ACCESS常见故障分析流程 troubleshooting

1、 ACCESS常见故障分析流程常见故障分析流程 怀疑一切 常见问题:定标质控病人结果解释仪器系统检测 Insuff Data 由于定标液不够或仪器错误导致某一点浓度定标测试被取消；Not Fit测得足够数据，但软件不能将其拟合为曲线；Max Iter软件能拟合曲线，但不能得出最佳拟合；Bad Fit软件拟合到最佳曲线，但曲线未通过软件的精密度协议文件；CV std 0重复测试的CV%超出范围；（仅用于TU）ACCESS定标失败几种常见的错误代码定标失败几种常见的错误代码 错误原因分析原则及步骤错误原因分析原则及步骤检查错误信号的内容，看是否有“QNS”，或系统错误而 导致定标失败；观察各点结果

2、精密度；如果精密度良好，错误有可能来自 某些操作失误；再观察RLU值是否接近上一次对应的值； 检查是否作了每日保养及每周保养；观察定标得到的目标值浓度是否接近印在定标卡上的值 如果不是，则可通过系统设置来修改对应的值；观察RLU值是否随曲线平滑上升（夹心法）或下降（竞 争法）， 如果不是，须检查是否把定标液位置摆错，或 者某一浓度的定标液受到污染； 错误原因分析原则及步骤错误原因分析原则及步骤如果定标曲线非常平坦，而且RLU值很低（夹心法）或 RLU值很高（竞争法），表明使用了错误的定标液或试剂盒；如果定标曲线平坦，且不论夹心法或竞争法，RLU值均很低， 则须检查发光剂是否用完或发光剂液路是否

3、正常；如果定标结果精密度较差，原因可能是： 缓冲液或发光剂液路内混入气泡； 采样针太脏； 清洗转盘混匀功能故障； 超声系统故障； 与排液或吸液有关的泵或阀门故障。 系统检测系统检测(system check)操作方法操作方法在一个样品架上装载4个2毫升样品杯，分别加入以下液体： 1号杯：未稀释系统检测液 2号杯：清洗缓冲液 3号杯：空样品杯 4号杯：1：501稀释系统检测液（20ul系统检测液加10ml 清洗缓冲液）操作步骤如下： 在主菜单下选择F6-保养程序 选择F1-装载/卸载样品架 输入样品架号 把样品架放入转盘 选择F1-完成 选择F3-系统检测 选择F1-系统 选择F1-开始（运行过

4、程需32分钟） 清洗程序完成后，选择F1-装载/卸载样品架，取出样品架， 选择F1-完成 系统检测方法及结果分析系统检测方法及结果分析系统检测系统检测(System Check)结果范围：结果范围： 1号杯：CV of Washed RLUs must be 12% Mean of RLUs 5000-20000 3号杯：CV of Substrate RLUs must be 5% Mean of RLUs 5000-9000 4号杯：CV of Unwashed RLUs must be 2% Mean of RLUs 4000000-8000000 Mean Washed RLUs mu

5、st be mean Substrate RLUs Wash Efficiency must be 5PPM 系统检测方法及结果分析系统检测方法及结果分析Washed 检测检测方法：主采样针向10个RV中各加入150ul系统检测液，对各RV进行3次清洗循环。然后在各RV加入200ul发光底物，最后检测其发光值。如果检测结果超出范围，提示：需检查RV的清洗与混匀系统功能Clean检测检测方法：主采样针向5个RV中各加入150ul清洗缓冲液，对各RV进行3次清洗循环。然后在各RV加入200ul发光底物，最后检测其发光值。检测结果RLU值不能有明显衰减。如果有衰减则提示：由于吸液针清洗不足导致交叉污

6、染。 系统检测方法及结果分析系统检测方法及结果分析Substrate检测检测方法：在10个RV中不加入任何样本，也不作清洗。直接向各RV加入200ul发光底物，然后测定其发光值。检测结果的mean，SD，CV%由后6个RV 计算得出。检测结果超出范围提示：需检查发光底物分配系统或发光检测计。Unwashed检测检测方法：主采样针向10个RV中各加入50ul 1：501倍稀释的系统检测液，该RV不作清洗。然后向各RV加入200ul发光底物。检测结果超出范围，提示：系统检测液稀释比例不当或主采样针精密度需做检查。 系统检测方法及结果分析系统检测方法及结果分析清洗效率清洗效率 由Unwashed，W

7、ashed，Substrate三种检测结果计算得出。结果超出范围，提示：需检查清洗系统。 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程数据是否支持客户的投诉？故障是否具有重现性？检查系统的历史记录，包括： 日常保养 维修记录 硬件更换 软件升级客户是否按要求进行日常保养？客户过往是否遇到同样问题？故障是否伴随其它情况同时出现，如： 定标 新的试剂批号 新的质控批号 新到一批试剂/耗材 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程哪些测试发生错误？哪些测试发生错误？ 竞争法 夹心法 2步分析法 对传送位置/调整非常敏感 需预处理的项目，如： 衣原体(Chlamydia) 红细胞叶酸盐(RBC Folat

8、e) 尿可的松(Urine Cortisol) 需要稀释的项目， 对精密泵较敏感。如： AFP (1/20) Cortisol (1/9.6) Dil-TotBHCG(1/200) Myoglobin (1/50) Rubella IgG (1/10) Toxo IgG (1/40) Most ID/BV assays 高光量子值的测试，如： CK-MB Myoglobin Troponin-I 所有感染性疾病项目 对磁性微粒子粘度敏感的项目，与试剂盒混匀/调整有关 Vit B12 Chlamydia RBC Folate/FolateACCESS软故障排除流程软故障排除流程 ACCESS软故

9、障排除流程软故障排除流程发生什么错误？发生什么错误？ 定标； 质控； 病人标本错误类型错误类型 准确度； 精密度； 漂移 趋势性变化 更换试剂盒后发生漂移 灵敏度； 特异性； 稳定性是否进行相应的质控测试？是否进行相应的质控测试？标本处理是否正确？标本处理是否正确？ 试剂盒因素？ 试剂盒位置 是否破损 试剂盒液面-“ E”孔液面为1.25英寸，即3.175厘米发光底物因素？ 使用前室温下预温18小时以上 是否污染 过期其它消耗品 反应试管 缓冲液 样品杯当前的系统检测结果如何？ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 定标定标定标液储存条件是否正确

10、？定标液储存条件是否正确？ HCG：-20度保存，每次使用间复溶 Folate/RBC Folate：开瓶前-20度保存 Free T3：开瓶前-20度保存 Progesterone：开瓶前-20度保存 Prolactin：开瓶前-20度保存 注意：在定标液盒外表有一温度计标志，提示保存条件。定标液是否为冻干粉？定标液是否为冻干粉？ CK-MB Insulin Troponin-I T Uptake 冻干粉定标液复溶是否正确？冻干粉定标液复溶是否正确？ 复溶水的水质 加样容器的准确度 加样的技术 混匀/旋转复溶后定标液保存是否正确？复溶后定标液保存是否正确？ 使用合适的冷冻保存试管 正确标签

11、无霜冰箱保存复溶后定标液是否过期？复溶后定标液是否过期？ CK-MB：2-10度 可保存10天 Insulin ： 2-10度可保存4个月 Troponin-I：2-10度只能保存10分钟；-20度可保存6个月 T Uptake：2-10度保存2周；-20度保存1个月ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 定标定标 定标液是否过期？定标液是否过期？ BHCG：保存于-20度；每次使用间复溶 Folate/RBC Folate：2-10度，保存3个月 Free T3：2-10度，保存5周 Progesterone：2-10度，保存3个月 Prolactin：2-10度，保存2个月定标错误的

12、类型定标错误的类型是否多于是否多于1个项目发生定标错误？个项目发生定标错误？定标液是否是新的批号定标液是否是新的批号/新到货？新到货？ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 定标定标 在以下情况，客户是否重复发生错误？ 同一盒定标液 同批号，另一盒定标液 新批号的定标液定标液结果的光量子值当前系统检测的结果ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 定标定标 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 质控质控质控测试非常重要目前ACCESS配套质控液有:AFP,CEA,PSA,free PSACKMB,Myoglobin,Troponin-IOstaseChlamydia,Toxo

13、 IgM其它公司(BioRad等)提供商品化的复合质控血清 附带多种仪器的均值,标准差,变异系数室内质控室间质评 -( 卫生部临检中心) ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 质控质控ACCESS系统软件内建实时质控软件Levy-Jenning质控图; Wetgard 多规则等建议每日进行质控测试,绘制室内质控图积极参加室间质评活动 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 质控质控检查过往质控记录 过往质控记录是否正常？ 发生漂移还是趋势性变化？质控液保存是否正确？ Troponin-I 质控液，复溶后保存于-20度质控液是否为冻干粉？ 复合质控液，如Bio-Rad公司产品冻干粉

14、质控液复溶是否正常？ 复溶水的水质，分析纯以上 移液器具的精密度 加样的技术 搅拌/混匀技术 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 质控质控复溶后质控液保存是否恰当 专用冷冻保存的试管 无霜冰箱 正确标签复溶后质控液是否过期？ Troponin-I：室温15分钟；-20度保存6个月质控液是否过期？ Folate/RBC Folate：2-10度保存3天 (Bio-Rad) Myoglobin：2-10度保存28天 PSA：2-10度保存3天 (Bio-Rad) Rubella IgG：2-10度保存30天 Toxo IgG：2-10度保存30天 Troponin-I：室温15分钟 BV

15、/ID：2-10度30天 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 质控质控质控数据范围是否正确？质控数据范围设置是否正确？质控液批号是否对应？是否多于1种质控发生错误？是否多于1种检测项目质控失控？在以下情况，客户是否重复错误现象？ 同一瓶质控液 同批号，另一瓶质控液 新批号的质控液质控失控的类型 精密度； 准确度 漂移； 趋势性变化 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 质控质控质控失控是否伴有以下情况出现？ 新的定标曲线 新的试剂批号 新的质控批号 同批号新的质控液 新到货的试剂检查光量子值(RLUs)检查当前的系统检测结果 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 病人

16、结果病人结果标本采集是否正确？是否使用正确类型的标本？标本是否在规定时间内到达实验室？标本凝固步骤是否遵循NCCLS规则？标本处理过程是否正确？离心机是否经过校正？标本是否经过预处理？如： Chlamydia； RBC Folate； Urine Cortisol标本是否被稀释？ 不能稀释的项目：FT3，T UPTAKE Troponin-I ：稀释比例不能大于 1：2 FT4：需要特殊的稀释方法 是否使用正确的样本稀释液？标本体积是否正确？标本上机后时间是否超过以下规定？ 2毫升样品杯：1小时 3毫升样品杯：2小时标本是否在以下指定时间内测试完毕？ Vit B12 ：2-10度，24小时内

17、Folate/RBC Folate：马上冷藏；2-10度8小时内 FT3：2-10度，8小时内 Insulin：2-10度，24小时内 Troponin-I ：分离标本后马上冷藏；2-10度，3小时内ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 病人结果病人结果 ACCESS软故障排除流程软故障排除流程 - 病人结果病人结果标本是否冷冻？ 储存在无霜冰箱 储存于专用冷冻试管 在室温复溶，不能用水浴 复溶后混匀，离心 冷冻保存标本的时间限制： BHCG：6个月 Folate/RBC Folate：6个月 HFSH：2个月 HLH：6个月 PSA：2个月 TSH：2周 ACCESS软故障排除流程软

18、故障排除流程 - 病人结果病人结果是否有异嗜性抗体的干扰，例如HAMA(人抗鼠抗体)， HAGA(人抗羊抗体) 某些肿瘤病人使用鼠类免疫球蛋白治疗 农场工人异嗜性抗体干扰发生率较高 采用异嗜性封闭试管，防止干扰检查标本RLUs检查当前的系统检查结果 ACCESS软故障排除通用流程软故障排除通用流程错误模式 结果差异 定标错误 质控失控 与临床不符结果差异处理流程 1 是否仅发生于病人标本结果？ 是否同时发生于病人标本与质控标本？ 2 只发生于病人标本时 ：检查病人标本处理过程 3 同时发生于病人标本/质控标本时：检查其它项目结果是否差异？ 4 如果是，检查仪器性能状态5 如果只发生于1种项目，

19、首先须排除该项目敏感的仪器因素6 如果排除仪器因素后，进入该特定项目故障排除流程 ACCESS软故障排除通用流程软故障排除通用流程标本处理流程标本获取：获取方法是否正确，是否使用正确类型标本？标本接收：标本凝固方法是否遵照NCCLS规则？标本处理：客户是否使用适当的离心机？ 离心机工作是否正常，RCF是否正确？标本在项目规定时间内测试？标本冷冻保存，复溶是否正确？ ACCESS系统验证系统验证检查系统清洁度/清洗性能 探针 试剂采样/加样区域检查所有机械部件调整(Alignment) Pipettor Shuttle transfer Wash carousel transfer 检查超声系统

20、检查精密泵性能检查混匀功能 速度， 混匀马达， 混匀滑轮， 混匀钳制阀滚筒 ACCESS系统验证系统验证检查液路系统 泄漏/气泡 分配液体体积 吸样量 蠕动泵管道 废液系统作系统检测分析系统检测结果根据需要作其它的诊断测试 Dil AP TSH Wash Buffer CK-MB Dil Lum Wash Son/Lum Wash Inc 52 具体检测项目故障排除流程 Customer Tech Support Calls Jan-May 2000, NAOAll Access calls (H/W, S/W, Reagent, Misc.): 10,140 Total CallsReage

21、nt calls: 1322 calls (13%)Cardiac Assays: 576 calls (44%)CK-MB 184 calls (14%) Troponin 346 calls (26%)Thyroid Assays: 219 calls (17%)TSH 61 calls (5%)Fertility Assays: 208 calls (16%) hCG: 117 calls (9%)Anemia Assays: 142 calls (11%)Tumor Marker Assays: 110 calls (8%)Infectious Disease Assays: 33 c

22、alls (3%) 各种检测发生故障频率分布 Customer Tech Support Calls Jan-May 2000, NAOQC outCalibration problemImprecisionMiscellaneous technicalDiscordant sampleAssay shiftProficiency survey failureAssay driftPoor method correlationReagent call breakdown by type: 42% 24% 12% 10% 6% 6% 1% 1% 1% 各种类型故障发生频率分布 心肌标志物检测项目

23、心肌标志物检测项目uCK-MBw 冻干粉定标液( 刚更换为液体)w 对以下因素敏感： Aspiration Splashing Mixer rollers, especially substrate dispense 心肌标志物检测项目心肌标志物检测项目u肌红蛋白w 稀释检测项目 (1/50)w 低值端灵敏度非常重要w 对以下因素敏感： Precision pump Ultrasonics Mixes sample in RV Alignments Mixer rollers Washing 心肌标志物检测项目心肌标志物检测项目u心肌钙蛋白-Iw 样本处理流程 3小时之内不测定，需冷冻标本 不

24、可交替使用血浆/血清标本 推荐使用EDTA血浆 待标本充分凝固后检测(血清) 正确方法离心w 冻干粉定标液w 冻干粉质控液w 对 splashing敏感 u 与病人整体健康状态有关u 需要看整体，不能单凭一个结果作诊断u 需掌握病人病史，现状，治疗情况等u 其它实验室的结果u 自身免疫疾病甲状腺功能检测甲状腺功能检测 uFree T3:w 2- 步竞争法w 热敏感w 定标液在使用前必须保存于 -20Cw 标本不可稀释甲状腺功能检测甲状腺功能检测 uFree T4w 2- 步竞争法w 目前为改进后项目 ( 8/1998发布) 提高临床符合程度 提高精密度 调整正常参考值范围(更合理) 定标液作修改 反应时间加快w 对以下因素敏感 RV mixing Ultrasonics mixing