流产停胎原因之一抗核抗体课件

1、抗核抗体 自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体 ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA存在一个谱 ANA新概念：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称 某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富ANA检测的意义 有助于疾病的诊断，如抗Sm是SLE标记抗体；抗ScL-70 是SD的标记抗体，抗Jo-1是PM/DM的标记抗体 观察疾病活动度和治疗反应 研究发病机理ANA由来中性粒细胞DNP(DNA-Histone)+抗DNP+补体均质体LE细胞LE细胞：并非SLE特有，PM、SD、RA、SS等结缔组织病，药物过敏，

2、慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测+荧光显微镜下ANA的染色型别 均质型：与抗组蛋白和抗DNA有关 斑点型：与抗ENA有关 周边型：与抗dsDNA有关 核仁型：4-6sRNA 着丝点型：在SD及CREST中出现ANA的筛选：间接免疫荧光法+抗原抗体（血清）抗原抗体第二抗体ANA的筛选：间接免疫荧光法ANA分类 抗DNA（dsDNA,ssDNA) 抗组蛋白（Histone) 抗非组蛋白（Non-histone,Extractable Nuclear Antigen,ENA） 抗核仁（Nucleolus）抗双链DNA抗体（短膜虫免疫荧光法） 病例数 阳性率（%） 正常人 110 0 系统

3、性红斑狼疮64 活动期 31 93.6 缓解期 33 3.0 类风湿关节炎60 1.8 硬皮病 13 0 多发性肌炎 8 0 干燥综合症 15 0 白塞病 5 0 非结缔组织病 222 1.7抗双链DNA抗体（短膜虫免疫荧光法 1:5）病例数阳性率（%）正常人1100系统性红斑狼疮64活动期3193.6缓解期333.0类风湿关节炎601.8硬皮病130多发性肌炎80干燥综合症150白塞病50非结缔组织病2221.7抗组蛋白抗体（酶联免疫吸附法X2SD) 系统性红斑狼疮 50% 其他结缔组织病23-30% 服异烟肼12月以上53% 服苯妥因钠6月以上18% 服他巴唑6个月0 活动期SLE 90.

4、2%阳性 抗H1 H2A H2B H2A-H2B H3 H4系统性红斑狼疮 + + + + + +长期服异烟肼 + + + + + +类风湿关节炎 + + + + + +SLE以IgG型抗组蛋白抗体为主，而长期服烟肼及RA病人以IgM型为主抗组蛋白抗体（免疫印迹法）几种ENA的由来及同义词 Sm：病人名：Smith RNP: u1 RNP或nRNP Nuclear Ribonucleoprotein SSA: RO Sjogrens syndrome A SSB: La, Ha, Sjogrens syndrome B Jo-1: 病人John ScL-70: Scleroderma常见结缔组

5、织病的抗核抗体的阳性率 ANA dsDNA Histone Sm n RNP SSA SSB ScL-70 Jo-1 着丝点 核仁SLE 90 （62） 50 （25）40 39 10 0 0 0 6SS 50 15 30 0 14 （75）（59） 0 0 0 9SD 75 5 27 0 12 19 5 30 0 （20）（39）PM/DM50 13 0 5 0 0 0 (20) 0 10RA 23 10 23 0 0 20 5 0 0 0 15+有指端硬化ANA 1:40（+），抗dsDNA30%(或1：5）（+）抗核仁抗体（底物HEP-2细胞，免疫光法） 病例数 阳性率 正常人1000

6、系统性红斑狼疮906 类风湿关节炎2515 硬皮病7539 多发性肌炎5010 干燥综合症609 非结缔组织病1000 几种核抗原分子特性几种核抗原分子特性NativeDNA(dsDNA)HistoneH1,H2A,H2B,H3,H4Smu1 u2 u4 u5 u6 Sn RNA 复合物三种主要核复合物三种主要核蛋白带蛋白带:B(29), B(28); 三 种 主 要 核 蛋 白三 种 主 要 核 蛋 白带带:B(29),B(28); D(16);E(13)Kd;与信使与信使RNA 前体拼接有关前体拼接有关.RNP(u1RNP)u1SnRNA 复合物复合物 二种主要核蛋白带：二种主要核蛋白带：

7、70kd 22kd(c)及及 33kd(A).SSA/ROY1-Y5RNA 复合物，复合物， 60kd 和和 52kd 核蛋白。核蛋白。SSB/La,Ha多聚酶转录中的磷酸蛋白质多聚酶转录中的磷酸蛋白质（主要为（主要为48kd）.几种核抗原分子特性几种核抗原分子特性Ku70kd 和和 80kd 与与 DNA 结结合合的的蛋蛋白白质质rRNP与与胞胞浆浆中中核核糖糖体体有有关关，15kd,16kd,38kd 磷磷酸酸蛋蛋白白PCNADNA 多多聚聚酶酶， （36kd）ScL-70DNA 拓拓扑扑异异构构酶酶，100kd 天天然然蛋蛋白白，70kd变变性性蛋蛋白白Jo-150kd/60kd 组组氨

8、氨酸酸-tRNA 合合成成酶酶PM-ScL(PM-1)11 种种蛋蛋白白质质复复合合物物，分分子子量量在在 110kd-20kdCentromere17kd,80kd,140kd 三三种种染染色色体体蛋蛋白白，亦亦称称着着丝丝点点蛋蛋白白小 结 ANA是诊断弥漫性结缔组织病的重要依是诊断弥漫性结缔组织病的重要依据。各种抗原在其分子量、结构、功能据。各种抗原在其分子量、结构、功能上有所不同。抗原同上有所不同。抗原同DNA的转录、拼接、的转录、拼接、复制、翻译等作用有关。研究复制、翻译等作用有关。研究ANA有利有利于对结缔组织病发病机理的了解于对结缔组织病发病机理的了解 ANA滴度不一定与疾病活动

9、性相平行，滴度不一定与疾病活动性相平行，正常人、尤其老年人可有低滴度正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。感染性疾病、肿瘤也可阳性感染性疾病、肿瘤也可阳性小 结 抗双链抗双链DNA对诊断对诊断SLE高度特异，并高度特异，并与疾病活动有关。与疾病活动有关。DNA-抗抗DNA免疫复免疫复合物在狼疮肾炎中起重要作用合物在狼疮肾炎中起重要作用 抗抗Sm:是是SLE标记抗体，帮助前瞻性和标记抗体，帮助前瞻性和回顾性诊断，常与回顾性诊断，常与nRNP抗体共存抗体共存小 结 抗抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高滴在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于度有利于MCTD的诊断。的诊断。nRNP抗原与抗原与rRNP

10、不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而白，主要在核内，而rRNP是主要在胞浆是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与抗体与SLE 有关，有关，尤其有精神神经症状的尤其有精神神经症状的SLE阳性率较高阳性率较高小 结 抗抗SSA和抗和抗SSB与与Sjogrens Syndrome相关，并可造成新生儿狼疮和先天性心相关，并可造成新生儿狼疮和先天性心脏传导阻滞脏传导阻滞 抗抗ScL-70: SD的标记抗体的标记抗体 抗抗Centromere与雷诺现象有关，但并非与雷诺现象有关，但并非 CREST(Calcinosis, Raynauds ph

11、enomena, Esophageal Dysmotility, Telangiectasia)的标记抗体，在干燥的标记抗体，在干燥综合征，某些慢性肝病中亦可阳性综合征，某些慢性肝病中亦可阳性小 结抗抗Jo-1是是PM/DM的标记抗体，的标记抗体，抗抗Jo-1阳性的肌炎患者，伴关节阳性的肌炎患者，伴关节炎、炎、“技工手技工手”、雷诺症、肺间、雷诺症、肺间质变等称合成酶抗体综合征。质变等称合成酶抗体综合征。抗组蛋白抗体与多种结缔组织病抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有关，有助于药物性狼疮的诊断有关，有助于药物性狼疮的诊断抗核仁型抗体常与抗核仁型抗体常与SD有关有关抗磷脂抗体综合征抗磷脂抗体综合征 抗

12、磷脂抗体综合征抗磷脂抗体综合征(Anti-phosholipid syndrome,APS)：反复血管内栓塞，血小：反复血管内栓塞，血小板减少，习惯性流产或胎死宫内。临床板减少，习惯性流产或胎死宫内。临床上可有肺动脉高压，脑病，高凝状态等上可有肺动脉高压，脑病，高凝状态等抗磷脂（抗磷脂（Phospholipid）抗体）抗体 多见于多见于SLE（70%），），SS、白塞病、自、白塞病、自身免疫性血小板减少、真性红细胞增多、身免疫性血小板减少、真性红细胞增多、免疫性血管炎、习惯性流产、恶性肿瘤、免疫性血管炎、习惯性流产、恶性肿瘤、多发性硬化、传染性疾病、肾上腺出血多发性硬化、传染性疾病、肾上腺出血

13、和和Addison病均可阳性病均可阳性抗磷脂（抗磷脂（Phospholipid）抗体检测）抗体检测 包括：狼疮抗凝物；抗心脂抗体，梅毒血清试验假阳包括：狼疮抗凝物；抗心脂抗体，梅毒血清试验假阳性。性。 抗磷脂抗体还有抗磷脂氨酸（抗磷脂抗体还有抗磷脂氨酸（Anti-phosphotidyl serine）和抗磷脂酸（和抗磷脂酸（Anti-phosphtidil acid）抗体等）抗体等。 磷脂基因中具有抗原性：心磷脂、磷脂碱、酰丝氨酸、磷脂基因中具有抗原性：心磷脂、磷脂碱、酰丝氨酸、酰肌醇脂和酰乙醇脂等酰肌醇脂和酰乙醇脂等 2GP1（载脂蛋白）与磷脂结合，使其暴露中被识别（载脂蛋白）与磷脂结合，

14、使其暴露中被识别的表位，而呈现磷脂抗体特性。的表位，而呈现磷脂抗体特性。2GP1是必需的辅助是必需的辅助因子因子抗心脂（抗心脂（Cardiolipin）抗体）抗体 以牛心肌的乙醇浸出液提取酸性磷脂，以牛心肌的乙醇浸出液提取酸性磷脂，用放射免疫或用放射免疫或ELISA测定。测定。50%SLE（患者阳性）。其他自身免疫性疾病，（患者阳性）。其他自身免疫性疾病，如如RA、原发性血小板减少性紫癜及感染、原发性血小板减少性紫癜及感染（尤在病毒）和药物因素均可阳性（尤在病毒）和药物因素均可阳性（+）。）。 高滴度高滴度IgG抗心脂抗体的抗心脂抗体的SLE 40%发生发生动、静脉栓塞动、静脉栓塞狼疮抗凝物（

15、狼疮抗凝物（LAC） LAC实为抗前凝血酶活性复合物中的磷实为抗前凝血酶活性复合物中的磷脂抗体脂抗体 测定狼疮抗凝物有：测定狼疮抗凝物有：1、凝血时间延长，部分凝血活酶时间凝血时间延长，部分凝血活酶时间（APTTAPTT）凝血酶元时间（）凝血酶元时间（PTPT）和）和RusselRussel蛇毒时间均延长，且不能因加蛇毒时间均延长，且不能因加入正常血浆而纠正入正常血浆而纠正2 2、凝血因子缺乏凝血因子缺乏3、抗磷脂抑制物的性质抗磷脂抑制物的性质梅毒血清假阳性梅毒血清假阳性 因胎儿肝浸出液或牛心脂抗原不纯因胎儿肝浸出液或牛心脂抗原不纯,含有含有卵磷和胆固醇卵磷和胆固醇,从而造成假阳性从而造成假阳

16、性,如以梅毒如以梅毒螺旋体测定为阴性螺旋体测定为阴性抗磷脂抗体发生栓塞的机理抗磷脂抗体发生栓塞的机理 与血管内皮细胞的磷脂结合与血管内皮细胞的磷脂结合,使前列腺素使前列腺素合成减少合成减少,血管收缩血管收缩 与血小板膜磷脂作用与血小板膜磷脂作用,血小板聚集形成血血小板聚集形成血栓栓 直接损伤内皮细胞直接损伤内皮细胞,抑制纤溶酶原激活物抑制纤溶酶原激活物释放而促进血栓形成释放而促进血栓形成 中和中和2GP1的抗凝作用的抗凝作用抗磷脂抗体导致出血机理抗磷脂抗体导致出血机理 与血小板膜或红细胞膜丝氨酸磷脂结合与血小板膜或红细胞膜丝氨酸磷脂结合发生聚集，和发生聚集，和/或被网状内皮系统吞噬或或被网状内

17、皮系统吞噬或破坏，使之血小板和红细胞破坏，减少破坏，使之血小板和红细胞破坏，减少造成出血性紫癜，或溶血造成出血性紫癜，或溶血APS诊断诊断 APS主要临床表现：反复流产，静脉血栓，动脉主要临床表现：反复流产，静脉血栓，动脉闭塞，下肢溃疡，网状青斑，溶贫，血小板减少闭塞，下肢溃疡，网状青斑，溶贫，血小板减少 高水平抗磷脂抗体加一项表现，或低水平抗磷脂高水平抗磷脂抗体加一项表现，或低水平抗磷脂抗体加抗体加2项或项或2项以上表现则疑似项以上表现则疑似APS 继发性继发性APS：合并：合并SLE，SS，CTD，肿瘤，药物，肿瘤，药物，感染等感染等 诊断诊断APS应排除血流阻滞，血凝等其他因素，排应排除

18、血流阻滞，血凝等其他因素，排除肾病，糖尿病，高血脂，肿瘤及血管炎；流产除肾病，糖尿病，高血脂，肿瘤及血管炎；流产原因可为染色体异常，内分泌，药物，感染等因原因可为染色体异常，内分泌，药物，感染等因素素APS治疗治疗 急性期急性期:肝素肝素5000U Q6H。使。使APTT延长延长至正常值的至正常值的2-2.5倍。预防血栓形成：小倍。预防血栓形成：小剂量华法令或肝素，与小剂量阿斯匹林剂量华法令或肝素，与小剂量阿斯匹林合用合用 习惯性流产：阿斯匹林习惯性流产：阿斯匹林80mg/日和肝素日和肝素25005000uBid，维持至分娩后，维持至分娩后24-48小小时。必要时妊娠期加用时。必要时妊娠期加用

19、IVIG，每月一次，每月一次类风湿因子类风湿因子（Rheumatoid Factor） 抗人或动物的抗人或动物的IgG的的FC片段抗体。其本身片段抗体。其本身是免疫球蛋白，因此，是免疫球蛋白，因此，RF有有IgG、IgM、IgA型等。型等。RF无种族和种属特异性无种族和种属特异性 与与DNP及半抗原（二硝基苯）有交叉反应。及半抗原（二硝基苯）有交叉反应。7S IgM(IgG)-RF主要参与关节外症状的免主要参与关节外症状的免疫复合物形成，且与疾病活动性有关疫复合物形成，且与疾病活动性有关如何评价类风湿因子如何评价类风湿因子 是诊断是诊断RA的标准之一，不是唯一标准，并的标准之一，不是唯一标准，并非非RA特有特有 作为血清阴性脊柱关节病区分标准作为血清阴性脊柱关节病区分标准 正常人正常人2%阳性，老年人可达阳性，老年人可达5%阳性阳性 RF与其他蛋白、半抗原有交叉反应与其他蛋白、半抗原有交叉反应 多种结缔组织病（多种结缔组织病（SLE，SD，SS，PM/DM）感染疾病（感染疾病（SBE，TB，hepatitis）,肝硬化，肝硬化，弥漫性肺纤维化，结节病等均可阳性弥漫性肺纤维化，结节病等均可阳性 病后半年才产生