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文档简介
1、bca蛋白浓度测定bc蛋白浓度测定perce®b proe asa kit(试剂盒室温保存)1。 准备bsa标准品 按ta配制一系列的蛋白标准品 原液(sc):取出一个amle(内含mgml的白蛋白标准品 (此量足够3个eplcatio)2.准备bc工作液(workig regnt,w) (1)用公式计算总工作液量(标准品数待测样品数)(复制数)*(每个工作液的量)=总的需要的工作液的量例子:3个待测样品,每个样品2个复制所需的工作液量(个标准品+个待测样品)(2个复制数)*(2ml)=48ml工作液note:试管法:每个试管需2l工作液 微孔板:每个孔需0ul工作液(例子中需共48
2、ml) (2)b试剂a:b=5:配制适量ba工作液,充分混匀。对于上面的例子,试管法需要0 baa液1ml ba b液,微孔板法需5ml a液和1l液液加到液中时,迅速浑浊,但是通过混匀立即变成清澈绿色的工作液.工作液在密闭室温下可以保存数天.3.微孔板步骤(样品与工作液比例1:8)()。标准液和样品各5ul加入微孔板中 nt:若样品有限,可各加0ul(样品与工作液比例=1:20)(2).每孔加20ul的工作液并且充分震荡30s.(3).在37度孵育样品30in,或室温2。(4).冷却至室温。(5)。在酶标仪中测量562nm时的吸光值()绘制标准曲线,再用标准曲线判断出样品的蛋白浓度。 not:40590nm的波长均可 fue 1: typcal coor eseesfor sad bgg usgthe standrd es protcol(°/30-miut inc
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