高二生物同步：5-3血红蛋白的提取和分离人教版选修I44张ppt课件

1、热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 课题课题3血红蛋白的提取和分别血红蛋白的提取和分别热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 课程规范课程规范尝试蛋白质的提取和分别。尝试蛋白质的提取和分别。课标解读课标解读1.知道凝胶色谱法、电泳法等分别生物大分子技术的根本原理。知道凝胶色谱法、电泳法等分别生物大

2、分子技术的根本原理。2.掌握血红蛋白提取和分别的根本过程。掌握血红蛋白提取和分别的根本过程。 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 1凝胶色谱法凝胶色谱法(1)概念概念也称做也称做 ，是根据，是根据分别蛋白分别蛋白质的有效方法。质的有效方法。(2)原理原理由由 构成的凝胶，内部有许多贯穿的构成的凝胶，内部有许多贯穿的 。血红蛋白提取和分别的根本原理血红蛋白提取和分别的根本原理 分配色谱法分配色谱法相对分子质量的大小相对分子质量的大小多孔球体多孔球体通道通道热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂

3、互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 当当 不同的蛋白质经过凝胶时，相对分子质量不同的蛋白质经过凝胶时，相对分子质量 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程 ，挪动速，挪动速度度 ，而相对分子质量，而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在的通道，只能在 挪动，路程挪动，路程 ，挪动速度，挪动速度 ，从而使相对分子质量不同的蛋白质分子得以从而使相对分子质量不同的蛋白质分子得以 。相对分子质量相对分子质量较小较小较长较长较慢较慢较大较大凝胶外部凝胶外部较短较短较快较快分别分别热点考向示例热点

4、考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 2缓冲溶液缓冲溶液(1)作用作用在一定范围内，抵抗外界的在一定范围内，抵抗外界的 对溶液对溶液pH的影响，维持的影响，维持pH 。(2)配制配制由由12种种 溶解于水中配制而成，经过溶解于水中配制而成，经过 就可以得到在不同就可以得到在不同pH范围内运用的缓冲液。范围内运用的缓冲液。酸和碱酸和碱根本不变根本不变缓冲剂缓冲剂调理缓冲剂调理缓冲剂的比例的比例热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 3电泳电

5、泳(1)概念概念指指 在电场的作用下发生在电场的作用下发生 的过程。的过程。 (2)原理原理在一定的在一定的 下，多肽、核酸等生物大分子的可解离基团会下，多肽、核酸等生物大分子的可解离基团会带上带上 或或 ，在电场的作用下，这些带电分子会向着，在电场的作用下，这些带电分子会向着 的电极挪动。的电极挪动。带电粒子带电粒子迁移迁移pH正电正电负电负电与其所带电荷相反与其所带电荷相反热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 (3)作用作用电泳利用了待分别样品中各种分子电泳利用了待分别样品中各种分子 的差别及分子本身的

6、差别及分子本身的的 、 的不同，使带电分子产生不同的的不同，使带电分子产生不同的 ，从而，从而实现样品中实现样品中 。(4)方法方法常用的电泳方法有常用的电泳方法有 和和 。测定蛋白质分子量时通常运用测定蛋白质分子量时通常运用 。带电性质带电性质大小大小外形外形迁移速度迁移速度各种分子的分别各种分子的分别琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思想激活思想激活1 凝胶色谱法和电泳法在实现分子分别的原理方面

7、有何凝胶色谱法和电泳法在实现分子分别的原理方面有何不同？不同？提示凝胶色谱法分别分子是根据分子质量大小，利用凝胶色谱提示凝胶色谱法分别分子是根据分子质量大小，利用凝胶色谱柱使大分子优先洗脱出来，而小分子后分别出来。电泳法分别分柱使大分子优先洗脱出来，而小分子后分别出来。电泳法分别分子那么是根据各种分子带电性质的差别，以及分子本身的大小，子那么是根据各种分子带电性质的差别，以及分子本身的大小，外形不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实如今电场中外形不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实如今电场中将各种分子分别。将各种分子分别。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课

8、堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 蛋白质分别的根据蛋白质分别的根据蛋白质各种特性的差别，如分子的外形和大小、所带电荷的性质蛋白质各种特性的差别，如分子的外形和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来分别不同种类的蛋白质。分别不同种类的蛋白质。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 (1)凝胶色谱法凝胶色谱法相对分相对分子质量子质量直径大小直径大小运动方式运动方式运动运动速度速度运动运动路程

9、路程洗脱洗脱次序次序大大大于凝胶颗粒大于凝胶颗粒空隙直径、被空隙直径、被排阻在外面排阻在外面垂直向垂直向下挪动下挪动较快较快较短较短先从凝先从凝胶柱洗胶柱洗脱出来脱出来小小小于凝胶颗粒小于凝胶颗粒空隙直径，可以空隙直径，可以进入颗粒内部进入颗粒内部垂直向下移垂直向下移动，无规那动，无规那么么分散进入凝分散进入凝胶颗粒胶颗粒较慢较慢较长较长后从凝后从凝胶柱洗胶柱洗脱出来脱出来热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 (2)电泳法电泳法含义：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。含义：带电粒子在电场的作用下发生迁移

10、的过程。原理：一些生物大分子具有可解离的基团，在一定原理：一些生物大分子具有可解离的基团，在一定pH下，会带下，会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极挪动。因各种分子带电性质的差别以及分子本身电荷相反的电极挪动。因各种分子带电性质的差别以及分子本身的大小、外形不同，迁移速度不同，从而实现各种分子的分别。的大小、外形不同，迁移速度不同，从而实现各种分子的分别。常用方法：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。在测定蛋常用方法：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。在测定蛋白质的相对分子质量时，通常运用白质的相对

11、分子质量时，通常运用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳，聚丙烯酰胺凝胶电泳，此方法也可用来分别蛋白质混合组分此方法也可用来分别蛋白质混合组分(亚基亚基)。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 【稳定【稳定1】 凝胶色谱法分别蛋白质的原理根据是凝胶色谱法分别蛋白质的原理根据是()。A根据蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小根据蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小B根据蛋白质相对分子质量的大小根据蛋白质相对分子质量的大小C根据蛋白质所带电荷的多少根据蛋白质所带电荷的多少D根据蛋白质溶解度的大小根据蛋白质溶解度的大小解析凝胶色谱法所用

12、的凝胶实践上是一些微小多孔的球体，解析凝胶色谱法所用的凝胶实践上是一些微小多孔的球体，在小球内部有许多贯穿的通道，相对分子质量小的蛋白质容易在小球内部有许多贯穿的通道，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，挪动速度较慢；相对分子质进入凝胶内部的通道，路程较长，挪动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部挪动，路程较短，挪动速度较量较大的蛋白质只能在凝胶外部挪动，路程较短，挪动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别。快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别。答案答案B热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教

13、科书问题解答活页规范训练活页规范训练 1蛋白质的提取和分别普通分为四步：蛋白质的提取和分别普通分为四步： 、 、 和和 。2样品处置样品处置(1)红细胞的洗涤红细胞的洗涤采集血样，采集血样， ，汲取血浆后加，汲取血浆后加 洗涤，再洗涤，再低速短时间离心，如此反复洗涤三次，直至上清液中没有黄色。低速短时间离心，如此反复洗涤三次，直至上清液中没有黄色。目的是目的是 ，以利于后续步骤的分别纯化。，以利于后续步骤的分别纯化。血红蛋白提取和分别的实验操作与评价血红蛋白提取和分别的实验操作与评价 样品处置样品处置粗分别粗分别纯化纯化纯度鉴定纯度鉴定低速短时间离心低速短时间离心生理盐水生理盐水除去杂质除去杂

14、质热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 (2)血红蛋白的释放血红蛋白的释放将洗涤好的红细胞依次参与将洗涤好的红细胞依次参与 至原血液体积、至原血液体积、40%体积的体积的 ，置于磁力搅拌器上搅拌，置于磁力搅拌器上搅拌10 min，使红细胞吸水，使红细胞吸水 ，血，血红蛋白释放出来。红蛋白释放出来。(3)分别血红蛋白溶液分别血红蛋白溶液将搅拌好的混合液转移到将搅拌好的混合液转移到 中，以中，以2 000 r/min的速度的速度 10 min。使血红蛋白和其他杂质别分开，便于下一步对血红蛋白的纯。使血红蛋白和其

15、他杂质别分开，便于下一步对血红蛋白的纯化。化。蒸馏水蒸馏水甲苯甲苯涨破涨破离心管离心管离心离心热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 (4)透析透析取取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300 mL的物质的量浓度为的物质的量浓度为20 mmol/L的的 中中(pH为为7.0)，透析，透析12 h(以除去样品中相对分子质量较小的杂质以除去样品中相对分子质量较小的杂质)。3凝胶色谱操作凝胶色谱操作(1)凝胶色谱柱的制造：预备资料凝胶色谱柱的制造：预备资

16、料加工橡皮塞加工橡皮塞安装安装 。(2)凝胶色谱柱的装填。凝胶色谱柱的装填。(3)样品的样品的 。磷酸缓冲液磷酸缓冲液色谱柱色谱柱参与和洗脱参与和洗脱热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 4操作提示操作提示(1)红细胞的洗涤红细胞的洗涤 、 与与 非常重要。洗涤次数过少，非常重要。洗涤次数过少，无法除去无法除去 ；离心速度；离心速度 和时间和时间 会使会使 等一同沉淀，达不到分别效果。等一同沉淀，达不到分别效果。(2)色谱柱填料的处置色谱柱填料的处置商品凝胶运用前需直接放在商品凝胶运用前需直接放在 中膨胀，

17、可以将参与其中中膨胀，可以将参与其中的湿凝胶的湿凝胶 ，加速膨胀。，加速膨胀。洗涤次数洗涤次数离心速度离心速度离心时间离心时间血浆蛋白血浆蛋白过高过高过长过长白细胞白细胞洗脱液洗脱液用沸水浴加热用沸水浴加热热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 (3)凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的装填在装填凝胶柱时，不得有在装填凝胶柱时，不得有 存在。因其能搅乱洗脱液中蛋白存在。因其能搅乱洗脱液中蛋白质的质的 ，降低分别效果。，降低分别效果。(4)蛋白质的分别蛋白质的分别假设假设 ，阐明色谱柱制造胜利。，阐明色谱柱制造胜利。气

18、泡气泡洗脱次序洗脱次序红色区带均匀一致地挪动红色区带均匀一致地挪动热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思想激活思想激活2 透析的目的是什么？根据了什么原理？透析的目的是什么？根据了什么原理？提示透析的目的在于去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的提示透析的目的在于去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的蛋白质，透析根据的原理是半透膜只允许小分子透过，不允许大蛋白质，透析根据的原理是半透膜只允许小分子透过，不允许大分子透过。分子透过。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问

19、题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 1样品的处置样品的处置(1)红细胞的洗涤红细胞的洗涤目的：去除杂蛋白。目的：去除杂蛋白。方法方法a采集血样采集血样b.低速短时间离心低速短时间离心c.汲取血浆汲取血浆d.盐水洗涤盐水洗涤e.低速离心低速离心反复反复d、e步骤三次。步骤三次。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 (2)血红蛋白的释放血红蛋白的释放红细胞在蒸馏水和甲苯的作用下破裂，释放出血红蛋白。红细胞在蒸馏水和甲苯的作用下破裂，释放出血红蛋白。(3)分别血红蛋白溶液分别血红蛋白溶液将混合液进展离心

20、后，会明显看到试管中的溶液的分层情况将混合液进展离心后，会明显看到试管中的溶液的分层情况(从从上往下上往下)：第：第1层：无色透明的甲苯层；第层：无色透明的甲苯层；第2层：脂溶性物质的沉淀层：脂溶性物质的沉淀层层白色薄层固体；第白色薄层固体；第3层：血红蛋白的水溶液层：血红蛋白的水溶液红色透明液红色透明液体；第体；第4层：其他杂质的暗红色沉淀物。层：其他杂质的暗红色沉淀物。将液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片将液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。刻后，分出下层的红色透明液体。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动

21、探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 目的：经过离心使血红蛋白和其他杂质别分开来，便于下一步目的：经过离心使血红蛋白和其他杂质别分开来，便于下一步对血红蛋白的纯化。对血红蛋白的纯化。(4)透析透析原理：透析袋能使小分子自在进出，而将大分子保管在袋内。原理：透析袋能使小分子自在进出，而将大分子保管在袋内。过程：取过程：取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有有300 mL的物质的量浓度为的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液中的磷酸缓冲液中(pH为为7.0)，透析透析12 h。目的：目的：a.除去样品

22、中相对分子质量较小的杂质；除去样品中相对分子质量较小的杂质；b用于改换样品的缓冲液。用于改换样品的缓冲液。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 2凝胶色谱操作凝胶色谱操作热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 3纯度鉴定纯度鉴定SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳判别纯化的蛋白质能否到达要求，需求进展蛋白质纯度的鉴定。判别纯化的蛋白质能否到达要求，需求进展蛋白质纯度的鉴定。鉴定的方法中，运用最多的是鉴定的方法中，运用

23、最多的是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 4结果分析与评价结果分析与评价热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 血红蛋白血红蛋白的分别的分别血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随洗脱血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随洗脱液缓慢流出液缓慢流出分别胜利分别胜利血红蛋白的红色区带歪曲、散乱、变宽血红蛋白的红色区带歪曲、散乱、变宽分别效分别效果不好，能够与凝胶色谱柱的装填有关果

24、不好，能够与凝胶色谱柱的装填有关热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 特别提示特别提示SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量，是根据大多数蛋白质都能与阴离子外表活性剂十二烷基硫酸量，是根据大多数蛋白质都能与阴离子外表活性剂十二烷基硫酸钠钠(SDS)按分量比结合成复合物，使蛋白质分子所带的负电荷远远按分量比结合成复合物，使蛋白质分子所带的负电荷远远超越天然蛋白质分子的负电荷，消除了不同蛋白质分子的电荷效超越天然蛋白质分子的负电荷，消除了不同蛋白质分子的电荷效应

25、，使蛋白质分子相对迁移率的大小完全取决于相对分子质量的应，使蛋白质分子相对迁移率的大小完全取决于相对分子质量的高低，因此可从知相对分子质量的规范蛋白质的对数和相对迁移高低，因此可从知相对分子质量的规范蛋白质的对数和相对迁移率所作的规范曲线中求出供试品的相对分子质量。率所作的规范曲线中求出供试品的相对分子质量。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 【稳定【稳定2】 在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处置的目的是置的目的是()。A防止血红蛋白被氧化防止血红

26、蛋白被氧化B血红蛋白是一种两性物质，需求酸中和血红蛋白是一种两性物质，需求酸中和C磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D让血红蛋白处在稳定的让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其构造和功能范围内，维持其构造和功能解析利用磷酸缓冲液模拟细胞内的解析利用磷酸缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白环境，保证血红蛋白的正常构造和功能，便于分别察看的正常构造和功能，便于分别察看(红色红色)和研讨和研讨(活性活性)。答案答案D热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 【例【例1】 以下图中

27、，可表示为相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中以下图中，可表示为相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的挪动过程的是的挪动过程的是()。血红蛋白提取和分别的根本原理血红蛋白提取和分别的根本原理 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思想导图：思想导图：深度分析此题调查凝胶色谱法原理。根据分子筛效应可知，相深度分析此题调查凝胶色谱法原理。根据分子筛效应可知，相对分子质量较大的蛋白质分子经过的路程较短，挪动速度较快；对分子质量较大的蛋白质分子经过的路程较短，挪动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子经过的路程较长，挪动速

28、度较慢。相对分子质量较小的蛋白质分子经过的路程较长，挪动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量最小的分子最后流出，应选最小的分子最后流出，应选B。答案答案B热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 特别提示血红蛋白的分别方法及相关原理比较：特别提示血红蛋白的分别方法及相关原理比较：方法方法原理原理凝胶色谱法凝胶色谱法根据相对分子质量的大小分别蛋白质根据相对分子质量的大小分别蛋白质电泳法电泳法根据各种分子带电性质的差别以及分子根据

29、各种分子带电性质的差别以及分子本身大小、外形的不同进展分别本身大小、外形的不同进展分别热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 【例【例2】 以下图是用除去以下图是用除去DNA的滤液进展血红蛋白的提取和分别的滤液进展血红蛋白的提取和分别实验的安装，以下有关表达不正确的选项是实验的安装，以下有关表达不正确的选项是()。血红蛋白提取和分别的实验操作血红蛋白提取和分别的实验操作 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 A首先用图甲安

30、装对滤液进展处置，其目的是去除相对分子质首先用图甲安装对滤液进展处置，其目的是去除相对分子质量较小的杂质量较小的杂质B图乙安装的试管中搜集到的液体中最先出现的是相对分子质量图乙安装的试管中搜集到的液体中最先出现的是相对分子质量较小的蛋白质较小的蛋白质C用图乙安装分别血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底用图乙安装分别血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管搜集流出液，每管搜集端时，用试管搜集流出液，每管搜集5 mL，延续搜集，延续搜集D图丙安装中电泳法分别提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有图丙安装中电泳法分别提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极挪动一定量的

31、电荷，在电场的作用下向一极挪动热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 思想导图：思想导图：深度分析用图甲安装对滤液进展处置，其目的是去除相对分子深度分析用图甲安装对滤液进展处置，其目的是去除相对分子质量较小的杂质。图乙安装表示经过凝胶色谱法分别蛋白质的过质量较小的杂质。图乙安装表示经过凝胶色谱法分别蛋白质的过程。蛋白质的相对分子质量较大，被排阻在凝胶颗粒的外面，在程。蛋白质的相对分子质量较大，被排阻在凝胶颗粒的外面，在颗粒之间迅速经过。颗粒之间迅速经过。答案答案B热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检

32、测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 归纳整合归纳整合蛋白质的提取和分别蛋白质的提取和分别步骤步骤操作操作样品处置样品处置经过红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分别血红蛋经过红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分别血红蛋白溶液等操作搜集到血红蛋白溶液白溶液等操作搜集到血红蛋白溶液粗分别粗分别经过透析法去除血红蛋白溶液中的相对分子质量较经过透析法去除血红蛋白溶液中的相对分子质量较小的杂质小的杂质纯化纯化经过凝胶色谱法分别相对分子质量不同的蛋白质经过凝胶色谱法分别相对分子质量不同的蛋白质纯度鉴定纯度鉴定SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳判别纯化的蛋白质能否到聚丙烯酰胺凝胶电泳

33、判别纯化的蛋白质能否到达要求达要求热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 单击此处进入单击此处进入 随堂达标检测随堂达标检测热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 旁栏思索题旁栏思索题他能从凝胶色谱的分别原理分析为什么凝胶的装填要严密、他能从凝胶色谱的分别原理分析为什么凝胶的装填要严密、均匀吗？均匀吗？答案凝胶实践上是一些微小的多孔球体，小球体内部有许答案凝胶实践上是一些微小的多孔球体，小球体内部有许多贯穿的通道。相对分子质

34、量较大的蛋白质不能进入凝胶颗粒内多贯穿的通道。相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，经过的路程较短，挪动速度较快；相部，只能分布在颗粒之间，经过的路程较短，挪动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内的通道，经过的路程较对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内的通道，经过的路程较长，挪动速度较慢。长，挪动速度较慢。 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量中等的分子后

35、流出，相对分子质量最小的分子最后流出，从而使中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，从而使各种相对分子质量不同的分子得以分别。假设凝胶装填得不够严各种相对分子质量不同的分子得以分别。假设凝胶装填得不够严密、均匀，就会在色谱柱内构成无效的空隙，使本该进入凝胶内密、均匀，就会在色谱柱内构成无效的空隙，使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中经过，搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次部的样品分子从这些空隙中经过，搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，影响分别的效果。序，影响分别的效果。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练

36、 练习练习1解析此题调查凝胶色谱法分别蛋白质的原理。该方法的解析此题调查凝胶色谱法分别蛋白质的原理。该方法的原理的中心是利用了不同体积原理的中心是利用了不同体积(大小大小)的蛋白质在凝胶中的迁移速度的蛋白质在凝胶中的迁移速度不同以到达分别的目的。不同以到达分别的目的。答案凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据相对分子质答案凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据相对分子质量的大小分别蛋白质的有效方法。所用的凝胶实践上是一些微小量的大小分别蛋白质的有效方法。所用的凝胶实践上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球体的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球体内部有许

37、多贯穿的通道，当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流内部有许多贯穿的通道，当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流经时，各分子在色谱柱内进展两种不同的运动，即垂直向下的运经时，各分子在色谱柱内进展两种不同的运动，即垂直向下的运动和无规那么的分散运动。动和无规那么的分散运动。 热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，经过的路程较短，挪动速度较快；相对分子质量布在颗粒之间，经过的路程较短，挪动速度较

38、快；相对分子质量较小的蛋白质分子容易进入凝胶内的通道，经过的路程较长，挪较小的蛋白质分子容易进入凝胶内的通道，经过的路程较长，挪动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，这种景象又叫分子筛景象。此外，凝胶本身具有三维网状流出，这种景象又叫分子筛景象。此外，凝胶本身具有三维网状构造，相对分子质量大的分子经过这种网状构造上的空隙时阻力构造，相对分子质量大的分子经过这种网状构造上的空隙时阻力大，而相对分子质量小的分

39、子经过时阻力小，因此不同相对分子大，而相对分子质量小的分子经过时阻力小，因此不同相对分子质量的蛋白质分子可以获得分别。质量的蛋白质分子可以获得分别。热点考向示例热点考向示例随堂达标检测随堂达标检测课堂互动探究课堂互动探究教科书问题解答教科书问题解答活页规范训练活页规范训练 2答案在一定范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加答案在一定范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液稀释不引起溶液pH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。作用的溶液叫做缓冲溶液。缓冲溶液通常是由一或两种化合物缓冲溶液通常是由一或两种化合物(缓冲剂缓冲剂)溶解于水中制得，溶解于水中制得，调理缓冲剂的配比就可制得不同调理缓冲剂的配比就可制得不同pH范围的缓冲液。缓冲溶液的作范围的缓冲液。缓冲溶液的作用是维持反响体系的用是维持反响体系的pH不变。在生物体内进展的各种生物化学过不变。在生物体内进展的各种生物化学过程都是在准确的程都是在准确的pH下进展的，遭到氢离子浓度的严风格控。为了下进展的，遭到氢离子浓度的严风格控。为了在实验室条件下准确地模拟生物体内的环