水稻雄性不育系鉴定

1、 1、实验目的与要求、实验目的与要求n2、实验内容、实验内容n 3、实验材料及用具、实验材料及用具n 4、实验方法与步骤、实验方法与步骤n 5、作业、作业实验实验 作物雄性不育系的鉴定作物雄性不育系的鉴定一、一、实验目的与要求实验目的与要求n n 通过本实验学习，要求学生初步掌握通过本实验学习，要求学生初步掌握水稻雄性不育系的植物学形态特征和花水稻雄性不育系的植物学形态特征和花粉育性鉴定技术粉育性鉴定技术二、实验内容二、实验内容n（一）水稻（一）水稻雄性不育系和保持系植株形态特征雄性不育系和保持系植株形态特征的识别的识别n（二）（二）水稻雄性不育系花粉育性镜检鉴定水稻雄性不育系花粉育性镜检鉴定

2、 n（三）（三）水稻雄性不育系套袋自交结实性鉴定水稻雄性不育系套袋自交结实性鉴定三、实验材料与用具三、实验材料与用具n 水稻雄性不育系和保持系水稻雄性不育系和保持系(或恢复系或恢复系)的生长的生长植株，扩大镜、显微镜、镊子、载玻片、盖玻植株，扩大镜、显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、回形针、羊皮纸袋、标签、吸水纸，片、回形针、羊皮纸袋、标签、吸水纸，1% i-ki 溶液。溶液。 四、实验方法与步骤四、实验方法与步骤n（一）水稻雄性不育系和保持系植株形态特征（一）水稻雄性不育系和保持系植株形态特征的识别的识别n 在不育系繁殖田或杂交制种田对不育系及其保持系在不育系繁殖田或杂交制种田对不育系及其保持系

3、（或恢复系）进行逐行逐株地观察比较，并从（或恢复系）进行逐行逐株地观察比较，并从株型、株型、分蘖、抽穗开花时间、吐颈性、花药形态、颜色、开分蘖、抽穗开花时间、吐颈性、花药形态、颜色、开裂情况和开颖角度等形态进行区别（见下裂情况和开颖角度等形态进行区别（见下表表）水稻水稻雄性不育系与雄性不育保持系植株形态比较雄性不育系与雄性不育保持系植株形态比较性性 状状不不 育育 系系 保保 持持 系系株型株型较紧凑，植株较紧凑，植株较矮较矮较松散，植株较松散，植株较高较高分蘖分蘖分蘖力较强分蘖力较强分蘖力较弱分蘖力较弱抽穗开花时间抽穗开花时间较长，较分散较长，较分散有明显高峰期有明显高峰期穗颈穗颈有包颈现象

4、有包颈现象正常正常花药形态、色花药形态、色泽、开裂情况泽、开裂情况 瘦小、干瘪瘦小、干瘪 、白、白色或淡黄色水渍色或淡黄色水渍状，不开裂状，不开裂 肥大、饱满、肥大、饱满、鲜黄色、开裂鲜黄色、开裂 n(二二)水稻雄性不育系花粉育性镜检鉴定水稻雄性不育系花粉育性镜检鉴定n1 1、取样、取样 n 分别从不育系、保持系（或恢复系）中随机选取分别从不育系、保持系（或恢复系）中随机选取即将开花的即将开花的稻稻穗穗2 2一一4 4个，挂上标签，带回个，挂上标签，带回实验实验室。室。n 从中选择花药已伸长达颖壳从中选择花药已伸长达颖壳2 23 3的花朵的花朵3 34 4个，剥个，剥开内外开内外稃稃，从每朵花

5、中取花药，从每朵花中取花药3 3个左右作镜检制片。个左右作镜检制片。n n2 2、制片、制片 n 将花药分别置于载玻片上，用镊子轻轻捣将花药分别置于载玻片上，用镊子轻轻捣碎，滴上一小滴碎，滴上一小滴ikiiki溶液染色，去掉药壁后，溶液染色，去掉药壁后，盖好玻片，用吸水纸吸去多余的盖好玻片，用吸水纸吸去多余的ikiiki，待镜，待镜检观察。检观察。n3 3、镜检、镜检 n 将制好的玻片，置于将制好的玻片，置于100100倍显微镜下仔细倍显微镜下仔细观察。每片各选择有代表性的视野观察。每片各选择有代表性的视野2323个观察个观察花粉粒的形状和染色反应，按下表的标准，数花粉粒的形状和染色反应，按下

6、表的标准，数计每个视野内各类型花粉粒的数量计每个视野内各类型花粉粒的数量， 败育型花粉与正常可育花粉的比较败育型花粉与正常可育花粉的比较项目项目典 败典 败型型圆败型圆败型染败型染败型正 常正 常可育可育花粉形状花粉形状不 规不 规则形则形圆形圆形圆形圆形圆形圆形碘反应碘反应不 染不 染色色不染色或少不染色或少量浅蓝色量浅蓝色蓝 色 或 染蓝 色 或 染色不均匀色不均匀蓝 黑蓝 黑色色套袋自交套袋自交结实情况结实情况不 结不 结实实不结实不结实不结实不结实结实结实n分别按下式计算各类不育花粉的百分率分别按下式计算各类不育花粉的百分率。n不育花粉率（）不育花粉粒数不育花粉率（）不育花粉粒数/ /

7、总花粉粒数总花粉粒数x100x100n根据不育花粉率，判定花粉不育等级根据不育花粉率，判定花粉不育等级 水稻花粉不育性分级标准水稻花粉不育性分级标准不育等级不育等级正常可正常可育育低不育低不育半不育半不育高不育高不育全不全不育育不育花粉不育花粉率（率（%）95100n（三）雄性不育系套袋自交结实性鉴定（三）雄性不育系套袋自交结实性鉴定 n 在不育系中选择刚抽穗但尚未开花的稻穗在不育系中选择刚抽穗但尚未开花的稻穗10个，个，套上羊皮纸袋，用回形针固定让其自交结实。套上羊皮纸袋，用回形针固定让其自交结实。15天后天后取掉纸袋，分别统计其自交结实情况。凡套袋的株取掉纸袋，分别统计其自交结实情况。凡套袋的株（穗）只要有一粒结实的就为结实株（穗）（穗）只要有一粒结实的就为结实株（穗）。 n计算不育株（穗）率和不育度。计算不育株（穗）率和不育度。 n 根据不育度，确定不育度等级根据不育度，确定不育度等级 n水稻、水稻、油菜油菜不育系不育度分级标准不育系不育度分级标准不育等级不育等级全不育全不育高不育高不育半不育半不育低不育低不育正常可正常可育育水稻不育度水稻不育度 %10090-9950-8920-4920油菜不育度油菜不育度 %1008050-8010-5010五、实验作业五、实验作业n1 1在不育系繁殖田或