乙肝病毒前S1蛋白在乙型肝炎临床诊断中的意义和应用

1、乙肝病毒前s1蛋白在乙型肝炎临床诊断中的意义和应用病病 毒毒 性性 肝肝 炎炎 的的 主主 要要 特特 性性 如如 下下分分 型型 项项 目目 甲型甲型 乙型乙型 丙型丙型 丁型丁型 戊型戊型 病病 原原 27 nm 42 nm 30-60 nm 36 nm 27-38 nm rna病毒病毒 dna病毒病毒 rna病毒病毒 rna病毒病毒 rna病毒病毒 主要传播途径主要传播途径 粪粪口口 血液、母婴血液、母婴 血血 液液 血血 液液 粪粪口口 流流 行行 性性 散发或流行散发或流行 散散 发发 散散 发发 散散 发发 流行或散发流行或散发 潜潜 伏伏 期期 30 天天 90 天天 5 周周

2、420 周周 36 天天 （1550） （ 45160） （ 226 ） （ 1575 ） 起起 病病 急性较多急性较多 多多 缓缓 慢慢 多多 缓缓 慢慢 多多 缓缓 慢慢 急性较多急性较多 慢慢 性性 肝炎肝炎 或或 无无 有有 有有 有有 无无 慢性病毒携带慢性病毒携带血清病毒性肝炎血清病毒性肝炎标标 志志 物物 检检 测测 eia eia eia eia eia、iem以及基因检测以及基因检测 rt-pcr pcr rt-pcr rt-pcr 在我国建立简便、灵敏、重复性好的检测在我国建立简便、灵敏、重复性好的检测乙型肝炎病毒试剂盒是及其重要的。乙型肝炎病毒试剂盒是及其重要的。 我国为

3、病毒性肝炎的高发区，特别是乙型我国为病毒性肝炎的高发区，特别是乙型肝炎，我国人群乙型肝炎病毒的感染率达肝炎，我国人群乙型肝炎病毒的感染率达 45-45-85%85%，hbsaghbsag携带者有携带者有1.21.2亿以上，亿以上，10% 10% 以上转为以上转为慢性肝炎，部分演变为肝硬变，进而引发肝癌。慢性肝炎，部分演变为肝硬变，进而引发肝癌。前s1蛋白分子生物学特性 1 1、乙肝病毒、乙肝病毒(hbv)(hbv)基因结构基因结构 hbvhbv为嗜肝为嗜肝dnadna病毒，由一个不完病毒，由一个不完全双链全双链 dna dna 组成，约组成，约 3200 3200 个氨基酸；个氨基酸； 长链长

4、链l(-)l(-)含含4 4个开放读码框架（个开放读码框架（ofr)ofr)，为病，为病毒蛋白的编码区：毒蛋白的编码区：s s 区、区、c c 区、区、p p 区、区、x x 区；区； 短链短链s(+)s(+)相当于长链的相当于长链的5050100%100%。其不固。其不固定端可被内源性定端可被内源性dnadna多聚酶延长，使病毒成为完多聚酶延长，使病毒成为完整的双链。整的双链。外膜外膜核壳核壳负链负链dna正链正链dnadna多聚酶多聚酶乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（hbv） 图图 解解x gene x genec genepre chbxaghbcaghbeags genepres2pres

5、1p genehbsag dnapolymerasehbv 基因组：编码基因组：编码hbv 抗原的基因抗原的基因ssspres2pres2pres1226 aa “major”or”small” hbsag226 aa 226 aa 55 aa 55 aa 281 aa”middle” hbsag389 aa”large” hbsag108 aa编码不同形式表面抗原（编码不同形式表面抗原（hbsag) hbsag) 的的 hbv hbv 基因区域基因区域乙乙 型型 肝肝 炎炎 病病 毒毒 血血 清清 学学 检检 测测 的的 临临 床床 意意 义义检测名称检测名称hbv感染，高滴度的感染，高滴度

6、的 hbsag 常表示病毒的高复制常表示病毒的高复制水平，低滴度则表示病毒低复制或不复制。水平，低滴度则表示病毒低复制或不复制。hbsag抗抗hbs乙型肝炎的保护性抗体。当乙型肝炎的保护性抗体。当hbv感染趋向恢复时，感染趋向恢复时，抗抗 hbs 开始产生并逐渐增多。开始产生并逐渐增多。hbeag临床上病毒复制的指标。临床上病毒复制的指标。hbeag与与alt结合，结合，用于病期和病情判断。用于病期和病情判断。抗抗hbe通常表示病毒复制减弱和肝病渐趋恢复。前通常表示病毒复制减弱和肝病渐趋恢复。前c/a83变异，变异，hbeag不表达，抗不表达，抗hbe(+)，病毒持续复制，肝病转慢，病毒持续复

7、制，肝病转慢。抗抗hbchbv现症或既往感染标志。流行病学研究的指标。现症或既往感染标志。流行病学研究的指标。乙乙 肝肝 五五 项项（hbv m )缩缩 略略 语语临临 床床 意意 义义乙肝乙肝igm核心抗体核心抗体检测名称检测名称缩缩 略略 语语临临 床床 意意 义义抗抗hbcigmhbv的急性感染和重新活动的慢性的急性感染和重新活动的慢性感染标志感染标志。前前s1蛋白蛋白pres1抗原抗原 hbv感染的最早期出现，提示感染的最早期出现，提示hbv的感染，的感染，复制和传染性。复制和传染性。pres1抗原的转阴是病毒清抗原的转阴是病毒清除最早迹象，如持续阳性提示肝病转慢。除最早迹象，如持续阳

8、性提示肝病转慢。pres1抗体抗体急性急性hbv感染最早出现的抗体。它即反感染最早出现的抗体。它即反应了病毒的清除又反应了病变的活动。应了病毒的清除又反应了病变的活动。动物试验表明抗前动物试验表明抗前s1有抗病毒的作用。有抗病毒的作用。乙乙 型型 肝肝 炎炎 病病 毒毒 血血 清清 学学 检检 测测 的的 临临 床床 意意 义义s 基基 因因 变变 异异 状状 况况1. 前前 s1 变异株以前变异株以前 s1 蛋白蛋白 c 端端 aa 183 缺失突变较多见，这种缺失突变较多见，这种 突变因影响突变因影响 hbsag 正常分泌，并使正常分泌，并使 l 蛋白发生蓄积而引起肝蛋白发生蓄积而引起肝

9、细胞病变和肝细胞对炎性因子的损伤更敏感。细胞病变和肝细胞对炎性因子的损伤更敏感。2. 前前 s1 基因起病密码下游基因起病密码下游 230 位核苷酸（位核苷酸（nt 230）可因突变形成）可因突变形成 终止密码并影响前终止密码并影响前 s2 起始密码，可使起始密码，可使 hbv 逃避干扰素治疗和逃避干扰素治疗和 宿主免疫清除。宿主免疫清除。3. s基因变异是疫苗免疫失败的重要原因：基因变异是疫苗免疫失败的重要原因： hbsag aa 145 变异株。变异株。 hbsag aa 126，129，132，133，134等变异株。等变异株。 理想的疫苗应能诱导覆盖野毒株和变异株保护性免疫。理想的疫苗

10、应能诱导覆盖野毒株和变异株保护性免疫。4. s 基因变异导致形成基因变异导致形成 hbsag / 抗抗 hbs 双阳性（双阳性（aa 126，130，145）5. s 基因变异导致形成基因变异导致形成 hbsag 阴性，抗阴性，抗 hbs 阳性，阳性，hbv-dna 持续持续 阳性的慢性乙型肝炎的重要原因（阳性的慢性乙型肝炎的重要原因（aa 126，131，145） 乙肝病毒前乙肝病毒前s1s1的研究表明：前的研究表明：前s1s1蛋白及其抗体与蛋白及其抗体与hbv-dnahbv-dna、hbeaghbeag、肝、肝脏损害、乙肝的转归、乙肝疫苗有效成分等都脏损害、乙肝的转归、乙肝疫苗有效成分等都

11、有极其密切的关系。有极其密切的关系。 乙肝病毒前乙肝病毒前s1s1蛋白及其抗体可蛋白及其抗体可作为乙肝病毒感染、复制和乙肝病人的诊断、作为乙肝病毒感染、复制和乙肝病人的诊断、治疗和预后的新标志和新检测系统。治疗和预后的新标志和新检测系统。意义意义 hbsag anti- anti-hbc hbeag anti- hbv/ pres1 pres1 hbs igm tot hbe dna 抗原抗原 抗体抗体 / / / / 病病 毒毒 活活 动动 （ 主主 要要 为为 野野 生生 型型 ）病病 毒毒 活活 动（主要为动（主要为 前核负链变异型）前核负链变异型）正正 在在 消消 退退 的的 急急 性

12、性 肝肝 炎炎健健 康康 携携 带带 者者“核核 心心 窗窗 口口 ” 期期自自 然然 感感 染染 后后 的的 免免 疫疫疫疫 苗苗 接接 种种 后后 的的 免免 疫疫不同形式的血清学不同形式的血清学 hbv 标记物和它们的解释标记物和它们的解释前s1、hbv免疫检测结果hbv标志标志前前s1 () 例数例数例例 数数+阳阳 性性 率率 ( % )hbsag () hbeag () 抗抗hbc ()1079487.9hbsag () 抗抗hbe () 抗抗hbc ()1196857.1hbsag () hbeag ()211676.2hbsag () 抗抗hbc ()371129.7hbsag

13、 () hbeag () 抗抗hbe ()4125.0hbsag () 抗抗hbe ()1310.77hbsag () 抗抗hbs () 抗抗hbe () 抗抗hbc ()400hbsag () 抗抗hbs ()1900hbsag () 抗抗hbs () 抗抗hbe ()200hbsag ()400合计合计33019157.90 3 6 9 12水平pres1抗抗原原hbsagalthbs抗抗体体pre s1(igg)hbeaghbc(igm)hbc(igg)hbc抗抗体体月hbv-dna急急性性乙乙肝肝患患者者血血清清病病毒毒学学标标志志物物转转换换曲曲线线hbsagpres1抗原pres1

14、抗体抗体(igm)pres1抗体抗体(igg)抗抗hbs年抗抗hbe抗抗hbc(igg)hbeag0 10 20 30 感染hbv-dnahbv 携带者血清病毒学标志物的转换曲线携带者血清病毒学标志物的转换曲线前前s1蛋白与蛋白与 hbv-m 和和 hbv-dna 测定结果测定结果pres1hbv-dna（）（）阳性率阳性率阳性率阳性率（）（）hbv-mnhbsag, hbeag, 抗抗 hbc hbsag, 抗抗hbe, 抗抗 hbc hbsag, 抗抗 hbc 抗抗hbs, 抗抗hbe，抗，抗hbc 抗抗hbs， 抗抗 hbc抗抗 hbchbsag, 抗抗 hbs387 347 89 35

15、1 91236 76 32 82 35 108 23 21 29 2721 0 0 0 0 30 0 0 0 0 36 0 0 1 2.7 4 0 0 0 0病日病日例数例数前前s1抗原抗原()抗前抗前s1抗体抗体()hbsag()hbeag()抗抗hbs入院日入院日25222325180入院后一月入院后一月25172223140入院后二月入院后二月258221358入院后三月入院后三月212124115急性乙型肝炎前急性乙型肝炎前s1s1抗体动态变化抗体动态变化病后时间病后时间(周周)病例数病例数检测血清份数检测血清份数前前s1抗体抗体 ( + )% %25 - 484 477.877.86

16、2.562.540.040.04 41 125.025.05 52 23 - 89 - 24181818185 51 - 21818141424241515不同类型不同类型 hbv 感染的前感染的前s蛋白及其抗体的检出率蛋白及其抗体的检出率 hbv （杂交）（杂交） 前前s1蛋白蛋白 前前s2 蛋白蛋白 前前s1抗体抗体 前前s2抗体抗体急性乙型肝炎急性乙型肝炎极期极期恢复恢复6月内月内恢复恢复0.5-2年年趋向慢性趋向慢性暴发性乙型肝炎暴发性乙型肝炎慢性无症状携带慢性无症状携带hbeag(+)抗抗hbe(+)慢性乙型肝炎慢性乙型肝炎hbeag(+)抗抗hbe(+)95 97 92 87 82

17、 0 0 26 98 950 0 0 0 3095 90 65 0 1222 30 67 5 28 82 99 97 0 0 3 12 40 0 071 85 92 81 68 13 53 70 65 80* 据骆抗先文献综合结结 语语乙型肝炎病毒前乙型肝炎病毒前1抗原研究进展抗原研究进展 国内外对前蛋白国内外对前蛋白/抗前蛋白临床意义的基本共识抗前蛋白临床意义的基本共识一一前蛋白前蛋白前前1病毒蛋白出现在急性病毒蛋白出现在急性 hbv 感染的最早期，是病毒感染的最早期，是病毒清除的最早迹象。清除的最早迹象。前前 1 病毒蛋白持续存在者将发展至慢性肝炎。病毒蛋白持续存在者将发展至慢性肝炎。前前

18、1 病毒蛋白与病毒蛋白与hbv-dna, hbeag 高度相关。与肝内高度相关。与肝内hbv-dna, hbcag 检出高度相关。检出高度相关。在抗在抗hbe(+)的的hbv感染者中，检出前感染者中，检出前1蛋白蛋白可表明病毒的复制。可表明病毒的复制。病毒附着于肝细胞膜上，最重要的介导部位是前病毒附着于肝细胞膜上，最重要的介导部位是前1 蛋白的蛋白的 氨基酸氨基酸 (aa) 21-47片段。变异的病毒只要这片段。变异的病毒只要这 一区段完好就有传染性。仅仅是对一区段完好就有传染性。仅仅是对 (aa) 21-47 肽的肽的 前前1抗体才能中和病毒。抗体才能中和病毒。前前 s1 s1 蛋白颗粒表面具有高度的免疫原性，常作为蛋白颗粒表面具有高度的免疫原性，常作为 乙肝疫苗的主要成分。乙肝疫苗的主要成分。 前前 s1 s1 抗原主要存在于血清中完整抗原主要存在于血清中完整 hbv hbv 表面。表面。二抗前蛋白二抗前蛋白 前抗体同时反映病变的活动和对病毒的清除前抗体同时反映病变的活动和对病毒的清除。1. hbsag 消失后才转换为抗消失后才转换为抗 hb