疟疾血片制作

1、血片的制作血片的染色影响血片制作质量的因素及注意事项疟疾血片厚、薄血膜的制作要领。疟疾血片制作注意事项。掌握血片制作技巧、反复练习。（一）采血：1、使用的器材准备：一次性采血针75%酒精棉棒（球）载玻片推片记号笔或铅笔。 2、采血时间：症状发作后数小时至10小时之内。3、采血部位消毒：采血部位消毒：用沾有碘酒的棉棒在患者手指末端、耳垂、拇趾或足跟（婴幼儿）从内向外画同心圆。4、采血：、采血：将采血针迅速刺入取血部位12mm深，用大拇指、食指协同挤出血滴。第一滴血因含有酒精，用棉签擦去。再挤出第二滴血用于制作血片。（二）涂制血片1、取血取血: 将载玻片平均划分为2等份，用推片的一角从患者刺血部位

2、沾取血样放在载玻片上，或用载玻片直接沾取血样。于载玻片中央偏右3mm处粘取45ul（相当于一个火柴头大小）血液用于涂制厚血膜，在玻片中央偏左3-5mm处粘取11.5 ul血液（相当于1/4火柴头大小）用于涂制薄血膜。要求要求:先沾取厚血膜血样，再沾取薄血膜血先沾取厚血膜血样，再沾取薄血膜血样。样。2、制片：左手拇指和食指托住载玻片的两个短边，右手拇指和食指同时捏住推片和载玻片，使推片保持25度35度角，用推片短边的下缘平抵血样前3-5mm处，然后推片顺着载玻片缓慢地向后退，边退边观察血液在推片的扩展情况，当血液向两侧扩展至距载玻片边缘2mm时，停止后退，然后匀速向前推，直至推片抵到拿载玻片的手

3、指。推片时，右手拇指和食指要贴紧载玻片，避免推歪。薄血膜要成舌状，厚度应以红细胞之间互相接触而不重叠为佳。 薄血膜制作注意： 血滴大，速度快、角度大 血膜厚 血滴小，速度慢、角度小 血膜薄血涂片质量评价： 血膜均匀、厚薄度合适、无空泡、无划痕 薄血膜头体尾位置和形状好、无停顿起伏、 两侧留出空间 推好薄血膜后，再用推片一角由内向外划圈涂制直径0.81cm的圆形厚血膜（厚度以一个油镜视野内可见到510个白细胞为宜）。 3、编号：每张载玻片上可做1个薄血膜和1个厚血膜，如图：标准血片标准血片门诊发热病人血片门诊发热病人血片居民普查血片居民普查血片4、干燥：干燥：可自然干燥，也可在手掌大鱼际肌上摩擦

4、干燥。或者使用酒精灯或电吹风加热干燥，但需当心过度加热，烤伤血片。而且，加热后必须待冷却至室温方能染色或固定，否则染色冲片血膜会脱落。 5、固定：、固定：干燥后的血片用甲醇固定薄血膜。固定时，注意薄血膜一端朝下，避免固定厚血膜。 血片染色在血片的制作过程中是一个重要的环节，染色质量的好坏，直接影响到疟原虫的检出率，也是直接影响疟疾病例确诊与否的关键。 疟疾血片的染色有瑞氏染液和吉氏染液两种，我们现在重点介绍吉姆萨染液染色法。 染液为省寄生虫病防治所统一配制的吉姆萨染液；为方便开展工作，经省寄生虫病防治所反复试验，缓冲液选择市面上供应的娃哈哈矿泉水为佳（在条件允许时配制pH7.07.2的缓冲液为

5、最佳选择）。注：珠海贝索生物技术有限公司生产的Baso姬姆萨染液： A液为染液 B液为稀释液染色方法：染色方法： 1.标准染色方法 1滴原液+1ml缓冲液，染2030分钟 2.快速染色方法2滴原液+1ml缓冲液，染1015分钟 染色时，用吸管吸取配好的染液，以一定高度自由滴下染液。禁止用吸管搅拌玻片上的染液或者接触血膜。染色结束后将玻片浸入盆水中，使玻片保持水平并左右轻轻移动，至干净时从水中轻轻抽出。或者使用自来水冲洗，冲洗时，水平拿起载玻片（不要先倒掉染液），从载玻片无血膜区域（磨边处）用无冲击力的缓慢流水轻柔地把染液冲掉，在确保厚血膜不掉的前提下，从玻片另外一边再冲洗，直到确认冲洗干净。晾干时注意薄血膜一端向下放置（用晾片板晾干）。未染色血片的保存未染色血片的保存 未染色的血膜放置时间，夏季不宜超过48小时，冬季不宜超过72小时。若送省级或国家检测，应待厚血膜干后，先用蒸馏水溶血，再用甲醇固定薄血膜，晾干包好后放入干燥的容器或自封袋中送检。 采血针一人一针；载玻片脏：有油脂、污迹；推片不规格；取血不适度；薄血膜过厚；厚血膜制作不均匀；染液杂质；染液PH值不合适（适宜：7.0-7.2）；过度