清洁残留擦拭方法学验证方案.docx

1、.1.22.23.24.35.106.QA111.w.1.1概述卡培他滨换盐酸厄洛替尼的公用设备中转罐 S3101、对接反应罐 S3102、对接浓缩罐 S3103、中转罐 S3104、萃取脱水罐 S3105、过滤器 S3109、过滤器 S3110、成品精制罐 S3107、离心机S3111、双锥真空干燥机 S3112、摇摆式颗粒机 S3113、过滤器 S3120、过滤器 S3180 共线残留为卡培他滨，公用设备清洁确认是为了检测设备清洁后， 设备直接接触药物表面的卡培他滨残留量是否符合要求，以确保设备中残留的卡培他滨不会对盐酸厄洛替尼的产品质量产生影响。设备清洁后，按照不同设备分别用擦拭法、淋洗

2、法、 TOC 进行取样。现采用模拟取样法试验确定综合回收率，以 HPLC 检测，建立卡培他滨的清洁验证样品检测法。因卡培他滨清洁验证检测法学验证报告 （QC-V-A030-00R ）中已完成了专属性、定量限、线性的项目，但卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度（11.58g/25cm 2）低于卡培他滨清洁验证检测法学验证报告 （ QC-V-A030-00R ）中的可接受限度（ 75.75 g/25cm 2 ），淋洗法可接 受 理 论 最 大 限 度 （ 0.44 g/ml ） 低 于 卡 培 他 滨清 洁 验 证 检 测 法学 验 证 报 告（ QC-V-A030-00R ）中的可接受

3、限度（ 2.8 g/ml ），现对卡培他滨换盐酸厄洛替尼公用设备清洁法验证中卡培他滨残留检测法的系统适用性、 溶液稳定性和综合回收率做验证， 考察用于公用设备上卡培他滨残留检测的分析法的可行性。卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度为11.58g/25cm 2 (10ml 全部溶解出残留后浓度为 1.158g/ml) ，淋洗法可接受理论最大限度（0.44 g/ml ），现选此限度进行模拟取样检测试验，确定擦拭法和淋洗法的回收率作为实际检测中样品浓度计算的参数。1.2 目的用以证明此法能准确的检测出卡培他滨共线设备中的残留量，为盐酸厄洛替尼及其他产品使用前清洁确认提供有效、稳定的数据。项

4、目要求系统适用性以卡培他滨主峰计理论塔板数 3000, 重复进样变异系数 RSD2.0%溶液稳定性卡培他滨主峰保留时间和主峰峰面积与0 小时相比， RSD 应 2.0% ，则溶液在 24 小时稳定残留取样及检测法的包括取样回收率和检测法回收率在的综合回收率不低于50% ，多次取综合回收率样回收率的 RSD 值不大于 20%1.3 围适用于卡培他滨换盐酸厄洛替尼公用设备清洁法中卡培他滨残留量的检测。2. 参考文件文件编号文件名称QC-SOP-S004卡培他滨标准检验操作规程3. 仪器与器皿名称型号编号生产厂家校验日期校验期校验单位w.高效液相色谱仪电子天平器皿：水浴锅、洁净的容量瓶、移液管、烧杯

5、、试剂瓶若干。4. 验证步骤4.1相关试剂乙腈色谱纯批号：来源：冰乙酸分析纯批号：来源：甲醇色谱纯批号：来源：纯化水公司自制4.2稀释液配制 (批号)水 :甲醇 :乙腈 =65:30:54.3流动相配制 ( 批号)流动相 A0.1% 乙酸 :甲醇 :乙腈 =65:30:5流动相 B0.1% 乙酸 :甲醇 :乙腈 =15:80:5洗脱梯度如下表 :时间 (min)流动相 A(%)流动相 B(%)01000510002060403050505050505110004.4 色谱条件色谱柱： C18 5m4.6mm 250mm检测波长 : 250nm柱温： 40 流速： 1.0ml/min进样量： 1

6、0lw.4.5 试验步骤4.5.1 待仪器稳定后进行操作。4.5.2擦拭法检测法验证4.5.2.1 系统适用性试验取卡培他滨工作对照品约 11.58mg，精密称定，置 100ml 容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度约为 115.8g/ml 的贮备溶液；取上述贮备溶液 1ml 置 100ml 容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得浓度约为 1.158g/ml 的对照品溶液。取稀释液和上述对照品溶液分别各进 1 针、6 针，记录色谱图，计算以卡培他滨主峰计理论塔板数、重复进样变异系数 RSD。数据与结果：卡培他滨工作对照品批号:含量 :来源：稀释液图谱序号 :系统适用性 -要求：

7、以卡培他滨主峰计理论塔板数3000 ，重复进样变异系数RSD2.0% 。图谱序号主峰面积理论塔板数平均峰面积RSD（% ）结论 :检测者及日期：复核者及日期：4.5.2.2 溶液稳定性取“ 4.5.2.1 ”项下的对照品溶液 ,立即进样，记录色谱图，作为 0 小时稳定性数据。然后隔 2、4、8、12、24 小时各进样一次，考察样品溶液 24 小时的稳定性，比较卡培他滨主峰的峰面积和保留时间。数据和结果：溶液稳定性 -要求：卡培他滨主峰的保留时间和峰面积与0 小时相比， RSD应 2.0% ，则溶液 24小时稳定。时间主峰保留时间RSD（ % ）主峰峰面积RSD（ % ）图谱序号(小时 )w.0

8、/2481224结论：检测者及日期：复核者及日期：4.5.2.3 擦拭法取样及检测法的综合回收率棉签擦拭法的取样过程需要经过验证。棉签擦拭法以卡培他滨在过滤器 S3109、过滤器 S3110、成品精制罐 S3107、离心机 S3111、双锥真空干燥机 S3112、摇摆式颗粒机 S3113、过滤器 S3120、过滤器 S3180 可接受的卡培他滨最高残留限度 11.58/25cm 2 作为模拟限量浓度，模拟棉签在不锈钢设备表面擦拭的过程，再取其样品进行检测，计算得包括取样回收率和检验法回收率在的综合回收率（ r ），作为实际检测中的样品浓度计算的参数；4.5.2.3.1 相关器具：不锈钢钢板：钢

9、板上用钢锥划出 200mm*200mm 的区域，每隔 50mm 划线，形成 16 块 50mm*50mm 的块，棉签，试管等。4.5.2.3.2 取样法(1)取 4.5.2.1 项下贮备溶液 1ml 置 10ml 容量瓶中 ,加稀释液稀释至刻度 ,摇匀 ,即得浓度约为11.58g/ml 的样品溶液。(2) 取上述样品溶液 1.0 ml 均匀分布于不锈钢板小块上， 重复 6 次 ,分布于 6 块不同的不锈钢板小块上。(3) 将不锈钢板置于通风干燥处，自然挥干。(4) 将空白的棉签用稀释液浸润后 , 将棉签靠于瓶壁上挤干后擦拭钢板， 擦拭法如图 1、2 所示，擦好后放入已加 10ml 稀释液管制瓶

10、中，管制瓶上及时贴上标签，每擦一个块（ 25cm 2）换一块擦拭棉球。图 1-1图 1-2w.（6 ）取完样的棉签分别放回管制瓶后，轻微振摇，放置数分钟，使被擦拭物质完全溶出。取其上清液为供试品溶液。按色谱条件检测供试品溶液和对照品溶液。4.5.2.3.3 进行顺序进样与计算法（1）取“ 4.5.2.1 ”项下系统适用性分析的最后 2 针的平均峰面积作为样品计算中的平均峰面积值。（2）取“ 4.5.2.3.2 ”下 6 份供试品溶液分别进样，记录色谱图,计算综合回收率。（3）取“ 4.5.2.1 ”项下的对照品溶液连续进 2 针,记录色谱图 , 计算平均峰面积 ,并与上述 (1)中最后 2 针

11、的平均峰面积比较 ,考察系统稳定性（ RSD2.0%）。（5）计算 (外标法 )供试品溶液浓度 = 供试品主峰面积对照品溶液浓度/ 对照品平均峰面积理论供试品浓度 = 样品溶液浓度 1/10回收率（ r） =( 供试品溶液浓度 / 理论供试品浓度 )100%数据与结果：卡培他滨工作对照品批号:含量 :来源：对照品溶液浓度 : g/ml对照品溶液 -要求：以卡培他滨主峰计理论塔板数3000 ，重复进样变异系数RSD2.0% 。要求：综合回收率一般不低于50%，多次取样回收率的RSD值不大于 20%。序号图谱序号主峰面积溶液浓度理论浓度回收率平均RSD(%)(g/ml)( g/ml)回收率1234

12、56结论：检测者及日期：复核者及日期：w.系统稳定性 -要求 :RSD2.0%, 系统稳定。图谱序号单值均值RSD 应 2.0%均值RSD应 2.0%/结论：系统稳定性符合要求不符合要求检测者及日期：复核者及日期：4.5.3淋洗法检测法验证4.5.3.1 系统适用性试验称取卡培他滨工作对照品约 22mg ，精密称定，置 50ml 容量瓶中， 加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度约为 440 g/ml 的贮备溶液；取上述贮备溶液 1ml 置 100ml 容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得浓度约为 4.4 g/ml 的对照品溶液；取上述对照品溶液 1ml 置 100ml 容量瓶中，加 稀

13、释液稀释至刻度，摇匀，即得浓度约为 0.44 g/ml 的对照品溶液。取上述对照品溶液进 6 针，记录色谱图，计算以卡培他滨主峰计理论塔板数、重复进样变异系数 RSD。数据与结果：卡培他滨工作对照品批号:含量:来源：系统适用性 -要求：以卡培他滨主峰计理论塔板数3000 ，重复进样变异系数RSD2.0% 。图谱序号主峰面积理论塔板数平均峰面积RSD（ % ）平均峰面积结论 :检测者及日期：复核者及日期：4.5.3.2 溶液稳定性取“ 4.5.3.1 ”项下的对照品溶液 ,立即进样，记录色谱图，作为0 小时稳定性数据。然w.后隔 2、4、8、12、24 小时各进样一次，考察样品溶液24 小时的稳

14、定性，比较卡培他滨主峰的峰面积和保留时间。数据和结果：溶液稳定性 -要求：卡培他滨主峰的保留时间和峰面积与0 小时相比， RSD 应 2.0% ，则溶液 24小时稳定。时间主峰保留时间RSD（ % ） 主峰峰面积RSD（ % ）图谱序号(小时 )0/2481224结论：检测者及日期：复核者及日期：4.5.3.3 淋洗法取样及检测法的综合回收率淋洗法的取样过程需要经过验证。淋洗法以萃取、脱水罐淋洗溶液可接受的卡培他滨最高残留浓度 0.44 g/ml 作为模拟限量浓度，模拟纯化水在不锈钢设备表面淋洗的过程， 再取其溶液进行检测， 计算得包括取样回收率和检验法回收率在的综合回收率（ r），作为实际检

15、测中的样品浓度计算的参数；4.5.3.3.1 相关器具：6 块 50mm*50mm的不锈钢块，锥形瓶，锥形玻璃漏斗等。4.5.3.3.2 取样法萃取、脱水罐的理论最大允残留：结晶罐的表面积S 为 3.82m 2，卡培他滨的最小批产量m 为 11.2kg，允残留上限 f ：1010-6。则 25cm 2 的不锈钢板上的残留限度应为： 73.30 g/25cm 2，而清洗萃取、脱水罐所用的清洁剂为纯化水，体积为 40L,因此 25cm 2 的不锈钢板所需的淋洗液体积为 26ml ，完全淋洗后淋洗溶液浓度应为 0.44 g/ml 。对萃取、脱水罐的淋洗液取样过程进行验证，萃取、脱水罐淋洗液中卡培他滨

16、最高残留限度为 0.44 g/ml ，所以 0.44 g/ml 为样品浓度，模拟对不锈钢淋洗后，取其淋洗液样品进行检测，计算得包括淋洗回收率（ r），作为实际检测中的样品浓度计算的参数。取“ 4.5.3.1 ”项下贮备溶液 1.3ml 置 50ml 容量瓶中 ,加纯化水稀释至刻度 , 摇匀 ,即得浓度约为 11.44g/ml 的样品溶液。w.移取上述样品溶液 1.0 ml 均匀分布于 25cm 2 不锈钢板小块上，重复 6 次，分布于 6 块不同的不锈钢板小块上。将不锈钢板置于通风干燥处，自然挥干。将锥形玻璃漏斗置于锥形瓶上 ,漏斗下部插于瓶中 ,再将不锈钢板小块斜置于漏斗上，有样品的一面向上

17、。吸取 26ml 纯化水淋洗有样品一面的不锈钢板小块。淋洗后淋洗溶液过滤后作为供试品溶液，按色谱条件检测供试品溶液。4.5.3.3.3 进行顺序进样与计算法（1）取“ 4.5.3.1 ”项下系统适用性分析的最后 2 针的平均峰面积作为样品计算中的平均峰面积值。（2）取“ 4.5.3.3.2 ”下 6 份供试品溶液分别进样，记录色谱图,计算综合回收率。（3）取“ 4.5.3.1 ”项下的对照品溶液连续进 2 针,记录色谱图 , 计算平均峰面积 ,并与上述 (1)中最后 2 针的平均峰面积比较 ,考察系统稳定性（ RSD2.0%）。（4）计算 (外标法 )供试品溶液浓度 = 供试品主峰面积对照品溶

18、液浓度/ 对照品平均峰面积理论供试品浓度 = 样品溶液浓度 1/26回收率（ F）=( 供试品溶液浓度 /理论供试品浓度 )100%数据与结果：对照品溶液浓度 :g/ml对照品溶液平均峰面积:要求：综合回收率一般不低于50%，多次取样回收率的RSD值不大于 20%。序号图谱序号主峰面积溶液浓度理论浓度回收率平均RSD(%)(g/ml)( g/ml)回收率123456结论：w.系统稳定性 -要求 :RSD2.0%, 系统稳定。图谱序号单值均值RSD 应 2.0%均值RSD应 2.0%/结论：系统稳定性符合要求不符合要求检测者及日期：复核者及日期：5结论色谱条件：柱子型号：流动相：稀释液：柱温：检测波长：进样体积：流速:5.1 擦拭法数据汇总项目要求检测结果以卡培他滨主峰计理论塔板数系统适用性3000, 重复进样变异系数 RSD2.0%卡培他滨主峰保留时间和主峰溶液稳定性峰面