结缔组织病相关自身抗体的

1、自身免疫性疾病相关抗体的解读赵久良北京协和医院风湿免疫科弥漫性结缔组织病的特点自身免疫应答反应强度与病情密切相关组织器官病理性损伤和相应的功能障碍产生高滴度的自身抗体或与自身组织起反应的T细胞自身抗体临床意义与病情活动相关与病情活动相关抗ds-DNA抗体cANCAACL诊断特异性诊断特异性抗Sm抗体抗CCP抗体抗SSA/SSB预测预后临床亚型预测预后临床亚型抗Jo-1抗Scl-70抗rRNP器官特异性器官特异性CNS：抗rRNP抗体肺脏：抗Scl-70kDa 抗Jo-1抗体z临床上具有多种常用自身抗体提供治疗依提供治疗依据据抗体阳性，抗体阳性，无临床表现无临床表现抗体阳性与抗体阳性与特定的临床

2、事特定的临床事件件常用实验室检查方法间接免疫荧光法间接免疫荧光下不同核型ANA染色模型分析（25种）z均质型均质型H：抗DNP，dsDNA，组蛋白，核小体z斑点型斑点型S：ENAz核仁型核仁型N：SSc相关抗体，RNA多聚酶I，PM-SCl,u3nRNPz核模型核模型M：y抗核包膜蛋白抗体（gp210，板层素），部分dsDNAz着丝点型：着丝点型：ACA阳性z胞浆型：胞浆型：分裂间期细胞细胞浆颜色阳性，线粒体型，核糖体型，Jo-1型，细颗粒型z混合型抗dsDNA抗体临床意义z致病作用y在SLE患者的肾脏病变处发现了抗DNA抗体y在具有抗dsDNA抗体的人中，85%会在约5年内发展成为SLEzS

3、LE中阳性率60-90%y对于未治疗SLE患者，Sp 90%，Se 70%z抗体水平与疾病活动度相关y活动期阳性率80-100%，非活动期30%抗ENA抗体抗ENA抗体z可提取性核抗原，为核中一类蛋白质，均不含有DNA、组蛋白z可以被盐水提取zENA抗原可以从多种组织中获得，无种属间差异，但有明显的组织不均一性免疫对流电泳CIEAb Ag O | O O O O O O O O | O O | O 阳极阳极+ - 阴极 免疫双扩散(ID)已知已知Ab1:16已知已知Ab Ag1:1待测血清待测血清1:41:64 U1-RNP Sm SSA SSB双扩散法解读z免疫双扩散(ID)检测结果判断z上

4、图为抗Sm、U1-RNP抗体阳性y滴度均为1:4z下图为抗SSA、SSB抗体阳性y抗SSA抗体滴度1:64y抗SSB抗体滴度1:16免疫印迹法(WB法)与抗ENA抗体特异性结合多肽抗原表位z 抗Sm 28/29、13.5KDz 抗U1RNP 73、32、17.5KDz 抗SSA 52、60KDz 抗SSB 45、47、48KDz 抗rRNP 38、16.5、15KDz 抗Jo-1 55KDz 抗ScL-70 86、70KD免疫印迹法解读抗ENA及其临床意义z抗RNPCTD 、 MCTD、SLEz抗SmSLE 30%z抗SSA(Ro)pSS 75%、SLE 25%z抗SSB(La)pSS 40%

5、、SLE 10%z抗rRNPSLEz抗Scl-70SSc 2030%z抗Jo-1PM 30%抗ENA抗体临床意义z标记抗体y抗Sm 系统性红斑狼疮（SLE）y抗Scl-70系统性硬化症y抗SSA/SSB干燥综合征z病情活动度相关y细胞浆抗原JO-1z预测疾病预后和临床亚型y抗Jo-1皮肌炎合并肺间质病变y抗rRNP狼疮脑病特殊问题ANA18项z除外性诊断除外性诊断y对于临床不考虑CTD患者z增加项目增加项目y抗抗CENP-B抗体：抗体：ACA共包括4型，以B型为主y抗核小体抗体：抗核小体抗体：多见于活动性SLE，尤其是狼疮肾炎，可能是SLE的特异性抗体，Se 58-71%，Sp 97-99%z

6、初步筛查初步筛查y临床考虑CTD，但具体分型未明类风湿关节炎相关抗体谱z类风湿因子y灵敏度高，特异度差（63%）z抗环瓜氨酸多肽抗体CCPyELISA，79%，阳性预测值84%z抗角蛋白抗体（AKA）：IFz抗核周因子抗体（APF）：IFzMCV类风湿关节炎多关节炎-关节变形-偶见脏器累及 (肺纤维化,胸膜炎, 心包炎, 巩膜炎, 类风湿结节, 血管炎)- 30-50% RA患者在发病第一年可见关节损坏- 40%RA患者5年内病情发展导致丧失劳动力- 根据病情的严重程度，寿命缩短3 到14 年类风湿的关节损害类风湿的关节损害致畸的根源致畸的根源z 在疾病发生2年内即可发生的关节损坏，致残率高y

7、19661971 at Middlesex Hospital, London,UK. y94例病程10个5RF和抗CCP抗体均阴性（）0RF或抗CCP抗体低滴度阳性（）2RF或抗CCP抗体高滴度阳性（）3（正常上限3倍） 6周 06周 1CRP和ESR均正常 0CRP或ESR升高 1中华风湿病学杂志中华风湿病学杂志2010年年4月第月第14卷第卷第4期期类风湿关类风湿关节炎诊断及治疗指南节炎诊断及治疗指南RARA新新四项四项抗抗CCPCCP抗体抗体类风类风湿因湿因子子C C反反应蛋应蛋白白血沉血沉结果比类风湿因子更可结果比类风湿因子更可靠靠早于影像学诊断早于影像学诊断持续阳性提示骨破坏持持续阳

8、性提示骨破坏持续加重续加重持续阳性致残率极高持续阳性致残率极高（两年内（两年内70%70%）抗磷脂抗体谱z广义抗磷脂抗体谱包括：y抗心磷脂抗体：ACLy抗磷脂结合血浆蛋白抗体：x2GP1x凝血酶原（PT），蛋白C，蛋白Sx膜联蛋白 Annexin A2和A5y抗磷脂-蛋白复合物抗体x磷脂酰肌醇 anti-PI，x磷脂酰乙醇胺 anti-PEx磷脂酰丝氨酸/凝血酶原（anti-PS/PT）x波形蛋白/心磷脂复合物：anti-vimentiny狼疮抗凝物：功能性抗体，1952年发现，1972年命名狼疮抗凝物（LAC） 一种IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原复合物，阻断活化的凝血因子V与凝血

9、酶原作用，抑制纤维蛋白的形成，致使凝血时间延长 初筛试验： 活化部分凝血酶原时间(APTT) 白陶土凝血时间(KCT) 稀释蛇毒凝血时间(dRVVT) 稀释凝血酶原时间(dPT) 通过纠正试验确诊：通过纠正试验确诊：若有LA，缺乏血小板正常血清不能纠正凝血时间，只有加入过量磷脂或血小板溶解物后，延长的APTT可被纠正 需排除其他原因，如肝素、因子复合物等抗心磷脂抗体（ACL） 最先发现的抗磷脂自身抗体之一，和血小板减少有明显相关性 ACL阳性者，血小板减少3倍于ACL阴性者 习惯性流产与IgG型ACL关系密切，并可能和抗体的滴定度有关 检测方法：ELISA 目前尚无金标准 两种类型：38ACL

10、Ig类型类型与血栓形成与血栓形成常见疾病常见疾病2-GP1依赖高滴度IgG型密切相关自身免疫病、APS非2-GP1依赖低滴度IgM型不引起血栓梅毒、AIDS等感染性疾病抗2GP1抗体抗B2GP1抗体：特异度高（94.5%），灵敏度低24%结构域1=Domain I与临床价值更相关 ANCA荧光染色模型对应对应抗原抗原主要抗原:蛋白酶3 (PR3)其它抗原:BPI, AZU等主要抗原:髓过氧化物酶 (MPO) 其它抗原:HLE, LF, CG等相关疾病相关疾病 肉芽肿伴多血管炎肉芽肿伴多血管炎(GPA): (GPA): 敏感性: 73 %特异性: 99 %感染等显微镜下多血管炎显微镜下多血管炎(

11、MPA):(MPA): 敏感性: 67 %特异性: 99 %IBD, RA, SLE等ANCA阳性患者的疾病谱余洁等，中华全科医师杂志2010；9:26-30 xCTD患者如患者如RA、SLE和肌炎，和肌炎，偶可表现出偶可表现出ANCA阳性，但大多阳性，但大多是非是非MPO-ANCA, 和非和非PR3-ANCAx感染性心内膜炎、感染性心内膜炎、HIV感染，感染，偶尔会出现偶尔会出现ANCA阳性。阳性。 这有特这有特殊的临床意义，感染可以出现酷殊的临床意义，感染可以出现酷似血管炎的症状似血管炎的症状ANCA的临床意义z结合临床特征，ANCA阳性有助于诊断z单纯免疫荧光阳性意义有限zANCA阴性不能排除ANCA-相关的血管炎zANCA与疾病活动度的关