银黄口服液生产工艺研究

1、银黄口服液小试试验方案一、实验目的：综合考虑影响银黄口服液的稳定因素和含量、ph值的要求，以及生产成本等因素寻找最佳的生产工艺。二、实验方案：采用传统正交设计法优先成品的绿原酸的含量、ph值的最佳条件，考虑影响因素有金银花提取工艺、绿原酸投料量、配制液ph值、柠檬酸钠用量、灭菌方法，根据各因素的取值范围和及实验要求设计成4水平5因素水平表，具体见表：因素水平表（表1）因素水平金银花提取工艺绿原酸投料量(g/l)配制液ph值柠檬酸钠用量(g/l)灭菌方法1饮片水提2.45.50不灭菌2饮片80温浸3.45.82.94辐照灭菌3饮片60温浸4.86.014.7100，30min4提取物6.87.2

2、29.4100，20min三、实验方法：1、饮片水提：将金银花中药饮片采用热投的方法（即先将饮用水煮沸，再将中药饮片投入进去）,分两次微沸，第一次加10倍饮用水，微沸2小时；第二次加10倍饮用水，微沸1小时。（饮片投入量根据金银花中药饮片绿原酸含量按提取率为30%计算投料）2、饮片80温浸：将金银花中药饮片分两次温浸，第一次加10倍饮用水，加热至80时后温浸2小时，第二次加10倍饮用水，加热至80时后温浸1小时。（饮片投入量根据金银花中药饮片绿原酸含量按提取率为30%计算投料）3、饮片60温浸：将金银花中药饮片分两次温浸，第一次加10倍饮用水，加热至60时后温浸2小时，第二次加10倍饮用水，加

3、热至60时后温浸1小时。（饮片投入量根据金银花中药饮片绿原酸含量按提取率为30%计算投料）10倍饮用水10倍60饮用水4、提取物：直接使用金银花提取物进行配制，金银花提取物投入量按实际检测的绿原酸含量计算投料。药渣（弃掉）金银花饮片60温浸1小时温浸2小时5、生产工艺：中药材提取液提取液合并离心过滤低温浓缩金银花提取物（冷藏备用）纯化水热水溶解黄芩提取物离心过滤18%naoh调节ph值离心过滤2混合均匀（粗配液）中间品检测（ph值、密度）山梨酸钾、蔗糖溶解加入混合液中瓶子（用灌封退回的）柠檬酸钠溶解加入混合液中灭菌灌封银黄工艺处方：（100ml）物料名称金银花提液黄芩提取物蔗糖山梨酸钾柠檬酸钠

4、氢氧化钠数量适量2.8g10g0.13 g适量适量方案一（1-1-2-2-1）：金银花水提，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，不灭菌的样品方案二（1-1-2-2-3）：金银花水提，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品注：方案一和方案二各制得100ml，即取用51.6g的金银花中药饮片（3.1%）用水提方法提取，一起配制成200ml，最终分装成20支，10支100灭菌30min，10支不灭菌。方案三（2-1-2-2-1）：金银花80温浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，不灭菌的

5、样品方案四（2-1-2-2-3）：金银花80温浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品注：方案三和方案四各制得100ml，即取用51.6g的金银花中药饮片（3.1%）用80温浸提取方法提取，一起配制成200ml，最终分装成20支，10支100灭菌30min，10支不灭菌。方案五（3-1-2-2-1）：金银花60温浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，不灭菌的样品方案六（3-1-2-2-3）：金银花60温浸提取，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案七（3

6、-2-2-1-1）：金银花60温浸提取，投入3.4g/l，不添加柠檬酸钠，配制液调节至5.8，不灭菌的样品方案八（3-2-2-1-3）：金银花60温浸提取，投入3.4g/l，不添加柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案九（3-2-2-2-3）：金银花60温浸提取，投入3.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案十（3-1-2-2-3）：金银花60温浸提取，投入4.8g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案十一（3-4-2-2-3）：金银花60温浸提取，投入6.8g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，

7、配制液调节至5.8，灭菌30min的样品注：方案五至方案十一各制得100ml，即取用286g的金银花中药饮片（3.1%）用60温浸提取方法提取，提取液量用总体积，最后再按相应投料量分配，各方案配制成100ml，分别分装成10支。方案十二（4-1-1-1-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入2.4g/l，不添加柠檬酸钠，配制液调节至5.5，灭菌30min的样品方案十三（4-1-1-2-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.5，灭菌30min的样品方案十四（4-1-2-2-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶

8、解，投入2.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案十五（4-2-1-2-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，不添加柠檬酸钠，配制液调节至5.5，灭菌30min的样品方案十六（4-2-2-2-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案十七（4-2-3-2-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至6.0，灭菌30min的样品方案十八（4-2-4-2-3）：使用金银花提取物

9、加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至7.2，灭菌30min的样品方案十九（4-2-2-3-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加14.7g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案二十（4-2-2-4-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加29.4g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案二十一（4-2-2-2-1）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，不灭菌的样品方案二十二（4-2-2

10、-2-2）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，辐照灭菌的样品方案二十三（4-2-2-2-4）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入3.4g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，100灭菌20min的样品方案二十四（4-3-2-2-3）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入4.8g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，灭菌30min的样品方案二十五（4-3-2-2-1）：使用金银花提取物加1/3量的纯净水溶解，投入4.8g/l，添加2.94g/l柠檬酸钠，配制液调节至5.8，不

11、灭菌的样品注：1、方案16、21、22、23是比较不同灭菌条件的灭菌效果及产品的稳定性。2、方案13、14、16、17、18是比较配制液的ph值不同时对产品的稳定性作用大小。3、方案16、19、20是比较不同柠檬酸钠的添加量对产品的稳定性作用大小。4、方案12、13是比较添不添加柠檬酸钠对产品的稳定性（ph值和含量）作用大小。5、方案24、25是比较当金银花提取物添加量为药典处方量的2倍时，产品的稳定性（ph值和含量），灭菌前后的变化。四、样品检测分析：1、绿原酸检测测方法：色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液（10:90）为流动相；检测波长为32

12、7nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含40g的溶液，即得。供试品溶液的制备 精密量取本品1ml，置50ml棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，以0.45m微孔滤膜滤过，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。 2、黄芩苷检测测方法：色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（50:50:0.2）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品约

13、10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中,加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含黄芩苷50g)。供试品溶液的制备 精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，以0.45m微孔滤膜滤过，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。方案金银花提取工艺绿原酸投料量(g/l)配制液ph值柠檬酸钠用量(g/l)灭菌方法成品检测结果ph值绿原酸(mg/ml)黄芩苷(mg/ml)一112215.716.7319

14、.80二112235.445.1420.53三212215.677.6221.05四212235.855.4620.25五312215.697.4319.61六312235.516.3919.05七322115.7210.3819.46八322135.478.1219.24九322235.458.8219.63十312215.4010.8718.40十一312235.3315.7319.43十二411135.322.0120.92十三411235.372.3721.16十四412235.432.2119.93十五421235.352.9718.54十六422235.632.8320.81十七4

15、23235.832.8519.92十八424236.831.8119.12十九422335.712.4220.01二十422435.732.0719.99二十一422215.663.3720.30二十二422225.603.2020.28二十三422245.622.9820.89二十四432235.693.7319.54二十五432215.604.5419.44五、结论：1、分析比较方案一、三、五实验数据，中药饮片提取方法提取率分别为84%、95%、93%，由此可见，采用饮片80温浸提取方法提取率最高，同时考虑到大生产中提取液的浓缩温度为6080，由于绿原酸的热稳定性不好，所以浓缩中温度608

16、0不会影响提取率，所以金银花的最佳提取工艺为：将金银花中药饮片分两次温浸，第一次加10倍饮用水，加热至80时后温浸2小时，第二次加10倍饮用水，加热至80时后温浸1小时。2、分析比较方案六、九、十、十一、十四、十六、二十四等实验数据，绿原酸投料量与最终产品绿原酸含量比例系数，可以得出绿原酸的投料量越大最终绿原酸含量比例系数越小，即绿原酸的投料量越大，在制剂过程中的损失率越大。3、分析比较方案十三、十四、十五、十六、十七、十八等实验数据，配制液的ph值越高，制剂过程中绿原酸的损失率越大，但实验过程中发现配制过程中，当ph值低于5.5时黄芩提取物溶解性较差，而制得成品后ph值在5.35.5时比较稳

17、定，由于考虑到2010版中国药典中银黄的质量标准为5.57.0，所以配制过程中，配制液的ph值控制在5.86.0时绿原酸的利用率较高。4、分析比较方案十六、二十一、二十二、二十三等实验数据，比较不同灭菌条件的灭菌效果及产品的稳定性，绿原酸灭菌损失率分别为：5.04%、17.82%、17.51%，以此看来绿原酸的热稳定性较差，三种灭菌后的产品细菌检测均合格，相对来说co60辐照灭菌绿原酸有效成份损失较小，但成本较高而且需要送到外面去灭菌操作不方便；100流通蒸汽灭菌20min和30min有效成份损失差别不大，故生产可行的方法可选择100流通蒸汽灭菌30min。5、分析比较方案七、八、九及方案十二、十三等实验数据，可以看出添加柠檬酸钠缓冲剂有利于ph值和绿原酸有效成份的稳