植物组织渗透势和水势测定

1、实验四实验四 植物组织渗透势测定（质壁分离法）植物组织渗透势测定（质壁分离法）(2学学时时)目的要求目的要求 、观察植物组织在不同浓度下细胞质壁分离产生过程； 、掌握质壁分离法测定植物组织渗透势的原理。 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。代入公式即可计算出渗透势。实验一实验一 植物组织渗透势测定（质壁分离法）植物组织渗透势测定（质壁分离法）(2学学时时)实验方法实验方法 质壁分离法 实验仪器实验仪器 显微镜、载玻片及盖玻片、镊子、刀片、移液器等。 实验一实验一 植物组织渗透势测定（

2、质壁分离法）植物组织渗透势测定（质壁分离法）(2学学时时)实验操作方法实验操作方法 1、配制各种浓度的蔗糖溶液（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L） 2、剥取洋葱鳞茎外表皮（0.5cm ） 3、迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中（5-10min） 4、低倍显微镜观察并记录质壁分离的相对程度 5、确定使细胞发生初始质壁分离的（初始质壁分离的浓度）2实验一实验一 植物组织渗透势测定（质壁分离法）植物组织渗透势测定（质壁分离法）(2学时学时)6、计算渗透势 细胞渗透势 R为气体常数=0.083105/LP/molK。 T为绝对温度，单位K，即273+t，t为实验湿度。 I为解离系数，蔗糖为1

3、。 C为等渗溶液的浓度，单位为mol/L。 则： s =-0.083105(273+t)1C实验要点实验要点 1、撕下的表皮组织必须完全浸没于溶液中 2、选用有色素的洋葱鳞茎外表皮实验效果较好s =iCRT蔗糖摩尔浓度（蔗糖摩尔浓度（mol/L）渗透势（渗透势（P）质壁分离的相对质壁分离的相对程度程度（%）0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 实验人实验人 日期日期 材料名称材料名称 实验时室温实验时室温 25 实验五实验五 植物组织水势的测定植物组织水势的测定 （小液流法）（小液流法） 1.了解测定植物组织水势的方法及其优缺点； 2.掌握用小液流法测定植物组织水势的方法。 一、实

4、验目的一、实验目的 当植物组织与外液接触时，如果植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质势），组织吸水、重量增大而使外液浓度变大；反之，则组织失水、重量减小而外液浓度变小；若两者相等，则水分交换保持动态平衡，组织重量及外液浓度保持不变。根据组织重量或外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度，然后根据公式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。二、实验原理二、实验原理 溶液渗透势的计算： s = - iCRT 式中：s 溶液的渗透势，以 MPa 为单位。 R 气体常数，为 0.008314 MPaL/（molK ）。 T绝对温度，即 273 + t 。 C 溶液的质量摩尔浓度，以 mo

5、l/kg 为单位。 i 为解离系数，蔗糖为 1 。 三、实验材料、试剂与仪器设备三、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料（一）实验材料植物叶片或洋葱鳞茎。 （二）试剂（二）试剂 1 甲烯蓝粉末。 2 蔗糖溶液：包括 0.20 、 0.3 、 0.4 、 0.5 、 0.6 mol/L 5种不同质量摩尔浓度的溶液。（三）仪器设备（三）仪器设备 指形管10支，毛细吸管5支，培养皿，打孔器，剪刀 l 把，镊子 1 把，解剖针1把。 四、实验步骤四、实验步骤 取干燥洁净的指型管10支，毛细吸管5支，编号贴标签，按序号排好。 1. 编号贴标签编号贴标签 2. 打取、浸泡叶片打取、浸泡叶片 取待测样品

6、的功能叶数片，用打孔器打取小圆片约 60 片，放在培养皿中，混合均匀。用镊子分别把 5 8 个小圆片放到盛有 4 mL不同质量摩尔浓度蔗糖溶液的指形管中，浸没叶片，盖紧瓶塞，放置 30 min ，并不断轻摇小瓶，以加速水分平衡（如温度低时可延长放置时间）。3. 染染色色到预定时间后，用解剖针尖蘸取微量甲烯蓝粉末，加入各指形管中，并摇动，使溶液染色均匀。 4. 测定测定把不同浓度的系列标准液分别倒入对应的指形管中，用毛细吸管吸取对应编号指型管内的有色溶液少许，插入相同编号的小试管溶液中部，轻轻挤出有色溶液一小滴，小心取出毛细管（勿搅动有色液滴），观察有色液滴的升降情况，并记录于表 1 中。若有色溶液液滴上升，表示浸过叶片的溶液浓度变小（即植物叶片组织中有水排出），说明叶片组织的水势大于该浓度溶液的溶质势；若有色液滴下降，则说明叶片组织的水势小于该浓度的溶质势；若有色小液滴静止不动，说明叶片组织的水势等于该浓度溶液的溶质势。若在前一浓度溶液中下降，而在后一浓度中上升，则植物组织的水势可取二种浓度溶液的溶质势的平均值。五、实验结果五、实验结果分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水势相当的浓度。记录实验时的温度，根据原理中公式）计算出组织的水势。六、注意事项六、注意事项 1. 所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主