本科组 华南农业大学 检验市售某些“无糖”饮品是否名副其实 20160426 实验报告

1、检验市售某些“无糖”饮品是否名副其实摘 要随着人们健康意识的不断提高，为了避免过高的糖摄入量，选择无糖饮品代替普通饮料已然成为一种新风尚，特别是对于需要严控饮食的糖尿病人来说，为了弥补饮食的缺陷，更热衷于选择无糖产品。但是市售无糖产品鱼龙混杂，有些产品含糖量超标，饮食后不仅不能达到控糖的效果，甚至加重病情。因此，慎重选择商家所谓的无糖产品是必要的。对此，我们选择了部分市售无糖饮品作为本次实验样品，检测其含糖量是否与其宣称的“无糖”相符，以此来提醒对于无糖饮品有需求的人必须慎重选择该类产品。关键词食品 无糖 双向薄层色谱法 1 前言无糖食品，其关键定义在于无糖。广义上糖类物质的定义即能够被人体消

2、化吸收转化为葡萄糖的物质，有无甜味并不是绝对的判定标准。根据欧洲国家的通用概念，无糖食品不能含有蔗糖和来自于淀粉水解物的糖包括葡萄糖、麦芽糖、果糖、淀粉糖浆、葡萄糖浆、果葡糖浆等，但一般采用糖醇或低聚糖等不升高血糖的甜味剂品种作为糖的替代物，其中，木糖醇是应用较为广泛的甜味剂品种。根据国家标准预包装特殊膳食用食品标签通则规定，“无糖”的要求是指固体或液体食品中每100克或100毫升的含糖量不高于0.5克，本实验通过检测样品中是否含有除木糖醇外的其他糖来判断其描述是否与其宣称的属实，并以此来提示对无糖食品有需求的人，挑选无糖食品时不应以其是否有甜味作为判断标准，也不能轻信商家所宣传的无糖，应该挑

3、选正规的通过国家检测的产品。2 实验目的2.1 通过双向薄层色谱法优化薄层色谱法检测样品中所含糖类混合物的组分。2.2 通过实验鉴别市售无糖饮品的真伪，从而提醒消费者。3 实验原理薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用混合物中各组分对同一吸附剂的吸附能力不同，在移动相（溶剂）流过固定相（吸附剂）的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各组分互相分离的目的。样品的混合物组分的鉴定是通过在同一块薄层板上分别点上标准样品和待测样品，通过比较斑点的比移值来定性鉴定。其中比移值Rf计算公式为：Rf = 原点至斑点中心的距离/ 原点至展开剂前沿的距离由于在相同条件下，物质的Rf 值

4、是一定的，因而比移值Rf 可以进行物质的定性分析。硅胶是常用的吸附剂，使用与酸性和中性物质的分离，在一定条件下，硅胶对各种糖类物质的吸附能力不同。同时，选择适当的展开剂，利用各种糖分的分配系数的差异，从而达到分离。显色后得到色谱图，与在相同条件下已知糖类物质的色谱图比较就能初步鉴定样品中的糖类混合物的组分。薄层色谱法分析糖类混合物的组分简便快速，但是并不能将甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、葡萄糖进行彻底分离。因此采用双向层析的方法，使用第二向展层剂对色谱图中较难辨别的部分进行优化层析。4 实验设备4.1 实验主要仪器层析缸（筒）（2个，20cm20cm)、薄层层析硅胶G板（20cm20cm)、

5、烘箱、干燥器、铅笔、直尺、玻璃毛细点样管(3mm)、洗耳球、滤纸、磁力搅拌器、喷壶、冰箱（4）4.2 实验常用仪器玻璃棒、电子分析天平（0.0001g）、容量瓶（10mL、100mL）、量筒（10mL、50mL、100mL）、烧杯（100mL）、移液管（1mL、5mL）、透明试剂瓶（50mL）5 实验材料及试剂5.1 实验基本试剂乙腈、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、磷酸、苯胺、二苯胺、葡萄糖（分析纯）、麦芽糖（分析纯）、蔗糖（分析纯）、果糖（分析纯）、木糖醇（分析纯）、蒸馏水、95%乙醇5.2 试剂的配制5.2.1 展层剂1按乙腈：水=85:15的体积比将量取好的两种展层液混合在一起，置于层析缸中，

6、将层析缸放入冰箱中（温度控制在4至9左右），展层剂高度不超过1cm,让展开剂的蒸气充满层析缸，为防止边沿效应，饱和时间在0.5h左右。5.2.2 展层剂2按正丁醇：乙酸乙酯：水=7:2:1的体积比将量取好的三种展层液混合在一起，置于另一层析缸中，将层析缸放入冰箱中（温度控制在4至9左右），展层剂高度不超过1cm,让展开剂的蒸气充满层析缸，为防止边沿效应，饱和时间在0.5h左右。5.2.3苯胺-二苯胺-磷酸显色剂取50ml丙酮置于烧杯中，依次加入5ml 85%磷酸，1ml苯胺和1g二苯胺，磁力搅拌器加热，直至均匀无颗粒，贮于喷壶中。5.2.4 标准糖溶液葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖、木糖醇分别溶于

7、95%乙醇中，使其浓度为100mg/ml，贮于试剂瓶中，保存于4冰箱中待用。5.3 实验材料市售无糖饮品，如零度可口可乐，无糖核桃粉冲剂等。6 实验操作步骤6.1 薄层层析6.1.1 制板活化本实验选取20cm20cmG型硅胶层析板，使用前将薄层板置于 105烘箱内活化30 min，置于干燥器中备用;用铅笔在距板下端2cm处画出原点线。6.1.2 点样点样时，如果实验样品为冲剂颗粒，则需要用95%乙醇或少量展开剂将其溶解，用玻璃毛细点样管点样，各斑点之间相距2cm且每个斑点的直径不超过2mm，每个样品点4次，每次点样后用冷风（洗耳球）吹干或间隔一定时间使其自然干燥。6.1.3 展开第一向展开，

8、把配制好的展层剂1倒入展开缸，点好样层析，当溶剂前沿扩展到层析板上端约 12cm处时，取出板并晾干; 第二向展开，待层析板晾干后，顺时针旋转90，放在展层剂2进行第二步层析，当溶剂前沿扩展到距薄层板上端约 12cm处时，取出板并晾干，用铅笔标出前沿线。6.2 显色将显色剂均匀喷洒在薄板上，85烘箱加热 10min 左右显色。7 结果及计算实验可以得到色谱图，用直尺测量出原点至斑点中心的距离以及原点至展开剂前沿的距离。利用公式：Rf = 原点至斑点中心的距离/ 原点至展开剂前沿的距离，计算出样品及标准液的Rf 值，通过比较样品与各标准液的Rf 值，得出结论。8 注意事项8.1点样时应注意样品用量

9、不可过多，也不能太少。8.2饱和过程中，需在展开缸中衬入一张滤纸，使展开剂蒸汽充满达到饱和。9 费用预算 物品价格数量总价薄层层析硅胶板G型20元1个20元市售无糖饮品20元1份20元分析纯级葡萄糖0.009元/g100g0.9元分析纯级麦芽糖1元/g0.1g0.1元分析纯级蔗糖0.02元/g0.1g0.002元分析纯级木糖醇56元/g0.1g5.6元分析纯级果糖1元/g0.1g0.1元蒸馏水20元/kg0.5kg10元丙酮0.4元/ml50ml20元苯胺0.1元/ml1ml0.1元二苯胺1元/g1g1元磷酸1元/ml5ml5元乙酸乙酯0.6元/ml20ml18元正丁醇1元/ml70ml70元

10、乙腈2元/ml85ml170元总价340.8元参 考 文 献1 刘秀花，崔孟岐，王莉等.双向薄层色谱法分析混合糖组分.商丘师范学院学报，2015，31（6）：1672-3600.2 苏小兰，梁懿.木糖醇注射液有关物质的薄层色谱研究.太传统医药,2012,34(10):1673-2197.3 姜晓满，田卫，张海霞，等.糖类物质的色谱分析.药物分析杂志,2006,26(8):1181-1186.4 方琳, 姚帅,崔亚君，等. 二维薄层色谱技术的研究进展.中成药,2014,36(3):589-592.5 靳朝东,刘舒扬. 薄层色谱法在药物分析方面的应用.现代药物与临床,2009,24(6):1674-5515.6 卢其明，王瑞芳等.2014.基础化学实验.2版.北京：中国农业出版社.7 张华静.购买无糖食品要认清“糖替身”.质量探索,2014-03-25.8 无糖食品真的无糖吗.科学之友（上半月）,2015-01-01.9 严晓航.薄层色谱法操作技术控制要点分析.安徽医药，2015，16（9）：1271-1272.10 敖利.薄层色