土壤中分解尿素的细菌的分离和计数时PPT课件

1、第1页/共20页自主学习，发现问题自主学习，发现问题阅读课本阅读课本P23-P26，根据导学案，根据导学案的提示，完成以下问题。的提示，完成以下问题。1.1.实验设计包括哪些内容？实验设计包括哪些内容？2.2.实验设计的流程是什么？实验设计的流程是什么？3.3.每一步是如何操作的？注意事每一步是如何操作的？注意事 项是什么？项是什么？4.4.如何进行结果分析与评价？如何进行结果分析与评价？第2页/共20页小组讨论，启发思维小组讨论，启发思维小组互对答案，对有疑问小组互对答案，对有疑问的问题相互讨论，并确定的问题相互讨论，并确定发言人，按导学案上的要发言人，按导学案上的要求完成本组的问题展示。求

2、完成本组的问题展示。第3页/共20页实验设计包括对、和，以及等的综合考虑和安排。实验方案实验方案所需仪器所需仪器材料材料用具用具药品药品具体的实施步骤具体的实施步骤时间安排时间安排学生展示，老师点拨，突破难点学生展示，老师点拨，突破难点第4页/共20页一、实验设计流程一、实验设计流程土壤取样制备培养基样品稀释取样涂布微生物的培养与观察细菌计数第5页/共20页注意事项：取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。二二.实验的具体操作及注意实项实验的具体操作及注意实项 从从肥沃、湿润、酸碱度接近中性肥沃、湿润、酸碱度接近中性的土壤中取样。先的土壤中取样。先铲去表层土铲去表层土3cm3cm左右

3、，再在距离地表左右，再在距离地表3cm-8cm3cm-8cm处取样，处取样，将样品装入事先准备好的信封中。将样品装入事先准备好的信封中。制备以尿素为唯一氮源的制备以尿素为唯一氮源的选择培养基和牛肉膏选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基蛋白胨培养基。注意事项：倒平板时要冷却到注意事项：倒平板时要冷却到50 ，且，且要在要在酒精灯火焰旁酒精灯火焰旁进行。进行。第6页/共20页第7页/共20页测定土壤中细菌的数量，一般选用104 ，105 ，106 测定放线菌的数量，一般选用103 ，104 ，105 测定真菌的数量，一般选用102 ， 103 ， 104 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？为什么

4、分离不同的微生物要采用不同的稀释度？第8页/共20页注意事项： 实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。注意事项： 涂布器和移液管要保持无菌。30300第9页/共20页在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征。包括：形状、大小、隆起程度和颜色。第10页/共20页第11页/共20页第12页/共20页第13页/共20页内容内容现象现象结论结论有无杂菌污有无杂菌污染的判断染的判断对照的培养皿中无菌对照的培养皿中无菌落生长落生长培养物中菌落数偏高培养物中菌落数偏高菌落形态多样，菌落菌落形态多样，菌落数偏高数偏高选择培养基选择培养基的筛选作用的筛选作用选择培养基具

5、有筛选作用选择培养基具有筛选作用样品的稀释样品的稀释操作操作操作成功操作成功重复组的结果重复组的结果若选取同一种土样，统计结果应若选取同一种土样，统计结果应培养基未被杂菌污染培养基未被杂菌污染被杂菌污染被杂菌污染被杂菌污染或被杂菌污染或混入其他氮源混入其他氮源牛肉膏培养基上的牛肉膏培养基上的菌落数目大于选择菌落数目大于选择培养基上的数目培养基上的数目得到三个或三个得到三个或三个以上菌落数目在以上菌落数目在30300的平板的平板接近接近第14页/共20页第15页/共20页3.3.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( )( )A.A.筛选出能分解尿素的细菌B.B.对分离的菌种作进一

6、步鉴定C.C.作细菌的营养成分 D.D.如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素当堂检测当堂检测1.1.能够测定样品活菌数的方法是能够测定样品活菌数的方法是( )( )A.A.稀释涂布平板法稀释涂布平板法 B.B.直接计数法直接计数法C.C.重量法重量法 D.D.比浊法比浊法2.2.下列操作步骤顺序正确的是下列操作步骤顺序正确的是( )( )土壤取样称取土壤取样称取10g10g土样，加入盛有土样，加入盛有90mL90mL无菌水的锥形瓶无菌水的锥形瓶中吸取中吸取0.1mL0.1mL土壤溶液进行平板涂布依次稀释至土壤溶液进行平板涂布依次稀释至101、 102 、 103 、104 、105 、10

7、6 、107稀释度稀释度A.A. B. B.C.C. D. D.ACB第16页/共20页4.(2016四川，10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,请据图回答下列问题：(1)图中选择培养基应以_为唯一氮源,鉴别培养基还需添加_作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_色。(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为163、156、262、178和191。该过程采取的接种方法是_ ，每克土壤样品中的细菌数量为_108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较_。尿素尿素酚红酚

8、红红红稀释涂布平板法稀释涂布平板法 1.91.9少少第17页/共20页5.(20155.(2015浙江自选模块，1717节选) )某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，对该酶菌株进行筛选，其流程如下图所示。请回答下列问题：(1)(1)土壤悬液首先经8080处理1515分钟，其目的是筛选出_。(2)(2)在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行_，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到_(3)(3)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是_。液体培养基与固体培养基相比，不含有的成分是_。土样中的菌种筛选土样中的菌种筛选菌株鉴定菌株鉴定优良菌株扩大培养优良菌株扩大培养植酸酶提纯植酸酶提纯植酸酶固定化植酸酶固定化植酸酶特性分析植酸酶特性分析耐高温菌株耐高温菌株稀释稀释单个菌落单个菌落供氧供氧琼脂琼脂第18页/共20页课后作业课后作业（一）空气中微生物总数的检测