S005红细胞ABO血型(正定型)鉴定标准化操作规程

1、s005红细胞abo血型（正定型）鉴定标准化操作规程标准化操作规程作业指导书sopreg005.01赣州市人民医院输血科sopreg005.01标准化操作规程作业指导书sopreg005.01赣州市人民医院输血科红细胞abo血型（正定型）鉴定标准化操作规程一、冃的为保证血液及血液成分的红细胞abo血型在临床上同型输注，确保临 床输血安全、有效，根据临床输血技术规范第十五条特制定本标准化 操作规程。二、方法采用试管法检测红细胞abo血型（正定型）。三、原理用已知抗a、抗b标准血清（单克隆抗体）测定被检者红细胞上有无 相应的a或b抗原，结合反定型结果判断abo血型。四、适用范围适用于输血前患者与献

2、血者红细胞abo血型（正定型）确认。五、仪器设备 普通离心机；血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称：抗a、抗bh【l型定型试剂（单克隆抗体）；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限责任公司；3、批准文号：国药准字s10980059；4、包装规格：抗a、抗b试剂各1支，10ml/支；5、贮藏条件；2-8°c避光保存。6、有效期：自检定合格之日起2年；7、试剂性能：试剂单克隆抗体效价：抗a效价2128；抗b效价212&sopreg005.01标准化操作规程作业指导书sopreg005.01赣州市人民医院输血科特异性试验合格。七、检测样本要求1、标本类型：静脉血（edta抗凝剂:血

3、液二1:10）。2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。3、标本储存和运输：新鲜血28°c贮存时间不超过72小时。4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等 不能测定。八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管2支，分别标明抗a、抗b,用滴管分 别加入受检者5%红细胞悬液1滴于试管，再分别在对应管中加入抗a、抗b标准血清1滴。2、摇动试管，立即以looorpm离心lmin或3400rpm离心15s或室温 静銘1小时。3、先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将 试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集 强度（见下表）

4、。如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜 检查。4、abo血型（正定型）表现型反应格局表受检者血型abo ab受检者红细胞+试剂标准血清 抗a + -+抗b+sopreg005.01标准化操作规程作业指导书sopreg005.01赣州市人民医院输血科5、红细胞abo血型（正定型）结果凝集强度判断对照表红细胞凝集反应描述凝集强度镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分混合凝集外 观布溶血，上清液中有游离血红蛋白溶血红细胞凝集成一大块，血清清晰透明红细胞凝集成数小块，血清尚清晰红细胞凝块分散成许多小块，周围可见到游离红细胞肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞4+ 3+ 2+ 1

5、+镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞土 镜下未见凝集，红细胞均匀分布阴性九、质量控制1、对新进批号的试剂应作抗体效价验定。2、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评，且成绩 合格；3、每次做血型鉴定前应采用红细胞质控品做室内质量控制，且要求 在控。4、严格执行查对制度，判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误等 引起的差错，如有疑问应镜下观察红细胞形态或用其他介质重新检测。5、检测标本应在28°c保存留一周，以备复查。十、生物参考区间abo血型：a型，b型，0型，ab型；十一、干扰因素1、冷凝集素：在恶性肿瘤或病原体感染后有时冷反 应性自身抗体可异常增高造成溶血

6、。sopreg005.01标准化操作规程作业指导书sopreg005.01赣州市人民医院输血科2、自身抗体：红细胞被自身抗体强烈致敏后将干扰abo定型，且自 身抗体的存在会导致交叉配血不合。3、弱凝集：当患者红细胞上抗原异常可能会导致减弱的或缺少的凝集反应，如亚型红细胞抗原性较弱、新牛儿、老年人及少数恶病质患者红 细胞抗原形成不足或敏感性降低o4、细菌性凝集：常见有类b凝集，a型或0型病人因大肠杆菌086 感染，从而使红细胞上获得类b抗原，能与抗b抗体发生凝集，表现为b或 ab型。其不受温度影响，病情好转类b凝集即消失。另外红细胞被细菌或 细菌酶污染，红细胞上的t抗原被激活，与供血者中抗t抗体

7、发生凝集。5、混合外观凝集现象：主耍见于患者有近期输血史、骨髓移植、胎 盘岀血、白血病或其他原因如嵌合现象、a3亚型及tn多凝集反应。6、不规则抗体：可通过测定唾液中的血型物质来鉴定ab0血型。7、亚型：亚型红细胞抗原性较弱易产生弱凝集；8、假凝集：常见于某些肝病、传染病、多发性骨髓瘤、霍金氏病、 心肌梗塞、感染等病；9、血浆样本血型鉴定时应注意排除纤维蛋白原和补体的干扰；十二、 注意事项1、检测标本必须正确有标识，其血液量、红细胞或血浆的质量符合 实验要求和受血者当前的免疫学状态；2、输血前检查要求是输血前3天内的血样（预防受血者在输血前的3 个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则

8、抗体）。sopreg005.01标准化操作规程作业指导书sopreg005.01赣州市人民医院输血科3、标本血液离体后耍求尽快送检，至检测完毕最长不能超过3d,每 次检测后受血者和供血者的血标本应在2°c8°c保存7天；4、每批次试剂均应进行效价测定，试剂使用前应仔细检查试剂的贮 存条件是否符合要求、是否变质失效；5、注意离心力、温度、红细胞浓度及抗原抗体的比例对试验结果的 影响；6、患者使用的药物影响的处理：如果使用右旋糖酹、pvp等治疗，应 注意将红细胞洗涤；如果受者使用肝素治疗，则应用硫酸鱼精蛋白对抗, 使样本凝结；7、疑存在冷凝集素的病人标本的血型鉴定时应用37&#

9、176;c生理盐水洗涤 3次再测定，并放37°c免疫微柱孵育器10分钟后观察结果。8、疑存在自身抗体的病人标本的止定型血型鉴定时应用37°c45°c 生理盐水洗涤红细胞三次或者用放散后的红细胞（放散方法需不破坏红细 胞结构）；9、疑为亚型应通过亚型定型试剂来具体定型。鉴定血型时要注意正 反定型的结合，加用抗h和抗a、b型标准血清、a2红细胞等检查唾液中 的血型物质，必要吋作吸收放散试验以确定。若血清中存在不规则抗体可 在反定型用0细胞加以鉴定，有些亚型因为抗原的某些位点缺失，也会产 生相对于缺失抗原位点的抗体，这些抗体的产生有助于亚型的判定。10、疑为红细胞被细菌或细菌酶污染产生的假凝集可路37°c免疫微柱 孵育器10分钟后观察结果，此种凝集在4°c和37°c之间随着温度sopreg005.01标准化操作规程作业指导书sopreg005.01赣州市人民医院输血科的升高凝集程度逐渐减弱，在37°c时最弱或消失。11出现混合外观凝集的情况时一般要核对标本，必要时可重新抽取 血样；12、红细胞出现弱凝集、假凝集应进行红细胞形态显微镜镜检， 假凝集用生理盐水稀释或洗涤红细胞可使凝集消失。13、注意血浆因抗凝不完全