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文档简介
1、实验八实验八 血型鉴定及交叉配血血型鉴定及交叉配血实验实验一ABO血型鉴定 1 1实验原理实验原理红细胞膜上具有血型糖蛋白,作为抗原,也称为凝集原;红细胞膜上具有血型糖蛋白,作为抗原,也称为凝集原;ABOABO血型就是根据红细胞外表抗原来确定的,根据红细血型就是根据红细胞外表抗原来确定的,根据红细胞上有或无胞上有或无A A抗原或抗原或/ /和和B B抗原,将血型分为抗原,将血型分为A A型、型、B B型、型、ABAB型及型及O O型四种。型四种。血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。凝集原和相应的凝集素特异性结合,使红细胞凝集成团,凝集原和相应的凝集素特异
2、性结合,使红细胞凝集成团,进而引起红细胞破裂,产生溶血。进而引起红细胞破裂,产生溶血。ABOABO血型鉴定的原理是利用红细胞凝集实验,将待测血液血型鉴定的原理是利用红细胞凝集实验,将待测血液分别与知含分别与知含A A抗体和抗体和B B抗体的规范血清混合,察看能否抗体的规范血清混合,察看能否发生凝集景象,判别待测血液红细胞上有何种抗原,由发生凝集景象,判别待测血液红细胞上有何种抗原,由此确定待测血液的血型。此确定待测血液的血型。ABO血型分类ABO血型正反定型结果 一ABO血型鉴定2 2血型鉴定方法血型鉴定方法标志凹载玻片:左上角写标志凹载玻片:左上角写A A,右上角写,右上角写B B。分别汲取
3、规范分别汲取规范A A血清和规范血清和规范B B血清各血清各1 1滴滴于双凹载玻片左端和右端。滴滴于双凹载玻片左端和右端。采血针刺破左手无名指尖,待血液出来后,用采血针刺破左手无名指尖,待血液出来后,用2 2支毛细滴管汲取血液,支毛细滴管汲取血液,分别参与到玻片左、右两侧的血清内,并用牙签搅拌,使规范血分别参与到玻片左、右两侧的血清内,并用牙签搅拌,使规范血清与血液混匀。切勿混用毛细滴管和牙签!清与血液混匀。切勿混用毛细滴管和牙签!手持玻片转动数次,转动时玻片应坚持在一个程度面上,然后置室温手持玻片转动数次,转动时玻片应坚持在一个程度面上,然后置室温下下5min5min后察看结果。后察看结果。
4、肉眼察看:假设外观略呈花边状或锯齿状,看上去有沉淀,那么多为肉眼察看:假设外观略呈花边状或锯齿状,看上去有沉淀,那么多为凝集;假设血滴呈均匀形状,边缘整齐,那么多为不凝集。凝集;假设血滴呈均匀形状,边缘整齐,那么多为不凝集。进一步在低倍镜下察看:在低倍镜下,假设察看到红细胞凝集成团,进一步在低倍镜下察看:在低倍镜下,假设察看到红细胞凝集成团,或尚有少数游离细胞,那么为凝集景象;假设红细胞均为游离形或尚有少数游离细胞,那么为凝集景象;假设红细胞均为游离形状,那么为不凝集。根据镜下所见有无凝集景象断定血型。状,那么为不凝集。根据镜下所见有无凝集景象断定血型。取干净载玻片取干净载玻片滴加定型剂滴加定
5、型剂消毒消毒取血取血消毒消毒取血取血消毒消毒察看察看记录结果记录结果用针扎一下消毒部位,使血冒出,立刻滴一滴血液在抗A或B上。 再用7075的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位,然后再取一滴血液于抗B或A上。 察看有无凝集,并按下表断定结果。 血型抗A试剂抗B试剂ABOAB+-+-+-+呈现均匀的淡红色时,阐明不凝集,用呈现均匀的淡红色时,阐明不凝集,用“一号表示。一号表示。 在试剂里凝结成絮团状,构成鲜明的对比,阐明凝集,用在试剂里凝结成絮团状,构成鲜明的对比,阐明凝集,用“十号表示。十号表示。 交叉配血的要求交叉配血的要求 交叉配血的目的交叉配血的目的交叉配血实验方法交叉配血实验方法 盐水介质配血方法盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧 抗球蛋白配血方法抗球蛋白配血方法 抗球蛋白方法配血方法
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