药物分析巴比妥类药物分析培训课件

1、1药物分析巴比妥类药物分析培训 巴比妥类药物是一类临床常用的催巴比妥类药物是一类临床常用的催眠镇静药。由于这类药物应用广泛，容眠镇静药。由于这类药物应用广泛，容易因不合理使用而引起中毒。因此，需易因不合理使用而引起中毒。因此，需要对本类药物的原料、制剂进行分析，要对本类药物的原料、制剂进行分析，有时也需要对生物样品中微量巴比妥类有时也需要对生物样品中微量巴比妥类药物进行分析。药物进行分析。 2药物分析巴比妥类药物分析培训本章重点介绍：本章重点介绍：一、化学结构与性质一、化学结构与性质（化学性质与分析方法间的关系）（化学性质与分析方法间的关系）二、鉴别试验二、鉴别试验三、含量测定三、含量测定 3

2、药物分析巴比妥类药物分析培训5,55,5取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物1,5,51,5,5取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物5,55,5取代的硫代巴比妥类药物取代的硫代巴比妥类药物4药物分析巴比妥类药物分析培训cccononc or1r2r3543216hh5药物分析巴比妥类药物分析培训cccononc oh5c2h5c2hh巴比妥barbital6药物分析巴比妥类药物分析培训cccononc oh5c2hh苯巴比妥phenylbarbital7药物分析巴比妥类药物分析培训cccononc onach2chch2chch3c3h7h司可巴比妥钠secobarbital8药物分析巴比妥类

3、药物分析培训cccononc onac2h5chch2ch2ch3ch3h异戊巴比妥钠9药物分析巴比妥类药物分析培训cnhcnhcoooh5c2ch3(ch2)2chch3戊巴比妥戊巴比妥10药物分析巴比妥类药物分析培训ccnhcnhoooh5c2环己烯巴比妥环己烯巴比妥11药物分析巴比妥类药物分析培训ccncnhoooh3cch31,5,5-1,5,5-取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物 己琐巴比妥己琐巴比妥5112药物分析巴比妥类药物分析培训硫喷妥钠hcccononcsnac2h5ch3ch2ch2chch313药物分析巴比妥类药物分析培训 区别各种巴比妥类药物区别各种巴比妥类药物 环状

4、丙二酰脲、环状丙二酰脲、1,3-1,3-二酰亚胺二酰亚胺基团决定巴比妥类药物的特性基团决定巴比妥类药物的特性 1. 1. 环状母核部分环状母核部分2. 2. 取代基部分取代基部分结构特征结构特征14药物分析巴比妥类药物分析培训 1. 1.白色结晶或结晶性粉未，具有固定白色结晶或结晶性粉未，具有固定的熔点。的熔点。 2. 2.游离巴比妥类药物微溶或极微溶于游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。易溶于水，而不溶于有机溶剂。 （一）物理性质（一）物理性质 15药物分析巴比妥类药物分析培训（二）（二） 化学性质化学

5、性质 巴比妥类药物分子结构中都有巴比妥类药物分子结构中都有1,3-1,3-二二酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性因此，本类药物的水溶液显弱酸性（p pk ka a为为7.3-8.47.3-8.4），可与强碱形成水溶），可与强碱形成水溶 性的盐类。性的盐类。 1. 1.弱酸性弱酸性16药物分析巴比妥类药物分析培训cccononc ohr1r2hcccononc or1r2hhcccononc or1r2hcccononc or1r2+ h+ h+pk1=8+ h

6、+ h+pk2=1217药物分析巴比妥类药物分析培训与强碱的成盐反应：与强碱的成盐反应：co nhcncoohr1r2+ naohco nhcncoonar1r2+ h2o18药物分析巴比妥类药物分析培训 2. 水解反应（1 1）巴比妥类药物的水解：其基本结构）巴比妥类药物的水解：其基本结构中具有中具有酰亚胺酰亚胺结构，与碱溶液共沸即水结构，与碱溶液共沸即水解产生氨气。解产生氨气。 + 2na2co3coonar1r2+2nh3 conhcncoohr1r2+ 5naoh19药物分析巴比妥类药物分析培训（2 2）巴比妥类钠盐的水解：在吸湿的）巴比妥类钠盐的水解：在吸湿的情况下，本类药物的钠盐也

7、能水解成情况下，本类药物的钠盐也能水解成无效物质无效物质 。nhcocncor1r2onar1 coonar2 conhconh2cchconhconh220药物分析巴比妥类药物分析培训3. 3. 与重金属离子反应与重金属离子反应（1 1）与银盐的反应）与银盐的反应- -丙二酰脲类鉴别反应丙二酰脲类鉴别反应二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323agno cona agno5521药物分析巴比妥类药物分析培训可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，323cona agno55122药物分析巴比妥类药物分析培训（2 2）与铜盐的反应（）与铜盐的反应（zwikkerzwikker反应）反应） 酰

8、亚胺结构溶于吡啶时，易发生烯醇酰亚胺结构溶于吡啶时，易发生烯醇化异构现象。烯醇化结构与铜吡啶试液作化异构现象。烯醇化结构与铜吡啶试液作用，生成稳定的配位化合物。用，生成稳定的配位化合物。巴比妥类药物 +紫色或紫色 铜吡啶试液吡啶硫喷妥钠 +绿色铜吡啶试液吡啶23药物分析巴比妥类药物分析培训用于巴比妥类与硫代巴比妥类的区别用于巴比妥类与硫代巴比妥类的区别24药物分析巴比妥类药物分析培训（3 3）与钴盐反应（）与钴盐反应（parriparri试验）试验） 反应条件反应条件: : 无水条件无水条件 常用试剂：无水乙醇或甲醇，常用试剂：无水乙醇或甲醇，醋酸钴、硝酸钴或氧化钴；醋酸钴、硝酸钴或氧化钴；

9、碱性：异丙胺或吡啶。碱性：异丙胺或吡啶。紫堇色钴盐巴比妥类药物碱性 25药物分析巴比妥类药物分析培训（4 4）与汞盐的反应）与汞盐的反应（多发生（多发生在在1 1位位） 与硝酸汞或氯化汞试液反应，生成与硝酸汞或氯化汞试液反应，生成白色汞盐沉淀，沉淀能溶于氨试液中。白色汞盐沉淀，沉淀能溶于氨试液中。nhcococnhcor1r2hgno3n-hgno3cococnhcor1r2n-hgno3coc-ohcnhcor1r2nh3h2o沉淀溶解沉淀溶解26药物分析巴比妥类药物分析培训4. 4. 与香草醛（与香草醛（vanillinvanillin）的反应）的反应 分子结构中丙二酰脲基团中的氨比较分子

10、结构中丙二酰脲基团中的氨比较活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物。缩合反应，生成棕红色产物。27药物分析巴比妥类药物分析培训（1 1）巴比妥类药物）巴比妥类药物 酸性溶液：酸性溶液：5 5，5-5-二取代、二取代、 1 1，5 5，5-5-三取代均无吸收。三取代均无吸收。 巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其电离的程度有关。和其电离的程度有关。 5. 5. 紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征28药物分析巴比妥类药物分析培训 ph10 ph10的碱性溶液：的碱性溶液：5 5，5-5-二取代、二取代、 1 1，5 5

11、，5-5-三取代均在三取代均在240nm240nm处有最大吸收处有最大吸收 ph13 ph13的强碱性溶液：的强碱性溶液：5 5，5-5-二取代在二取代在255nm255nm处有最大吸收；处有最大吸收；1 1，5 5，5-5-三取代在三取代在240nm240nm处有最大吸收。处有最大吸收。29药物分析巴比妥类药物分析培训h2so4溶液溶液(0.05mol/l)ph9.9缓冲缓冲溶液溶液naoh溶液溶液(0.1mol/l) (ph 13)巴比妥类药物的紫外吸收光谱巴比妥类药物的紫外吸收光谱nm30药物分析巴比妥类药物分析培训（2 2）含硫）含硫巴比妥类巴比妥类 酸性溶液、碱性溶液中均有明显酸性溶

12、液、碱性溶液中均有明显紫外吸收峰。紫外吸收峰。 硫喷妥的紫外吸收光谱硫喷妥的紫外吸收光谱hcl 溶液溶液 (0.1mol/l) naoh 溶液溶液 (0.1mol/l) 31药物分析巴比妥类药物分析培训6、薄层色谱行为特征、薄层色谱行为特征巴比妥类药物具有不同的分子结构，则其色谱巴比妥类药物具有不同的分子结构，则其色谱行为亦不同，可根据行为亦不同，可根据rf不同以鉴别不同以鉴别.常用的方法有薄层色谱法和高效液相色谱法等常用的方法有薄层色谱法和高效液相色谱法等32药物分析巴比妥类药物分析培训7 7、显微结晶、显微结晶 巴比妥类药物可根据其本身或与某种试剂的反应巴比妥类药物可根据其本身或与某种试剂

13、的反应产物的特殊晶型，进行鉴别产物的特殊晶型，进行鉴别 此法亦适用于生物样品中微量巴比妥类药物的检验此法亦适用于生物样品中微量巴比妥类药物的检验巴比妥与苯巴比妥的显微结晶巴比妥与苯巴比妥的显微结晶巴比妥铜吡啶结晶巴比妥铜吡啶结晶33药物分析巴比妥类药物分析培训一、与重金属离子反应（一、与重金属离子反应（丙二酰丙二酰脲类脲类鉴别试验）鉴别试验） 苯巴比妥苯巴比妥 chp chp（20002000）【鉴别】（【鉴别】（1 1）本品显丙二酰脲类的鉴）本品显丙二酰脲类的鉴 别反应（附录别反应（附录）三、三、 鉴别试验鉴别试验34药物分析巴比妥类药物分析培训 取供试品约取供试品约0.1g0.1g，加碳酸

14、钠试液，加碳酸钠试液1ml1ml与水与水10m110m1，振摇，振摇2min2min，滤过，滤液中，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即白色沉淀，振逐滴加入硝酸银试液，即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。银试液，沉淀不再溶解。 1. 1. 与银盐的反应与银盐的反应附录附录 一般鉴别试验一般鉴别试验35药物分析巴比妥类药物分析培训 取供试品约取供试品约50mg50mg，加吡啶溶液，加吡啶溶液（110110）5m15m1，溶解后，加铜吡啶试液，溶解后，加铜吡啶试液（硫酸铜（硫酸铜4g4g，水，水90ml90ml溶解后，加吡啶溶解后，

15、加吡啶30m130m1，即得），即得）1m11m1，即显紫色或生成紫，即显紫色或生成紫色沉淀。色沉淀。2. 2. 与铜盐的反应与铜盐的反应36药物分析巴比妥类药物分析培训二、测定熔点二、测定熔点1 1司可巴比妥钠的鉴别司可巴比妥钠的鉴别97972 2苯巴比妥钠的鉴别苯巴比妥钠的鉴别1741741781783 3巴比妥的鉴别巴比妥的鉴别15015037药物分析巴比妥类药物分析培训三、利用特殊取代基或元素的鉴别试验三、利用特殊取代基或元素的鉴别试验1 1利用不饱和取代基的鉴别试验利用不饱和取代基的鉴别试验（1 1）与碘试液的反应：与碘（或溴）试液发生加成反应，使）与碘试液的反应：与碘（或溴）试液发

16、生加成反应，使其颜色消褪。其颜色消褪。（2 2）与高锰酸钾的反应：与高锰酸钾在碱性溶液中反应，使）与高锰酸钾的反应：与高锰酸钾在碱性溶液中反应，使紫色紫色kmno4kmno4还原为棕色的还原为棕色的mno2 mno2 。例：司巴比妥钠与碘或高锰酸钾反应，使之褪色。例：司巴比妥钠与碘或高锰酸钾反应，使之褪色。38药物分析巴比妥类药物分析培训2 2利用芳环取代基的鉴别试验利用芳环取代基的鉴别试验（1 1）硝化反应（与硝酸钾、硫酸共热，生成）硝化反应（与硝酸钾、硫酸共热，生成黄色黄色的硝基化的硝基化产物）产物）(2)(2)苯巴比妥苯巴比妥 + + 硫酸硫酸 + + 亚硝酸钠亚硝酸钠-橙黄色橙黄色-橙

17、红色橙红色. .(3)(3)苯巴比妥苯巴比妥 + + 甲醛甲醛 + + 硫酸硫酸-玫瑰红色玫瑰红色 此鉴别方法收载于中国药典此鉴别方法收载于中国药典, ,可用于区别苯巴比妥和其它可用于区别苯巴比妥和其它巴比妥类药物巴比妥类药物. .39药物分析巴比妥类药物分析培训3 3、硫元素的鉴别试验、硫元素的鉴别试验 巴比妥类药物分子结构中含有巴比妥类药物分子结构中含有硫硫的药物，的药物，经有机破坏后硫元素转化为无机硫离子，再经有机破坏后硫元素转化为无机硫离子，再与铅离子反应生成与铅离子反应生成 pbs pbs 黑色沉淀。黑色沉淀。40药物分析巴比妥类药物分析培训( (一一) ) 苯巴比妥的特殊杂质检查苯

18、巴比妥的特殊杂质检查 1 1酸度酸度控制副产物苯基丙二酰脲控制副产物苯基丙二酰脲其酸度比苯巴比妥药物强，能使甲基红呈红色其酸度比苯巴比妥药物强，能使甲基红呈红色 2 2溶液的澄清度溶液的澄清度控制乙醇不溶物控制乙醇不溶物 3 3中性或碱性物质中性或碱性物质控制碱中不溶副产物的生成控制碱中不溶副产物的生成四、四、 特殊杂质检查特殊杂质检查41药物分析巴比妥类药物分析培训( (二二) ) 司可巴比妥钠的特殊杂质检查司可巴比妥钠的特殊杂质检查1溶液的澄清度溶液的澄清度控制乙醇不溶物控制乙醇不溶物2中性或碱性物质中性或碱性物质控制碱中不溶副产物和分解产控制碱中不溶副产物和分解产物的生成物的生成42药物

19、分析巴比妥类药物分析培训一、银量法一、银量法 基于巴比妥类药物在适当的碱性溶基于巴比妥类药物在适当的碱性溶液中，可与银离子定量成盐的性质，采液中，可与银离子定量成盐的性质，采用银量法测定本类药物及制剂的含量。用银量法测定本类药物及制剂的含量。五、五、 含量测定含量测定43药物分析巴比妥类药物分析培训原理：原理：二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323agno cona agno5544药物分析巴比妥类药物分析培训终点指示：电位法指示（终点指示：电位法指示（agag电极为电极为 指示指示电极，饱和甘汞电极为参比电极）电极，饱和甘汞电极为参比电极） 自身指示自身指示 反应摩尔比（反应摩尔

20、比（1111）溶剂系统：甲醇溶剂系统：甲醇+3%+3%无水碳酸钠无水碳酸钠优点：操作简单，专属性强。优点：操作简单，专属性强。缺点：滴定终点观察有误差，受温度影响缺点：滴定终点观察有误差，受温度影响45药物分析巴比妥类药物分析培训例：异戊巴比妥钠的含量测定：例：异戊巴比妥钠的含量测定： 取供试品取供试品0.2052g依法用依法用0.1010mol/l硝酸银滴硝酸银滴定液滴定，消耗定液滴定，消耗8.10ml,每每1ml 0.1mol/ll 硝酸银滴硝酸银滴定液相当于定液相当于24.83mg的异戊巴比妥钠，试计算异戊的异戊巴比妥钠，试计算异戊巴比妥钠的含量巴比妥钠的含量.0.10100.18.10

21、24.83100%100%98.99%205.2vftw46药物分析巴比妥类药物分析培训二、溴量法二、溴量法凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。 如司可如司可巴比妥钠及其胶囊的测定原理为：巴比妥钠及其胶囊的测定原理为： 司巴比妥钠司巴比妥钠 + br2(过量）过量）- br2（剩余）（剩余） ki ki na2s2o3- i i2 2- i i- - （蓝色消失）（蓝色消失） 淀粉指示剂淀粉指示剂47药物分析巴比妥类药物分析培训例司巴比妥钠含量

22、测定：例司巴比妥钠含量测定： 取供试品取供试品0.1301g，依溴量法测定，供试品消耗，依溴量法测定，供试品消耗0.0999mol/l硫代硫酸钠滴定液硫代硫酸钠滴定液25.05ml,空白消耗空白消耗15.05ml;每每1ml 0.1mol/l溴滴定液相当于溴滴定液相当于13.01mg的司可巴比妥钠，计算司可巴比妥钠的含量的司可巴比妥钠，计算司可巴比妥钠的含量.()100%vvftw样空0.09990.1(25.0515.05)13.01100%99.90%205.248药物分析巴比妥类药物分析培训三、酸碱滴定法三、酸碱滴定法 巴比妥类药物呈弱酸性，可采用酸碱滴定测含量。巴比妥类药物呈弱酸性，可

23、采用酸碱滴定测含量。溶剂溶剂指示剂指示剂终点终点效果效果水水-乙醇乙醇麝香草酚酞麝香草酚酞淡蓝色淡蓝色一般一般胶束水溶液胶束水溶液麝香草酚酞麝香草酚酞淡蓝色淡蓝色较好较好非水溶剂非水溶剂无无电位法指示终点电位法指示终点较好较好例：异戊巴比妥（因溶剂也消耗碱量，所以要做空白）例：异戊巴比妥（因溶剂也消耗碱量，所以要做空白） 49药物分析巴比妥类药物分析培训药名药名入入max(nm)溶剂溶剂异戊巴比妥异戊巴比妥238440ph9.4硼酸盐缓冲液硼酸盐缓冲液戊巴比妥戊巴比妥239420hcl 液液(0.1mol/l)戊巴比妥戊巴比妥240310ph9.4硼酸盐缓冲液硼酸盐缓冲液司可巴比妥司可巴比妥2

24、40330ph9.4硼酸盐缓冲液硼酸盐缓冲液苯巴比妥苯巴比妥253320naoh液液(0.1mol/l)硫喷妥硫喷妥305930ph9.4硼酸盐缓冲液硼酸盐缓冲液 1e 1cm四四、紫外分光光度法、紫外分光光度法 巴比妥类药物紫外吸收波长、吸收系数见巴比妥类药物紫外吸收波长、吸收系数见p124表：表：50药物分析巴比妥类药物分析培训具体方法：具体方法： （一）直接紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法 本法是将样品溶解后，根据溶液的本法是将样品溶解后，根据溶液的phph值选用其相应的值选用其相应的 maxmax处进行直接测定。处进行直接测定。（二）经提取分离后的紫外分光光度法（二）经提取分离后

25、的紫外分光光度法51药物分析巴比妥类药物分析培训1. 1. 吸收系数法吸收系数法leac1%1cm)g/100ml(clea%1cm1100)g/ml(1%1cmleac52药物分析巴比妥类药物分析培训 0 c1 c2 c3 c4 cx c5 c a 5 a x a 4 a 3 a 2 a 1 a2. 2. 标准曲线法标准曲线法 53药物分析巴比妥类药物分析培训3. 3. 对照法对照法 对样对样aacc对样对样ccaalcelceaa对%1cm1样%1cm1对样54药物分析巴比妥类药物分析培训 取两份相等的供试溶液，分别制成两取两份相等的供试溶液，分别制成两种不同的化学环境（如在其一中加酸、碱

26、种不同的化学环境（如在其一中加酸、碱或缓冲液改变溶液的或缓冲液改变溶液的phph，或在其一中加能，或在其一中加能与供试品发生某种化学反应的试剂），然与供试品发生某种化学反应的试剂），然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当波长品池中，另一份置参比池中，于适当波长 处，测其吸收度的差值（处，测其吸收度的差值（ a a值）。值）。（三）差示分光光度法（三）差示分光光度法（ a a法）法）1. 1. 测定方法测定方法55药物分析巴比妥类药物分析培训2. 2. 必要条件必要条件 （1 1）供试品在不同的化学环境中以不同的）供试品在不同的

27、化学环境中以不同的分子形式存在，它们的吸收光谱有显著的分子形式存在，它们的吸收光谱有显著的差异。差异。 （2 2）干扰物的吸收不受测定时化学环境的）干扰物的吸收不受测定时化学环境的影响，光谱行为不变。影响，光谱行为不变。 56药物分析巴比妥类药物分析培训 供试品在两种不同的化学环境中分别供试品在两种不同的化学环境中分别以以x x、y y 表示，干扰物用表示，干扰物用 z z 表示表示3. 3. 定量依据定量依据claaaaaaaaayxyxzyzx)( )()(样2样1ca57药物分析巴比妥类药物分析培训即，吸收度差值（即，吸收度差值（ a a）仅与待测组分的）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，即干扰浓度有关，而与干扰组分无关，即干扰组分的干扰被消除。组分的干扰被消除。 可用对照法或标准曲线法定量可用对照法或标准曲线法定量58药物分析巴比妥类药物分析培训 保留了通常的分光光度法简易快速、保留了通常的分光光度法简易快速、直接读数的优点，又无需事先分离，并直接读数的优点，又无需事先分离，并能消除干扰。能消除干扰。4. 4. 特点特点59药物分析巴