我的植物组织培养

1、2.12.1植物细胞工程植物细胞工程2.1.12.1.1植物细胞工程的基本技术植物细胞工程的基本技术1 1、植物组织培养技术、植物组织培养技术2 2、植物体细胞杂交技术、植物体细胞杂交技术 莲瓣兰“素冠荷鼎”是中国云南大理荡山州兰园的镇园之宝，该兰花估价1500万人民币。莲瓣兰“素冠荷鼎”姿态优美，数量极其稀少，集合了莲瓣、素心及叶型草三大精品兰特点于一身。 一、植物组织培养技术一、植物组织培养技术1.1.为什么取韧皮部细胞？最初取材的这为什么取韧皮部细胞？最初取材的这些细胞或组织叫什么？些细胞或组织叫什么？2.2.表现全能性的条件有哪些？表现全能性的条件有哪些？3.3.这些这些“细胞团块细胞

2、团块”叫什么？叫什么？4.4.具有生根、发芽能力的结构叫什么？具有生根、发芽能力的结构叫什么？它有何意义？它有何意义？5.5.总结植物组织培养的基本步骤。总结植物组织培养的基本步骤。胚状体或丛芽胚状体或丛芽植物体植物体脱分化脱分化再分化再分化发育发育愈伤组织愈伤组织离体的植物器官、组织或细胞离体的植物器官、组织或细胞 外植体外植体植物组织培养植物组织培养步骤步骤 怎样才能由一块组织通过培养得到一株完整怎样才能由一块组织通过培养得到一株完整植株植株? ?请阅读请阅读3434页实验，思考以下问题：页实验，思考以下问题：（一）植物组织培养过程（一）植物组织培养过程1.1.你对整个过程的什么操作处理印

3、象最深刻？你对整个过程的什么操作处理印象最深刻？2.2.为何强调无菌操作？为何强调无菌操作？3.3.愈伤组织的形态有什么特点？愈伤组织的形态有什么特点？4.4.为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养？为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养？5.5.什么是脱分化？再分化？什么是脱分化？再分化？6.6.决定脱分化、再分化的关键因素是什么？决定脱分化、再分化的关键因素是什么？切取切取形成层形成层无菌无菌接种接种诱导愈伤组织诱导愈伤组织的形成的形成试管苗的形成试管苗的形成培养室培养室移栽移栽愈伤组织愈伤组织再分化再分化根根芽芽(胚状体胚状体) (试管苗试管苗)植物体植物体离体的植物器官、离体的植物器官、组

4、织或细胞组织或细胞 (高度分化高度分化)脱分化脱分化营养物质营养物质激素激素其他外界条件其他外界条件光照、营光照、营养物质、养物质、激素等激素等移栽移栽植物组织培养植物组织培养表现出全能性表现出全能性水水,无机盐无机盐,小小分子分子有机物有机物(蔗糖蔗糖)等等细胞分裂素细胞分裂素和生长素和生长素无菌、温度、无菌、温度、氧气、适宜的氧气、适宜的ph值、无光照。值、无光照。脱分化和再脱分化和再分化中激素分化中激素有何异同？有何异同？还需要有机还需要有机营养吗？为营养吗？为什么？什么？具有分裂能力具有分裂能力的器官、组织、的器官、组织、细胞细胞 试管苗大规模培养 根据上述过程，请同学们讨论归纳出组织

5、培养的概念。 植物组织培养就是在植物组织培养就是在无菌无菌和和人工控制人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养在人工配制的培养基培养基上，给予适宜的上，给予适宜的培养条件，诱导其产生培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽愈伤组织、丛芽，最终形成最终形成完整完整的植株。的植株。（二）植物组织培养概念（二）植物组织培养概念你知道吗？你知道吗？目前在植物组织培养中应用的培养基一般含有五类成分。请阅读以下相关材料，结合课本，看看分别属于培养基的哪一成分： 材料材料1 1 一般用蒸馏水或去离子水配制培养基，一般用蒸馏水或去离子水配制培养基，煮沸

6、过的自来水也可利用。煮沸过的自来水也可利用。 材料材料2 2 培养基中包括大量元素和微量培养基中包括大量元素和微量元素。大量元素有元素。大量元素有n n、p p、k k、s s、caca、mgmg、nana等，微量元素有等，微量元素有mnmn、znzn、cucu、b b、momo、fefe等。等。 材料材料3 3 培养基中含有糖、维生素和氨基酸。培养基中含有糖、维生素和氨基酸。糖为培养基提供所需要的碳源，并有调节渗透糖为培养基提供所需要的碳源，并有调节渗透压的作用。常用的是质量分数为压的作用。常用的是质量分数为2 24 4的蔗的蔗糖，有时也加入葡萄糖和果糖等。一般来说，糖，有时也加入葡萄糖和果

7、糖等。一般来说，以蔗糖为碳源时，离体的双子叶植物的根长得以蔗糖为碳源时，离体的双子叶植物的根长得较好；而以葡萄糖为碳源时，单子叶植物的根较好；而以葡萄糖为碳源时，单子叶植物的根长得较好。植物能够利用的其他形式的碳源有长得较好。植物能够利用的其他形式的碳源有麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖，有的还能利麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖，有的还能利用淀粉。维生素和氨基酸类主要有硫胺素（维用淀粉。维生素和氨基酸类主要有硫胺素（维生素生素b1b1）、吡哆素（维生素）、吡哆素（维生素b6b6）、烟酸（维生）、烟酸（维生素素b3b3）、泛酸（维生素）、泛酸（维生素b5b5）以及甘氨酸、天冬）以及甘氨酸、天冬酰胺、谷

8、氨酰胺等。酰胺、谷氨酰胺等。 材料材料4 4 有时加一些天然的有机物，如有时加一些天然的有机物，如椰子乳、酵母提取物、玉米胚乳、麦芽椰子乳、酵母提取物、玉米胚乳、麦芽浸出物或番茄汁等。它们对愈伤组织的浸出物或番茄汁等。它们对愈伤组织的诱导和分化往往是有益的。诱导和分化往往是有益的。 材料材料5 5 常用生长素和细胞分裂素，如常用生长素和细胞分裂素，如2 2，4 4d d、萘乙、萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等用于诱导细胞的分裂和根酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸等用于诱导细胞的分裂和根的分化。吲哚乙酸易被光和酶氧化分解，所以加入的的分化。吲哚乙酸易被光和酶氧化分解，所以加入的浓度较高，常为浓度较高，常为1

9、130mg/l30mg/l，萘乙酸、，萘乙酸、2 2，4 4d d的浓度的浓度则以则以0.10.12mg/l2mg/l为宜。激动素、为宜。激动素、6 6苄基腺嘌呤、异戊苄基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、玉米素等可以促进细胞分裂和诱导愈伤烯基腺嘌呤、玉米素等可以促进细胞分裂和诱导愈伤组织或器官分化不定芽，它们常用的浓度为组织或器官分化不定芽，它们常用的浓度为0.010.011mg/l1mg/l。在原代培养中，一般都需加入激素类物质，但。在原代培养中，一般都需加入激素类物质，但随着继代培养次数的增加，加入量可逐代减少。离体随着继代培养次数的增加，加入量可逐代减少。离体培养物的根芽分化取决于激素间的比例。

10、此外，赤霉培养物的根芽分化取决于激素间的比例。此外，赤霉素等对刺激培养细胞的伸长也具有一定的作用。素等对刺激培养细胞的伸长也具有一定的作用。 水水 无机营养成分无机营养成分 有机营养（碳源、维生素及有机添加有机营养（碳源、维生素及有机添加物）物） 生长调节剂生长调节剂 琼脂琼脂支持、固定支持、固定（三）组织培养基的成分及作用（三）组织培养基的成分及作用拓展延伸拓展延伸1 1 植物组织培养还可能需要哪些条件？植物组织培养还可能需要哪些条件？（除无菌、培养基以外）（除无菌、培养基以外） 植物组织培养用的培养基含有植物生长发植物组织培养用的培养基含有植物生长发育所需要的各种营养物质，而细菌等微生物比

11、育所需要的各种营养物质，而细菌等微生物比植物细胞有更强的生长繁殖能力，且会产生毒植物细胞有更强的生长繁殖能力，且会产生毒素，使培养的细胞中毒死亡，因此要有效防止素，使培养的细胞中毒死亡，因此要有效防止细菌污染。细菌污染。 请汇总操作中有哪些措施可防止杂菌的污请汇总操作中有哪些措施可防止杂菌的污染？染？材料材料手手 培养场所培养场所培养器皿培养器皿培养基培养基用酒精和次氯酸钠消毒用酒精和次氯酸钠消毒 ，并用蒸馏水冲洗并用蒸馏水冲洗甲醛和紫外线消毒甲醛和紫外线消毒高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 在有光时，往往容易形成维管组织，而不在有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。易形成愈伤组织。注意：注意： 光抑制愈伤组织的细胞分裂，但能促进芽光抑制愈伤组织的细胞分裂，但能促进芽的分化。的分化。 因此脱分化时避光，而再分化诱导成芽特因此脱分化时避光，而再分化诱导成芽特别是形成叶时，需要在光照的条件下进行。别是形成叶时，需要在光照的条件下进行。名称名称概念概念过程过程形成体特点形成体特点条件条件脱分化脱分化已经分化的细胞经过已经分化的细胞经过诱导后失去其特有的诱导后失去其特有的结构和功能而转变成结构和功能而转变成未分化细胞的过程未分化细胞的过程 外植体外植体 愈伤组织愈伤组织排列疏松排列疏松高度液泡化的高度液泡化的薄壁细胞团