《离子交换色谱》ppt课件

1、离子交换剂亦称离子交换介质，通常是一种不溶性高分子化合物如树脂，纤维素，葡聚糖，醇脂糖等； 含可交换离子 洗脱的能够性取决于交换反响平衡常数 吸附的蛋白质可以经过改动pH值，使蛋白 质分子电性发生改动，而洗脱下来。 不同蛋白质构成离子键数目有差别的，及亲和力不同。n离子交换剂的分类n阳离子交换剂：强酸型和弱酸型n 可电离的基团 磺酸基-SO3Hn 磷酸基-PO3H2n 羧酸基-COOHn 酚羟基-OHn阴离子交换剂：强碱型和弱碱型n 可电离的基团 伯胺基-NH2n 仲胺基-NHCH3 n 叔胺基-N(CH3)2n 季胺基-N+(CH3) 3 n强离子交换剂的电离率根本不受pH值影响，离子交换作

2、用的pH范围宽n弱离子交换剂的电离率受pH影响很大，离子交换作用的pH范围小n弱酸性阳离子交换剂在pH值降低时，其电离率逐渐降低，离子交换才干逐渐减弱n弱碱性阴离子交换剂在pH值升高时，其电离率逐渐降低，离子交换才干逐渐减弱常用的离子交换剂n离子交换树脂：离子交换树脂：n离子交换纤维素：离子交换纤维素：n离子交换纤维素是携带功能基团纤维素衍生物，离子交换纤维素是携带功能基团纤维素衍生物，具有松散的亲水性网状构造以及较大的外表积，具有松散的亲水性网状构造以及较大的外表积，大分子可以自在经过，因此对生物大分子如蛋大分子可以自在经过，因此对生物大分子如蛋白质的交换容量比离子交换树脂大。白质的交换容量

3、比离子交换树脂大。n阳离子型离子交换纤维素包括羟甲基纤维素阳离子型离子交换纤维素包括羟甲基纤维素CM纤维素等纤维素等n阴离子型离子交换纤维素包括二乙基氨基乙基纤阴离子型离子交换纤维素包括二乙基氨基乙基纤维素维素DEAE纤维素纤维素离子交换纤维素 离子交换纤维素 离子交换纤维素离子交换纤维素 在pH7时可耐120的高热 2105的蛋白质 适用于 对pH及温度的变化均较稳定，可在pH310和070范围内运用，改动离子强度或pH时，床体积变化不大。 被分别物质所带的电荷性质 离子交换剂的分类离子交换剂的分类强离子交换剂的电离率根本不受pH值影响，离子交换作用的pH范围宽弱离子交换剂的电离率受弱离子交

4、换剂的电离率受pHpH影响很大，离子交换作用的影响很大，离子交换作用的pHpH范围范围小小弱酸性阳离子交换剂在弱酸性阳离子交换剂在pHpH值降低时，其电离率值降低时，其电离率逐渐降低，离子交换才干逐渐减弱逐渐降低，离子交换才干逐渐减弱弱碱性阴离子交换剂在弱碱性阴离子交换剂在pHpH值升高时，其电离率逐渐降低值升高时，其电离率逐渐降低，离子交换才干逐渐减弱，离子交换才干逐渐减弱酸碱处置的次序决议了离子交换剂携带反离子的类型。酸碱处置的次序决议了离子交换剂携带反离子的类型。 补充层析柱平衡补充补充补充样品洗脱CC2C2C11VA2/A1A1 C1 V为流出体积对总体积之比 A2 C2 当当A1A2时为线性梯度，当时为线性梯度，当A1A2时为凹形梯度，时为凹形梯度，A1A2时为凸形梯度。时为凸形梯度。 n假设有脂溶性物质那么可用非离子型去污剂洗柱后再生，也可用乙醇洗涤，其顺序为：0.5mol/L NaOH-水-乙醇-水-20NaOH-水。n保管离子