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文档简介
1、本方法可用于测定受试物对陆本方法可用于测定受试物对陆生植物种子萌发和根部伸长的生植物种子萌发和根部伸长的抑制作用,以评定受试物对陆抑制作用,以评定受试物对陆生植物胚胎发育的影响。生植物胚胎发育的影响。目目 的的种子在含一定浓度受试物的基质中种子在含一定浓度受试物的基质中发芽,当对照组种子发芽率在发芽,当对照组种子发芽率在6565以上,根长达以上,根长达2cm2cm时,试验结束,时,试验结束,测定不同处理浓度种子的发芽率和测定不同处理浓度种子的发芽率和根伸长抑制率根伸长抑制率。原原 理理培养容器,受控环境生长箱,试验材培养容器,受控环境生长箱,试验材料可选用小麦、水稻、大白菜、番茄、料可选用小麦
2、、水稻、大白菜、番茄、棉花等。棉花等。每一植物种子试验,至少应有每一植物种子试验,至少应有6 6个不同个不同的处理浓度。浓度以几何级数选择。的处理浓度。浓度以几何级数选择。每一处理浓度应设每一处理浓度应设3 3次以上重复,每一次以上重复,每一重复至少重复至少1515粒种子。发芽试验期间温粒种子。发芽试验期间温度控制在度控制在(25(251) 1) ,保持黑暗。,保持黑暗。仪器和试验材料仪器和试验材料用医用小镊子将用医用小镊子将1515粒种子播种于土壤中,粒种子播种于土壤中,盖好好盖子,置于生化培养箱中盖好好盖子,置于生化培养箱中2525黑暗黑暗培养。培养。当植物对照芽长达当植物对照芽长达20m
3、m20mm时,终止培养,取时,终止培养,取出发芽种子,测量根长、芽长、根数和发出发芽种子,测量根长、芽长、根数和发芽个数芽个数置于烘干箱中置于烘干箱中4040烘烘24h24h,测量平均生物量,测量平均生物量( (分分析天平析天平) )。试验方法数据处理发芽势发芽势= =在规定日期内正常发芽在规定日期内正常发芽的种子数的种子数/ /供试种子总数供试种子总数发芽率发芽率= =种子发芽终止时全部正种子发芽终止时全部正常发芽种子数常发芽种子数/ /供试种子总数供试种子总数对种子发芽进行计数对种子发芽进行计数, ,种子发芽标准为芽种子发芽标准为芽长长3 mm3 mm。根长测量时选取最长根长的主。根长测量
4、时选取最长根长的主根。根。其中根长是指根和芽接点处到最长根尖其中根长是指根和芽接点处到最长根尖的长度的长度芽长是根基点到芽尖的长度芽长是根基点到芽尖的长度数据处理本测试适用于水溶性化学物质,如果受试物不本测试适用于水溶性化学物质,如果受试物不溶于水,可用水溶性有机溶剂,如丙酮、乙醇、溶于水,可用水溶性有机溶剂,如丙酮、乙醇、丙醇等作载体,获得试验要求的浓度。丙醇等作载体,获得试验要求的浓度。发芽是指胚重新开始活跃生长。种子初生根的发芽是指胚重新开始活跃生长。种子初生根的长度达长度达0.5cm0.5cm作为发芽的标准。作为发芽的标准。 种子应大小一致,饱满度、等级相同。种子应大小一致,饱满度、等
5、级相同。注意事项注意事项试验前,所有种子经试验前,所有种子经2%2%双氧水浸泡双氧水浸泡10min10min后,分别用自来水和蒸馏水充分后,分别用自来水和蒸馏水充分冲洗。冲洗。所有试验用的玻璃器皿和基质应清洁所有试验用的玻璃器皿和基质应清洁,无污染。试验中不准使用塑料培养,无污染。试验中不准使用塑料培养皿。对照种子发芽率应大于皿。对照种子发芽率应大于6565。本实验每处理重复本实验每处理重复3 3次次当且仅当根长和芽长均当且仅当根长和芽长均过过3mm3mm时,才认为是发时,才认为是发芽成功。芽成功。 种子发芽试验、植物根伸长抑制试验以及植物早期生长试验都是目前已经建立的高等植物毒理试验方法!这
6、些试验通过考察植物在污染条件下根系发育的情况、生物量减少的程度以及种子发芽对污染物毒性效应的反应,对污染物的危害性进行诊断并对相应的生态风险作出评价。供试材料供试材料研究方法研究方法所有的玻璃器皿使用前用所有的玻璃器皿使用前用 洗液浸洗,再用自洗液浸洗,再用自来水冲洗干净,蒸馏水冲洗一遍,于烘箱来水冲洗干净,蒸馏水冲洗一遍,于烘箱120120烘烘干备用。干备用。根据麝香酮在污泥中的浓度为根据麝香酮在污泥中的浓度为100mg/kg,100mg/kg,设置麝香酮设置麝香酮预实验浓度为预实验浓度为0 0、0.50.5、1010、2020、和、和50mg/kg50mg/kg进行预备进行预备实验。实验。
7、根据预备试验中小麦芽长和根长抑制率根据预备试验中小麦芽长和根长抑制率10%50%10%50%的的浓度设置麝香酮的正式试验浓度为浓度设置麝香酮的正式试验浓度为0 0、0.50.5、1010、2020、30mg/kg30mg/kg。采用土壤染毒法,将配制好的麝香酮采用土壤染毒法,将配制好的麝香酮- -丙酮溶液投加丙酮溶液投加到土壤中,待丙酮挥发干净,开始正式试验到土壤中,待丙酮挥发干净,开始正式试验! !称取称取50g50g干土于干土于90mm90mm的培养皿中,调节水土比为的培养皿中,调节水土比为1 1:5 5,用医用小镊子将,用医用小镊子将1515粒种子播种于土壤中,盖好粒种子播种于土壤中,盖好盖子,置于生化培养箱中盖子,置于生化培养箱中2525黑暗培养黑暗培养, ,当小麦对照当小麦对照芽长达到芽长达到20mm20mm时,终止培养,取出发芽种子,测时,终止培养,取出发芽种子,测量根长、芽长、根数和发芽个数,然后置于量根长、芽长、根数和发芽个数,然后置于烘干箱中烘干箱中4040烘烘24h24h,测量平均生物量(分析天,测量平均生物量(分析天平)平)! !结果与分析结果与分析在所有试验浓度范围内,麝香酮污染对小麦在所有试验浓度范围内,麝香酮污染对小麦的发芽率起促进作用,低浓度的麝香酮促进的发芽率起促进作用,低浓度的麝香酮促进小麦芽长生长小麦芽长生长! !随着浓度的增加,芽
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