《荧光叶室讲解》ppt课件

1、荧光叶室讲解荧光叶室讲解刘美玲刘美玲基因基因 农业环境科学部农业环境科学部北京力高泰科技北京力高泰科技2007年年12月月根本原理根本原理荧光发射的根本原理荧光发射的根本原理1、光能：使基态、光能：使基态Chl变成激发变成激发态态2、一些电子从基、一些电子从基态跃迁至激态跃迁至激发态发态S1,S23、电子从第一激、电子从第一激发态落回基发态落回基态态荧光为什么可以反映光合表现？荧光为什么可以反映光合表现？叶绿素荧光与光协作用叶绿素荧光与光协作用 叶绿素荧光主要反映了叶绿素荧光主要反映了PSII的生理的生理 生化变化。生化变化。 叶绿素荧光：光反响阶段的各种变化。叶绿素荧光：光反响阶段的各种变化

2、。 光反响：光合电子传送链，产生光反响：光合电子传送链，产生ATP能量能量和和NADPH复原力，同时放出复原力，同时放出O2。 暗反响：固定暗反响：固定CO2。光合电子传送链光合电子传送链Z链链远红光开放的反响中心和封锁的反响中心开放的反响中心和封锁的反响中心“封锁封锁 RC：当反响中心的电子受体质体醌：当反响中心的电子受体质体醌QA接受电子，全部处于复原形状时，不能再接受电接受电子，全部处于复原形状时，不能再接受电子，我们称之为封锁的子，我们称之为封锁的RC。“开放开放 RC：假设：假设QA的电子传出，的电子传出，RC的电子可以的电子可以完全传送给完全传送给QA，那么此时，那么此时RC称为开

3、放的称为开放的RC。 荧光参数荧光参数LI 6400光合荧光仪测定的参数直接光合荧光仪测定的参数直接测定荧光参数一测定荧光参数一F0：最小初始荧光，又称基底荧光或暗荧光。指经：最小初始荧光，又称基底荧光或暗荧光。指经过充分暗顺应的光合机构光系统过充分暗顺应的光合机构光系统IIPSII反响中反响中心全部开放时的叶绿素心全部开放时的叶绿素Chl荧光发射强度。荧光发射强度。Fm：最大荧光。指经过充分暗顺应的光合机构：最大荧光。指经过充分暗顺应的光合机构PSII反响中心完全封锁时的反响中心完全封锁时的Chl荧光发射强度。荧光发射强度。LI 6400光合荧光仪测定的参数直接光合荧光仪测定的参数直接测定荧

4、光参数二测定荧光参数二F0：光下最小荧光。在光顺应形状下：光下最小荧光。在光顺应形状下PSII反响中心反响中心完全开放时的完全开放时的Chl荧光发射强度。为了使照光后一荧光发射强度。为了使照光后一切的切的PSII反响中心迅速到达最大开放程度，在测反响中心迅速到达最大开放程度，在测定前先用远红光进展照射。定前先用远红光进展照射。Fm：光下最大荧光。在光顺应形状下：光下最大荧光。在光顺应形状下PSII反响中反响中心完全封锁时的荧光发射强度。心完全封锁时的荧光发射强度。Fs：稳态荧光。又称：稳态荧光。又称Ft。 LI 6400光合荧光仪测定的参数间接光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数一计算荧光参数

5、一Fv/Fm：光化学量子效率，指没有蒙受任何环境胁迫：光化学量子效率，指没有蒙受任何环境胁迫并经过充分暗顺应叶片，其并经过充分暗顺应叶片，其PSII最大的潜在最大的潜在光化学量子效率。普通植物恒定在光化学量子效率。普通植物恒定在0.75 0.85。 也被称为开放的也被称为开放的PSII反响中心的能量捕获效率。反响中心的能量捕获效率。Fv / Fm = Fm F0/FmFv/Fm：光下开放的：光下开放的PSII反响中心的激发能捕获效反响中心的激发能捕获效率。率。Fv/Fm =Fm - F0/FmFv/FmLI 6400光合荧光仪测定的参数间接光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数二计算荧光参数二P

6、SII：作用光存在时：作用光存在时PSII实践的光化学量子效实践的光化学量子效率，即率，即PSII反响中心电荷分别实践量子效率，反响中心电荷分别实践量子效率，反映了被用于光化学途径激发能占进入反映了被用于光化学途径激发能占进入PSII总总激发能的比例，植物光合才干的一个重要目的。激发能的比例，植物光合才干的一个重要目的。 PSII =Fm - Fs/FmETR：电子传送速率。：电子传送速率。ETR = PPFD PSII 0.85 0.5LI 6400光合荧光仪测定的参数间接光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数三计算荧光参数三qP：光化学淬灭系数。反映了：光化学淬灭系数。反映了PSII反响中心

7、中开放反响中心中开放 程程 度，度，1 qP那么反映了反响中心封锁程度，反映了那么反映了反响中心封锁程度，反映了QA的复的复原程度。原程度。 qP =Fm - Fs/Fm - F0NPQ：非光化学淬灭系数。反映了植物热耗散的才干的变：非光化学淬灭系数。反映了植物热耗散的才干的变化化,数值范围在数值范围在 0 n (1,2,3,4,5 )。 NPQ =Fm Fm/Fm = Fm/Fm - 1 qN：非光化学淬灭系数。与：非光化学淬灭系数。与NPQ一样，如今运用较少。一样，如今运用较少。数值范围为数值范围为0 1。 qN = (Fm Fm) / (Fm F0)荧光叶室的安装荧光叶室的安装运用镊子取

8、下内置光量子传感器衔接线。运用镊子取下内置光量子传感器衔接线。排气管和热偶电极。排气管和热偶电极。卸下四个螺丝，六个卸下四个螺丝，六个O形密封圈。形密封圈。改换上下盖。改换上下盖。衔接荧光叶室与分析器之间的电源衔接线。衔接荧光叶室与分析器之间的电源衔接线。衔接辅助连线。衔接辅助连线。白色密封圈的改换。白色密封圈的改换。暗顺应夹子的运用方法。暗顺应夹子的运用方法。配置软件的安装。配置软件的安装。软件引见软件引见标志标志含含 义义g行行Prss_KPa ParIn_m %Blue ParOutm%Blue蓝色光化学光在内部蓝色光化学光在内部ParIn_m中所占的百分比中所占的百分比m行行F dF/

9、dt FlrCV_% FlrEvent F荧光强度荧光强度dF/dt荧光强度变化率荧光强度变化率FlrCV_%荧光强度变异系数荧光强度变异系数FlrEvent荧光事件荧光事件n行行F0 Fm Fv/FmF0充分暗顺应条件下的最小荧光充分暗顺应条件下的最小荧光Fm充分暗顺应条件下的最大荧光充分暗顺应条件下的最大荧光Fv/Fm充分暗顺应条件下光化学量子效率充分暗顺应条件下光化学量子效率o行行Fo Fm Fv/Fm FsFo光照下的最小荧光光照下的最小荧光Fm光照下的最大荧光光照下的最大荧光Fv/Fm开放的开放的PSIIPSII反响中心的激发能捕获效率反响中心的激发能捕获效率Fs稳态荧光稳态荧光p行

10、行PhiPS2 ETR qP qNPhiPS2PSII作用光存在时作用光存在时PSIIPSII实践的光化学量子效率实践的光化学量子效率ETR电子传送速率电子传送速率qP光化学猝灭系数光化学猝灭系数qN非光化学猝灭系数非光化学猝灭系数新新增增参参数数行行介介绍绍功能行功能行F1F2F3F4F58Flr QuikPik选择荧光设选择荧光设置文件置文件Flr Editor编辑荧光设编辑荧光设置置Define Actinic定义作用光定义作用光Flr Adjust设置荧光设置荧光Rcrding ON/OFF记录荧光记录荧光9Meas is ON/OFF丈量光开丈量光开/关关Flash饱和闪光饱和闪光D

11、ark Pulse暗脉冲暗脉冲Actinic光化学光光化学光开开/关关Far Red Is ON/OFF远红光开远红光开/关关0Do Fo丈量最小荧丈量最小荧光光Do Fm丈量最大荧丈量最大荧光光Do Fo Fm丈量最小荧丈量最小荧光和最大荧光和最大荧光光View Fsh/Drk查看强闪光查看强闪光或暗脉冲或暗脉冲0Do Fo测定测定FoDo Fs测定测定FsDo Fs Fm测定测定Fs和和FmDoFs FmFo测定测定Fs，Fm和和FoView Fsh/Drk查看强闪光查看强闪光或暗脉冲或暗脉冲新增功能行引见新增功能行引见根本实验根本实验1、丈量、丈量F0 & Fm。2、丈量、丈量F

12、0 、Fm & Fs 。3、丈量、丈量PSII、qP & qN& NPQ。4、荧光和气体交换参数同时丈量。、荧光和气体交换参数同时丈量。荧光丈量的根本步骤荧光丈量的根本步骤实实验验1实实验验2实验实验3实验实验1： 植物暗顺应形状的植物暗顺应形状的F0、Fm 、 Fv/Fm翻开一个文件翻开一个文件1 1，f1f1，输入文件名，添加备注。，输入文件名，添加备注。设置丈量光、饱和闪光设置丈量光、饱和闪光8 8，f2f2，保管设置。，保管设置。夹好叶片。夹好叶片。等待等待dF/dt dF/dt 绝对值绝对值 5 5或或FlrCV% 1FlrCV% 1。记录数据按记录数据按0

13、0，f1/f2/f3/f4f1/f2/f3/f4。查看数据查看数据1 1，f2f2。封锁文件封锁文件1 1，f3f3。传输文件同光合操作。传输文件同光合操作。实验实验2： 植物光顺应形状的植物光顺应形状的F0、Fm 、Fs、 Fv/Fm翻开一个文件翻开一个文件1 1，f1f1，输入文件名，添加备注。，输入文件名，添加备注。设置丈量光、饱和闪光和远红光设置丈量光、饱和闪光和远红光8 8，f2f2，保管设置。，保管设置。设置活化光强度设置活化光强度8 8，f3f3。翻开活化光翻开活化光9 9，f4f4夹好叶片。夹好叶片。等待等待dF/dt dF/dt 绝对值绝对值 5 5或或FlrCV% 1Flr

14、CV% 1。记录数据按记录数据按0 0，f1/f2/f3/f4f1/f2/f3/f4。查看数据查看数据1 1，f2f2。封锁文件封锁文件1 1，f3f3。传输文件同光合操作。传输文件同光合操作。实验实验3： 猝灭研讨，丈量猝灭研讨，丈量PSII、qP & qN& NPQ1、翻开一个文件、翻开一个文件1，f1，输入文件名，添加备注。，输入文件名，添加备注。2、设置丈量光、饱和闪光和远红光、设置丈量光、饱和闪光和远红光8，f2，保管设置。，保管设置。3、设置活化光强度、设置活化光强度8，f3。4、夹好暗顺应好的叶片。、夹好暗顺应好的叶片。5、等待、等待dF/dt 绝对值绝对值 5或

15、或FlrCV% 1。记录数据按。记录数据按0，f1/f2/f3/f4。6、翻开活化光、翻开活化光9，f4，等待植物顺应光环境。，等待植物顺应光环境。7、等待、等待dF/dt 绝对值绝对值 5或或FlrCV% 1。记录数据按。记录数据按0，f1/f2/f3/f4。8、查看数据、查看数据1，f2，封锁文件，封锁文件1，f3。9、传输文件同光合操作。、传输文件同光合操作。丈量光的设置丈量光的设置8，f2Intensity：1/0.8; Modulation:0.25; Filter: 1;Gain:10.饱和闪光的设置饱和闪光的设置8，f2Duration:0.8; Intensity: 7/8;

16、Blu: Nochange; Modulation: 20; Filter: 50. 远红光的设置远红光的设置8，f2丈量光、光化光和远红光的设置丈量光、光化光和远红光的设置Flr Editor 与与Flr Adjust的区别的区别 按按8,f2，进入，进入Flr Editor编辑荧光设置编辑荧光设置按按8,f4，进入，进入Flr Adjust设置荧光设置荧光区别和联络：区别和联络：第一种，修正完后，执行；第二种，边修正边执行。第一种，修正完后，执行；第二种，边修正边执行。第一种设置可以设定小数点后的数值，第二种只能第一种设置可以设定小数点后的数值，第二种只能设置设置1的倍数。的倍数。都可以设置上述三种光。都可以设置上述三种光。留意：留意： l可以先将暗顺应和光顺应的丈量程序设置好可以先将暗顺应和光顺应的丈量程序设置好8，f2，分别用独立的名字保管；然后根据测定对