局和广东出入境检验检疫局参与起草。2.2立项研究阶段该标准立项后，标准起草小组成员便开始进行调研工作，通过多种方式和渠 道收集有关棉花皱叶病毒检疫鉴定方法的相关资料，对棉花皱叶病毒的为害特 性、牛物学特征、传播规律、各种检疫鉴定的方法等最新研究进展等有了全面深 入的了解。通过研究建立了检测棉花皱叶病毒的实时荧光pcr方法，为该标准 的制定打下了的基础。2.3起草阶段起草组

4、认真阅读了标准制定的一系列文件，对标准制定的格式、内容、术语 表达方式等进行了深入的学习，较系统的学习了标准的编写，并根据 gb/t 1.1-2000标准化工作导则第一单元：标准的起草与表述规则第一部分：标准编写的要求进行标准起草。2.4征求意见阶段分别将标准的征求意见稿送发到相关科研单位、管理单位和口岸出入境检验 检疫局等16个单位征求意见，根据反馈的意见进行了相应的修改。2.5标准的主要起草人及承担的工作张永江中国检骑检疫科学研究院，组织标准的调研和起草张明哲浙江岀入境检验检疫局,参加标准的调研和起草李桂芬中国检验检疫科学研究院,参加标准的调研和起草冯黎霞广东出入境检验检疫局,参加标准的调

5、研和起草李明福中国检验检疫科学研究院,参加标准的调研和起草中国检骑检疫科学研究院，参加标准的调研和起草3. 标准主要内容的依据 3.1范围本标准规定了棉花皱叶病毒检疫鉴定的基本原则和方法。木标准适用于可能携带棉花皱叶病毒的植物材料的检测。3.2原理棉花皴叶病毒的病毒粒体结构、生物学特性、血清学特征、慕因组特征是制 订该检疫鉴定标准的依据。3.3仪器设备、实验用品及试剂根据棉花皱叶病毒检疫鉴定的需要而定。3.4棉花皱叶病毒检疫鉴定的方法根据棉花皱叶病毒的病毒粒体结构、生物特性、血清学和分子生物学特征， 建立了检测该病毒的普通pcr检测方法及实时荧光pcr方法。3.5检测结果评定如被检样品的所有特

6、性均与各鉴定指标相吻合，可确定样品中含有棉花皱叶病毒。36样品保存与复核含有棉花皱叶病毒的所有样品、照片和实验记录都应妥善保存，以备复核、谈判 和仲裁。4. 主要参考文献1) idris, a. m.，and brown, j. k. cotton leaf crumple virus is a distinct western hemisphere begomovirus species with complex evolutionary relationships indicative of recombination and reassortment. 2004. phytopathol

7、ogy 94:1068-1074.:2) brown, j. k.，and idris, a. m. cotton leaf crumple virus is the first member of a previously undiscovered phylogenetic group of western hemishpere begomoviruses. 2002. (abstr.) phytopathology 92 (suppl): s38.3) brown, j. k., mihail j d.，and nelson, m. r. the effects of cotton lea

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10、ton leaf crumple virus on subsequent growth and yield. j. econ. entomol. 79: 208-211.8) naddeem, a., weng, z., nelson, m. r., and xiong, z.5 cotton leaf crumple virus and cotton leaf curl virus are distantly related gemini-virus. mol. plant. online publication no. 1997/0612nadeem.9) wilson, e d., and brown, j. k., inheritance of resistance to cotton leaf crumple virus in cotton. j. hered. 1991, hered. 82:508-509.5. 技术经济论证本标准规范了棉花皱叶病毒的检疫鉴定方法，易于操作，实用、准确，有利 于对进境材料屮的该病毒进行检疫鉴定，对防止该病毒传入我国，