消毒与灭菌ch课件

1、消毒与灭菌ch第三章第三章 消毒与灭菌消毒与灭菌 1.灭菌（灭菌（sterilization） 指杀灭物体中所有病原微生物和非病原指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。 2.消毒（消毒（disinfection） 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。并不严格要求全部杀死。 3.防腐（防腐（antisepsis） 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。指阻止或抑制微生物

2、生长繁殖的方法。 4.无菌（无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。采取防止或杜绝任指没有活的微生物的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。行的操作称为无菌操作。 消毒与灭菌ch物理因素对微生物的影响物理因素对微生物的影响 物理因素物理因素温温 度度辐射辐射干干 燥燥超声波超声波微微 波波滤过除菌滤过除菌消毒与灭菌ch(一)低温低温 大多数微生物对低温具有很强的抵抗力大多数微生物对低温具有很强的抵抗力 。低温下，代谢活动降低到最低水平，生长繁殖低温下，代谢活动降低

3、到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力。停止，但仍可长时间保持活力。 意义：意义：保存菌种、毒种、疫苗等保存菌种、毒种、疫苗等 一、温一、温 度度消毒与灭菌ch 热力灭菌法：热力灭菌法：干热灭菌干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。和湿热灭菌两种方法。 二者比较：二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。在同一温度下，后者效力比前者为大。 原因：原因：（1 1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固；）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （2 2）湿热的穿透力比干热大；）湿热的穿透力比干热大； （3 3）湿热的蒸汽有潜热存在。）湿热的蒸汽有潜热存在。 (二二)高温：高温：高温对微生物具有明显的致死作用高温对微

4、生物具有明显的致死作用.消毒与灭菌ch (1)火焰灭菌法火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，如接种环火焰直接烧灼，如接种环 。 1.干热灭菌法干热灭菌法消毒与灭菌ch (2)热空气灭菌法热空气灭菌法 干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。 灭菌温度需灭菌温度需160维持维持2 h 。消毒与灭菌ch (1)煮沸灭菌煮沸灭菌 : 煮沸煮沸1020 min可杀死所有细菌的繁殖可杀死所有细菌的繁殖 体，体，芽胞常需煮沸芽胞常需煮沸12 h才被杀死才被杀死 。用于饮水、一般器械。用于饮水、一般器械 如刀剪的消毒。

5、如刀剪的消毒。 (2)巴氏消毒法巴氏消毒法 :以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 . 1.低温维持巴氏消毒法低温维持巴氏消毒法 636530min 2.高温瞬时巴氏消毒法高温瞬时巴氏消毒法 717215s 3.超高温巴氏消毒法超高温巴氏消毒法 13212s 2.湿热灭菌法湿热灭菌法消毒与灭菌ch （3）流通蒸汽灭菌法流通蒸汽灭菌法 ：是一种常压蒸汽消毒法，细是一种常压蒸汽消毒法，细菌繁殖体菌繁殖体15-30分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。分钟可杀灭，但芽

6、孢不全部被杀灭。 (4) 间歇灭菌法间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽）（反复多次流通蒸汽） 100维持维持30min 温箱过夜温箱过夜 100维持维持30min 温箱过夜温箱过夜 100维持维持30min 温箱过夜温箱过夜 100维维持持30min。 此法常用于一些不耐高温的培养基，如鸡蛋培养基、此法常用于一些不耐高温的培养基，如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基的灭菌血清培养基、糖培养基的灭菌 。 消毒与灭菌ch高压蒸汽灭菌器：高压蒸汽灭菌器：15磅磅/平方平方英寸，英寸，121.3温度下维持温度下维持1520min 。 应用此法灭菌，一定要充分应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。

7、排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。耐热药品、手术敷料等。 手提式高压蒸汽灭菌器手提式高压蒸汽灭菌器（5）高压蒸汽灭菌法）高压蒸汽灭菌法消毒与灭菌ch辐射：辐射：能量通过空间传递的一种物理现象。能量通过空间传递的一种物理现象。 按辐射对微生物的灭活作用分：按辐射对微生物的灭活作用分：1.非电离辐射非电离辐射:可见光、日光、紫外线可见光、日光、紫外线2.电离辐射电离辐射 : 、 、射线以及高能质子、射线以及高能质子、 中子等中子等 二、辐二、辐 射射消毒与灭菌ch (一一)非电离辐射非电离辐射 1.可见光可见光:指在红外线和紫外线之

8、间的肉眼可见的光线，其指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线，其波长波长400800nm。可见光线对微生物一般无多大影响，。可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖。但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖。 光感作用光感作用 :指可见光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料指可见光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用 。消毒与灭菌ch2.阳光阳光:直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的直射日光有强烈的杀菌

9、作用，是天然的杀菌因素。许多微生物在直射日光的照射下，杀菌因素。许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经抵抗力比繁殖体大得多，往往需经20h才死亡。才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异不同而异 。消毒与灭菌ch 波长波长200-300nm部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外线杀菌灯紫外线波长为线杀菌灯紫外线波长为253.7nm。常用于微生物实验室、。常用于微生物实验室、无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不

10、能用高温或化学药无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种。品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种。 3.紫外线紫外线杀菌机理：杀菌机理：（1）损害）损害DNA构型，影响构型，影响DNA复制和转录复制和转录（2） O2 O3 O 杀菌杀菌消毒与灭菌ch (1) 射线射线:电离辐射强电离辐射强 ， 穿透力差（穿透力差（ 缺乏穿透力，不实用）缺乏穿透力，不实用） (2) 射线射线:电离辐射强电离辐射强 ， 穿透力强穿透力强 (3) 射线射线:电离辐射弱，电离辐射弱， 穿透力强穿透力强（4）X射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强射线：杀菌力不如紫外线，

11、穿透力强 用途：忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面用途：忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面 杀菌机制：杀菌机制：射线使水电离为射线使水电离为H和和OH，这些游离基是强烈的，这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身 。( (二）电离辐射二）电离辐射消毒与灭菌ch 微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。主要

12、种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。主要用于菌种和食品的保藏。用于菌种和食品的保藏。 三、干三、干 燥燥消毒与灭菌ch频率在频率在20 000200 000 Hz的声波的声波称为超声波称为超声波 。主要用于裂解细胞，提。主要用于裂解细胞，提取细胞组分。取细胞组分。四、超声波四、超声波消毒与灭菌ch 五五、微微 波波 从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。所需时间短、加热均匀。主要用于陶瓷、耐波。所需时间短、加热均匀。主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。 消毒与灭菌ch 滤过除菌滤过除菌 :通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去