一轮复习浙科版基因工程-单元测试

1、基因工程？单元测试学校:姓名： 班级： 考号： 一、选择题1 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是（） 将毒素蛋白注射到棉受精卵中 将编码毒素蛋白的 DNA序列，注射到棉受精卵中 将编码毒素蛋白的 DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 将编码毒素蛋白的 DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并 进入受精卵A. B. C. D.【答案】C【解析】试题分析：导入受体细胞的是目的基因，不是目的蛋白， 错。目的基因必须与运载体形成重组载体，才能导入受体细胞， 错。目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法导入植物体细胞，再通过组织培养技术培养为

2、具有目的性状的植株，正确。也可以将目的基因导入受精卵，发育为具有目的性状植株，即花粉管通道法，正确。综上所述，C正确。考点：基因工程步骤【名师点睛】目的基因导入常用方法植物：农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法；动物：显微注射法；微生物：感受态细胞法。2 切取人的生长激素基因，用显微注射技术将它们注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是A. 基因突变：DNA RNA蛋白质B. 基因工程： RNA RNA蛋白质C. 细胞工程：DNA RNA蛋白质D. 基因重组：DNA RNA蛋白质【答案】D【解析】根据题意分析可知：牛的生长激素基因和人的生长激素基因转入小鼠 的受精卵中，在

3、小鼠的个体发育过程中产生了生长激素，调节其发育成“超 级鼠”，说明生长激素基因能在小鼠体内通过转录和翻译进行表达，产生了 生长激素.因此，此项技术遵循的原理是基因重组及DNA RNA蛋白质。【考点定位】基因工程的原理及技术、遗传信息的转录和翻译【名师点睛】 基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA 重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产 品。3 抗菌肽对治疗癌症有一定作用，下图表示抗菌肽合成过程。 相关说法不正确的是（）A. 用PCF克隆目的基因不需要 DNA解旋酶B. 基因表达载体包含起始密码和终止密码C. 用显微注射法导入基因表达载体D. 筛

4、选菌种时用基因探针检测相关蛋白质【答案】BCD【解析】试题分析：利用PCR技术扩增目的基因片段时，不需要解旋酶，而是采用高温的方法使DNA解旋，故A正确；基因表达载体包括启动子和终止子，但不包括起始密码和终止密 码，故B错误；目的基因导入微生物细胞中不使用显微注射法，故C错误；筛选菌种时，用基因探针检测目的基因或转录出的mRNA故D错误。考点：本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点， 把握知识间的内在联系的能力。4 某病毒的基因组为双链DNA其一条链上的局部序列为 ACGCAT以该链的互补链为模板转录出相应的 mRNA后者又在宿主细胞中逆转录成单链DNA（称为cD

5、NA。由这条cDNA链为模板复制出的 DNA单链上，相应的局部序列应为A. ACGCATB. ATGCGTC. TACGCAD. TGCGTA【答案】 A【解析】试题分析：根据题意,以模板链转录出的mRNA与模板链碱基互补，而逆转录出的单链DNA也与mRNA碱基互补配对，因此 cDNA的碱基序列与模板 DNA链相同，即ACGCAT故 A正确。考点：本题考查中心法则的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间 的内在联系的能力。5 绿色荧光蛋白（简称GFP）含有1条多肽链，由238个氨基酸组成，能发出绿色荧光。下列有关GFP的叙述不正确的是（）A. 在控制GFP合成的基因中，脱氧核苷酸

6、的数量应该大于1 428个B. 合成GFP的转录过程需要RNA聚合酶和游离的脱氧核苷酸等参与C. 将GFP整合到胚胎干细胞中，可用于胚胎发育中细胞的标记与定位D. 转入GFP基因的植物细胞能发出荧光说明该基因能在植物细胞中成功表达【答案】 B【解析】试题分析：在基因控制蛋白质合成过程中，基因中的脱氧核苷酸数：mRNA中的核糖核苷酸数：蛋白质中氨基酸数= 6 : 3 ： 1,该计算公式中没有包含 mRNA中的终止密码子内 的核糖核苷酸数，也没有考虑基因结构中的非编码序列中的脱氧核苷酸数，因此，在控 制GFP合成的基因中，脱氧核苷酸的数量应该大于238X 3X 2= 1428（个），A项正确；转录

7、过程的产物是 mRNA需要RNA聚合酶和游离的核糖核苷酸等参与，B项错误；将GFP整合到胚胎干细胞中，可用于胚胎发育中细胞的标记与定位，C项正确；转入 GFP基因的植物细胞能发出荧光说明该基因能在植物细胞中成功表达，D项正确。考点：本题考查 GFP基因表达的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知 识间的内在联系的能力。6.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是（）A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶的运载体B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C. 选用的细菌为重组质粒受体细胞，是因为质粒易进人细菌细胞且繁殖快D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达【答案

8、】 C【解析】试题分析：基因工程又叫 DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通 过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需 要的新的生物类型和生物产品。常用的运载体是质粒，不是酶，所以重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶，所以 A不正确；限制酶能够识别双链 DNA分子的某种特定 核苷酸序列, 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,而不是试卷第 2页,总 12 页只能识别同一种特定的核苷酸序列，所以B 不正确；细菌繁殖快，容易培养，常被选用重组质粒的受体细胞， 所以 C 正确； 目的基因进入了受体细胞不一定就能成功地实

9、现表 达，还需要检测和筛选，所以D不正确。考点：本题考察基因工程的相关知识，以基因工程技术为背景，考查学生从材料中获取 信息的能力和对知识的理解迁移能力。7下列各项中，说明目的基因完成了表达的是A. 棉株中含有杀虫蛋白基因B. 大肠杆菌中具有胰岛素基因C. 酵母菌中产生了干扰素D. 抗病毒基因导入土豆细胞中【答案】 C【解析】 试题分析：基因表达最终是合成了蛋白质，含有基因不一定能翻译成蛋白质，故A.B.D错误，产生了干扰素是蛋白质，故C正确。考点：本题考查基因表达相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。 8下列关于生物工程的叙述中，不正确的是()A. 动物细胞培养可用于检测污水中致癌或

10、致畸物质的毒性B. 标记基因可用于检测目的基因是否已导入受体细胞C. 选择培养基可用于筛选单克隆杂交瘤细胞D. DNA探针可用于检测白化病和女性性腺发育不良【答案】 D【解析】试题分析： 动物细胞培养可用于检测污水中致癌或致畸物质的毒性，根据癌变或畸形的细胞所占的比例来判断毒性大小，故A正确；标记基因可以用于目的基因的检测与鉴定，故B正确；选择培养基可用于筛选单克隆杂交瘤细胞，故C正确；白化病为单基因遗传病可以用DNA探针检测，但性腺发育不良属于染色体数目变异，不能用DNA探针检测，可以用显微镜观察的方法检测，故D错误。考点：本题考查基因工程、细胞工程的应用的有关知识，意在考查考生识记能力和理

11、解 所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；理论联系实际，综合运用所学知识解 决自然界和社会生活中的一些生物学问题。9下列关于基因工程技术的叙述中，错误的是A. 实现了物种间的 DNA重组B. 全过程都在细胞外进行C. 可定向地改造生物的遗传性状D. 可能通过对天然基因库的影响对生物圈的稳态带来不利【答案】 B【解析】基因工程中可以将物种间的 DNA 重组，如苏云金芽孢杆菌的一种毒蛋白质基 因可以与质粒重组， 之后导入到棉花的受精卵中， 成功地培育出抗棉铃虫的转基因抗虫 棉，A正确；重组DNA需要在体外进行，但目的基因的表达是在细胞内进行，B错误；基因工程可以定向改造生物，使生物获的新的遗

12、传性状或能表达所需产物，C正确；基因工程可能会引发一些安全性问题，对生物圈的稳态不利，D正确。【考点定位】基因工程的原理及技术 10下列关于基因工程的叙述中，错误的是 ( )A. 首先要提取目的基因，然后要让目的基因与运载体结合B. 一般用同一种限制性内切酶切割质粒和获取目的基因C. 目的基因导入受体细胞后可以随着受体细胞的繁殖而复制D. 目的基因在受体细胞中可以表达出自然界不存在的蛋白质【答案】 D【解析】试题分析： 目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因， 所以它表达的基因是自然界中存 在的蛋白质。考点：本题考查基因工程的操作。 11下列关于生物技术的安全性和伦理问题的分析，不合理的观点是A

13、. 设计试管婴儿技术可广泛用于设计婴儿性别B. 我国的政策是禁止进行生殖性克隆人C. 禁止运用基因重组技术将致病菌等改造成生物武器D. 转基因生物合成的某些蛋白质可能成为某些人的过敏源【答案】 A【解析】试题分析：设计试管婴儿技术不能用于设计婴儿性别，A 错误；克隆技术还不成熟，且克隆人会带来社会伦理问题等，所以我国反对生殖性克隆，但不反对治疗性克隆，B正确；转基因技术如果被用于军事，制造出生物武器，那将是对人类社会极大的威胁，一 些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒，C.D正确。考点：本题考查生物技术的安全性和伦理问题的知识。 意在考查能理解所学知识的要点， 把握知识间的内在联系

14、的能力。12. 各种育种方法或技术都有其优劣之处，下列相关叙述不正确的是A. 传统的选择育种方法周期长，可选择的范围有限B. 通过人工诱变，人们有目的地选育新品种，能避免育种的盲目性C. 杂交育种难以将不同物种的优良基因集中在一起D. 基因工程可以实现基因在不同物种之间的转移，人们可以定向选育新品种【答案】 B【解析】试题分析：传统的育种方法周期长， 尤其是杂交育种，而且可选择的范围有限，A正确； 通过人工诱变，人们有目的地选育新品种，但基因突变是不定向的，仍存在盲目性，B错误；传统的育种方法是杂交育种，只限于能进行有性生殖的同种生物，不同物种之间 存在生殖隔离， 所以难以通过杂交育种将不同物

15、种的优良基因集中在一起，所以该育种方法可选择的范围有限，C正确；基因工程又叫 DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从 而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，D正确。考点：生物育种13. 下列措施中不能获得较多个体的是( )A. 超数排卵处理B.转基因技术C.植物组织培养技术D .胚胎分割技术【答案】 B【解析】转基因技术仅仅改变了细胞的基因组成，而不增加个体数量。超数排卵可以增 加卵细胞的数量从而增加受精卵的数量， 最后达到个体增加的目的。 植物组织培养用来 快速繁殖个体，可以增加个体数量。胚胎分割移植可以

16、增加胚胎的数量，从而增加个体 数量。14. 2008 年诺贝尔化学奖授予了 “发现和发展了水母绿色荧光蛋白 ”的三位科学家。 将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内， 表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。 绿色荧光蛋白在该研究中的主要作 用是( )A. 追踪目的基因在细胞内的复制过程B. 追踪目的基因插入到染色体上的位置C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D. 追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构试卷第 4页，总 12 页【答案】C【解析】将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的

17、蛋白质带有绿色荧光 ，从而可以追踪目的基因编码的 蛋白质在细胞内的分布，故C正确。目的基因本身并不带绿色荧光 ，无法直接追踪、检测。15 .下列关于DNA连接酶的作用叙述正确的是（）A. 将单个核苷酸加到某个 DNA片段末端，形成磷酸二酯键B. 将断开的两个 DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C. 连接两条DNA链上碱基之间的氢键D. 只能将双链 DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能连接任意两个DNA片段【答案】【解析】试题分析：DNA连接酶能够连接两个 DNA片段之间的磷酸二酯键，A错误；将单个核苷酸逐个追加到某 DNA片段末端的酶是 DNA聚合酶，B错误；DNA连接酶连接的是

18、DNA片 段之间的磷酸二酯键，C错误；DNA连接酶只能将双链 DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能连接任意两个 DNA片段，D正确.考点：本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。16 . DNA连接酶和限制酶分别作用于图中的【解析】试题分析：DNA连接酶连接DNA片段，作用于磷酸二酯键，限制酶可切割DNA分子，也作用于磷酸二酯键。图中为磷酸二酯键。考点：本题考查酶相关知识，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。17 .下列关于基因工程中有关酶的叙述不正确的是（）A. 限制酶水解相邻核苷酸间的化学键

19、打断DNAB. DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接C. DNA聚合酶能够从引物末端延伸DNA或 RNAD. 逆转录酶以一条 RNA为模板合成互补的DNA【答案】C【解析】试题分析：限制酶能够识别双链 DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，故A正确；DNA连接酶可以连接黏性末端相同的两个DNA片段之间的磷酸二酯键，故B正确；DNA聚合酶能够从引物末端延伸 DNA 而延生RNA勺是RNA聚合酶，故C错误；逆转录过程就是以 RNA为模板合成DNA勺过程， 该过程需要逆转录酶的催化，故D正确。考点：本题主要考查限制酶、DNA连接酶、DN

20、A聚合酶、逆转录酶等酶的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。18 .模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述。对图所示生物概念模型的分析不正确的是（）A. 若该模型表示基因工程的操作流程，则 C可表示重组质粒，D可以是细菌细胞B. 若该模型表示体外受精技术，则A B其中之一表示获能的精子C. 若A B表示培养液和胚胎干细胞，则 CD的传代培养过程中有可能出现分化现象D. 若该模型表示核移植技术，则3D过程一定与胚胎分割和胚胎移植技术有关【答案】D【解析】试题分析：若该模型表示基因工程的操作流程，则A和B是目的基因和运载体， C表示重

21、组质粒，D是受体细胞，受体细胞可以是动物细胞、植物细胞、细菌细胞，A正确；若该模型表示体外受精技术，体外受精是指获能的精子和成熟的卵细胞结合形成受精卵 的过程，所以 A B其中之一表示获能的精子，B正确；若 A B表示培养液和胚胎干细胞，则 SD的传代培养过程中有可能出现分化现象，C正确；如该模型表示核移植技术，则C表示重组细胞，如果是卵生生物，SD过程没有胚胎移植技术， D错误。考点：本题主要考查基因工程、细胞工程、胚胎工程等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。19.下图为DNA分子在不同酶作用下所发生的变化，图中作用过程使用酶的顺序是（ ）A. 解旋酶、

22、限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶B. DNA连接酶、限制酶、DNA聚合酶、解旋酶 C限制酶、DNA连接酶、解旋酶、DNA聚合酶D. DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶、解旋酶【答案】C【解析】本题考查目的基因的获取、构建基因表达载体、DNA复制等过程，要求考生能理解上述过程的操作要点，正确区分限制酶、DNA连接酶、解旋酶及 DNA聚合酶在相关过程中的作用。分析图形可知，图是利用限制酶切割 DNA形成黏性末端，图是利用DNA连接酶将黏 性末端连接起来，图是利用解旋酶使 DNA军开双链的过程，图是利用DNA聚合酶进 行DNA复制的过程，所以 C正确，ABD错误。【点睛】与DNA相关的六种酶的比较

23、是考试的热点，也是学生易错的知识点，现归纳整 理如下：名称作用部位作用底物作用结果限制酶磷酸二酯键DNA将DNA切成两个片段DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段将两个DNA片段连接为 一个DNA分子DNA聚合酶或热 稳定DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸将单个脱氧核苷酸依次 连接到单链末端DNA （水解）酶磷酸二酯键DNA将DNA片段水解为单个 脱氧核苷酸解旋酶碱基对之间 的氢键DNA将双链DNA分子局部解 旋为单链，形成两条长链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸将单个核糖核苷酸依次 连接到单链末端F图示意蛋白质工程20 .蛋白质工程是新崛起的一项生物工程，又称第二代基因工程。 流程，图中A、B在遗传

24、学上依次表示（）DMA仓成*| iRITJL |蛊白质折叠二维结构噩白駆工程中心法則-预期功能 *生和功能A. 转录和翻译C. 复制和转录【答案】AB. 翻译和转录D. 传递和表达试卷第13页，总12页【解析】试题分析：图中 A表示以DNA 一条链为模板，按照碱基互补配对原则，合成 RNA的过程，称为转录；B表示以mRNA为模板，合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的 过程，称为翻译。因此 A项正确，B C、D项错误。考点：本题考查蛋白质工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识 间的内在联系的能力。21 .关于下列黏性末端的描述，正确的是（）rr卜鼻A. 限制性核酸内切酶切割 DNA

25、形成时需要脱去 2个水分子B. DNA连接酶与DNA聚合酶均能作用于上述黏性末端C. 和的黏性末端不同，一定是由不同的限制性核酸内切酶切出D. 与的黏性末端相同，一定是由相同的限制性核酸内切酶切出【答案】C【解析】试题分析：限制酶切割 DNA时破坏磷酸二酯键，需要 2个水参与，故 A错；DNA连接酶 能将黏性末端连接，DNA聚合酶不能连接黏性末端，故 B错；不同的黏性末端一定是由 不同的限制酶切割的结果，但相同的黏性末端不一定是由同种限制酶切割，故C正确,D错。考点：本题主要考查限制酶的作用，意在考查考生能用文字、图表以及数学方式等多种 表达形式准确地描述生物学方面的内容的能力。22 .下列一

26、般不作为基因工程中的标记基因的是（）A. 四环素抗性基因B. 绿色荧光蛋白基因C. 产物具有颜色反应的基因D. 贮藏蛋白的基因【答案】D【解析】试题分析：四环素基因是抗性基因，可作为基因工程的标记基因，筛选重组子，故A正确；绿色荧光蛋白基因也可以用作基因工程的标记基因，故B正确；产物具有颜色反应的基因可根据颜色反应与否筛选重组子，故C正确；贮藏蛋白的基因不能用于筛选重组子，故D错.考点：本题主要考查标记基因的概念和作用，意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。23 .人的一种凝血因子的基因，含186000个碱基对，有26个外显子，25个内含子，能编码2552个氨基酸，这个基因中外显子的碱基对在

27、整个基因碱基对中所占的比例为A. 4%B. 51.76%C. 1.3%D. 25.76%【答案】 A【解析】 真核细胞的基因中，只有外显子是能编码蛋白质中氨基酸序列的碱基序列。已知能编码2552个氨基酸，而每编码一个氨基酸需要 3个碱基对，所以该基因中外显 子的碱基对数就是 2552X 3=7656个，用此数除以基因碱基对 186000个，就可得出答案。24 .基因工程的基本操作步骤如下图所示，其中甲、乙、丙表示结构，表示过 程。下列相关叙述正确的是施表这目 的墓因的丙A. 甲、乙分别表示含有抗性基因的质粒、受体细胞B. 过程表示用有抗生素的培养基筛选含目的基因的受体细胞C. 丙可以是单细胞、

28、器官、植物或动物等D. 若要使丙表达人的蛋白质，则乙是能分裂的人体细胞【答案】C【解析】甲为运载体，可能是质粒，也可能是噬菌体或动植物病毒，A错误；为筛选含有目的基因的受体细胞的过程，由于标记基因不一定是抗性基因，因此该过程不一定是用含有抗生素的培养基来筛选含目的基因的受体细胞，也可能是通过荧光标记来筛选含目的基因的受体细胞，B错误；基因工程的受体细胞可以是微生物细胞、植物细胞或动物细胞，因此丙可以是单细胞、器官、植物或动物等，C正确；若要使丙表达人的蛋白质，则乙应该是其他生物的细胞，D错误。【点睛】本题结合基因工程的基本操作过程图，考查基因工程的原理及技术，重点考查 基因工程的操作步骤，要求

29、考生识记基因工程的操作步骤，掌握各步骤中采用的方法及需要注意的细节，能准确判断图中各结构或过程的含义，再运用所学的知识准确判断各选项。25 .下列有关生物工程的叙述，正确的是A. 试管牛和克隆牛都属于无性生殖B. 蛋白质工程是直接对蛋白质分子进行改造C. 精心设计生态工程能提高各营养级的能量传递效率D. 胚胎分割获得的胚胎数量过多会降低胚胎存活率【答案】DA错误；蛋白质工程是通过【解析】试题分析：试管牛属于有性生殖，克隆牛属于无性生殖，故改造基因以对蛋白质分子进行改造，故B错误；进行设计生态工程可以提高能量的利用率，但不能提高能量的传递效率，故C错误；胚胎分割次数越多，成活率越低，故D正确。考

30、点：本题考查蛋白质工程、胚胎工程和生态工程的有关知识，意在考查考生理解所学 知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。二、综合题26 华蟾素注射液是将蟾蜍的全皮阴干后，提炼而成的中药复方制剂，是我国经典抗肿瘤药物。研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，进行了一系列实验。请根据题中信息回答下列问题。I 肝癌HepG-2细胞的培养：(1) 培养肝癌HepG-2细胞时，在培养基中加入适量的 以补充合成培养基中缺乏的物质，为防止培养过程发生污染要加入 。此外，每48h更换1次培养液,目的是。同时还要提供适宜的温度、 、氧气和二氧化碳等环境条件。n .探究华蟾素药效作用机理的实验：(

31、2) 用不同浓度的华蟾素注射液分别处理HepG-2细胞12h、24h和48h，测定华蟾素 注射液对HepG-2细胞增殖的影响，结果如下图。100I ,ti啊RT甲由图甲可知，华蟾素能有效地 肝癌HepG-2细胞增殖，且与 呈正相关。图乙的结果进一步表明，华蟾素对肝癌 HepG-2细胞增殖的影响体现在 。(3) DNA拓扑异构酶H (简称 Topon )为真核生物所必需，在DNA复制、转录、重组及形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩等方面发挥重要作用，Topon在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞。华蟾素注射液处理HepG-2细胞48h后，采用RT-PCR技术检测Topon基因的表达情况，结果如图

32、丙。0.10S0.210,4aug/mlml ug/ cnl图関RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应。其主要原理是：提取HepG-2细胞中的总RNA ,以段作为引物，在酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板进行O由图丙可知，华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是 。【答案】血清(血浆) 抗生素 防止代谢物积累对细胞自身造成危害(补充细胞所需营养物质)pH 抑制 作用时间和浓度将癌细胞阻滞在 S期 与Topon mRNA互补的单链DNA 逆转录 PCR扩增 抑制Topo n基因的转录/表达，最终导致Topon 含量降低【解析】【试题分析】1 在动物细胞培养时，所需营养物质有糖

33、、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素 等。将这些营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由 于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在使用合成培养基时，通常需 加入血清、血浆等一些天然成分。2 .逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo (dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。 RT-PCR使RNA检测的灵敏 性提高了几个数量级，使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因

34、、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。(1) 在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量动物血清，以补充合成培养基中缺乏的物质；为防止培养过程发生污染要加入一定量的抗生素；定期更换培养液的目的是清除代谢产物，防止代谢物积累对细胞自身造成危害(补充细胞所需营养物质)；同时还要提供适宜的温度、 pH氧气和二氧化碳等环境条件。(2) 分析图甲可知，随着华蟾素注射液浓度的增加和作用时间的延长，对HepG-2细胞的抑制率增大，说明华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且与作用时间和浓度呈正相关；由图乙可知，随着华蟾素注射液浓度的增加，肝癌HepG-2细胞S期细胞细胞比例增大，表明华蟾素对肝

35、癌HepG-2细胞增殖的影响体现在将癌细胞阻滞在S期。(3) RT-PCR主要原理是：提取 HepG-2细胞中的总 RNA ,以一段与TopoH mRNA 互补的单链 DNA作为引物，在逆转录酶的作用下合成 cDNA，再以cDNA为模板进行 PCR扩增。由图丙可知，华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是抑制 TopoH基因的转录/表达，最终导致 TopoH含量降低。27 .图示为应用生物工程获得人们需要的生物新品种或新产品的方案。请回答下列问题：方案1 J抗虫基因旦*郴花受休细胞一抗虫棉方案1 : prG基因戈厘免疫过的吕细胞一休外培养一单克隆抗休方案m :抗血栓基因也山羊受

36、辂卵早期胚胎貓受体母羊一抗血栓山羊(1) 方案I中，通常利用Ti质粒将抗虫基因导入棉花受体细胞，为了使抗虫基因顺利连接到受体染色体基因组中，抗虫基因通常位于Ti质粒的片段中。从分子水平检测抗虫棉是否培育成功的方法是： 。(2) 推测方案H中 prG基因最可能的作用是 。(3) 方案川中的转抗血栓基因山羊可以通过分泌乳汁来生产抗血栓药物。在构建的相应基因表达载体中，抗血栓基因的首端必须含有使其仅能在山羊 细胞中特异性表达的 ,人们通常将此类转基因动物称为(4)方案川中的早期胚胎在移植入受体母羊子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定，一 般是取处于 时期的细胞进行检测。【答案】(1) T-DNA 抗原-

37、抗体杂交法(2) 调控细胞(无限)增殖(3) 乳腺启动子乳腺生物反应器(4) 囊胚滋养层【解析】试题分析：(1) Ti质粒上有一段 DNA叫做T-DNA能进入受体细胞并且整合到受体细胞的染色体 DNA 上;从分子水平鉴定抗虫棉是否培育成功， 实际上就是检测是否翻译出相应的蛋白 质，因此所用的检测方式是抗原抗体杂交。(2) 方案二中把prG基因导入到免疫的 B细胞内，可以体外培养生产单克隆抗体。因为B淋巴细胞能产生抗体，但不能无限增殖，故prG基因应该能调控细胞的无限增殖。(3) 人们要想从乳汁中提取药物，目的基因必须与必须与乳腺蛋白基因的启动子等组件重组在一起，药用蛋白基因才会在乳腺细胞中特异

38、性表达；这类生物反应器叫做乳腺生物反应器。(4) 要想进行性别鉴定，不能破坏内细胞团细胞，因此应该选用囊胚期的滋养层细胞 进行检测。考点：本题考查基因工程、细胞工程的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知 识的要点，把握知识间的内在联系的能力。28 请回答下列与生物工程相关的问题：(1)将基因表达载体导入农杆菌中的 Ti质粒上的T-DNA上的原因是 。通过农杆菌的转化作用，使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以 。用DNA连接酶把被限制酶1(识别序列和切点是一J GAT )切割得到的运载 体和被限制酶11(识别序列和切点是-GJ GATCC切割得到的目的

39、基因连接起来 后，该重组DNA分子的新连接处能够再被限制酶II切割开的概率是 。(3)胚胎分割操作过程需要特别注意的问题是:将囊胚的内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后。体外培养动物细胞需要满足以下条件:、添加了血浆(或“血清”)的培养基、适宜温度与pH 的气体环境等。(5) 对于转基因生物，公众在 、禾口方面产生了争议。(6) 湿地具有蓄洪防旱、调节区域气候等功能，这休现了生物多样性的价值。依据生态工程的 原理，鄱阳湖自然保护区的建立需考虑周边的经济发展等相关问题。【答案】T-DNA是可以转移的DNA稳定维持和表达 7/16 胚胎的恢复和进一 步发育无菌、无毒含5%C2、95%空气食物安全

40、生物安全环境安全间 接整体性【解析】试题分析：将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一 样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目 的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(1) 农杆菌转化法的原理是：农杆菌中的Ti质粒上的T- DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T- DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中 染色体的DNA上，从而使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2) 重组DNA分子要能够再被限制酶II切割开，就应该具有识别序列和切点：-GJ GATCC -， 而题中所述切割后重组有两种情况：惜就一，-J.GAIC-GGATC C-GATC C-CTAG-C CTAGIG-CTAGG-运载体片段目的基IS片段重组DXA分子片段情况二；-；GAIC-G1GATC C-GGATC-一 CTAG7-C CTAG1G-CCTAG运载体片段目的基因片段重组D?总分子片段3情况一重组DNA片段左侧碱基不是 G的概率为，情况二重组DNA分子片段右侧碱3339