心脏标志物检验专课件

1、心脏标志物检验专课件 第十五章 心脏标志物检验 心脏标志物检验专课件 第一节第一节 概述概述 一、心脏的结构和功能一、心脏的结构和功能 心脏的主要功能：完成体内的物质运输（原料、心脏的主要功能：完成体内的物质运输（原料、 产物、激素、抗体等）产物、激素、抗体等） 二、心脏疾病的诊断二、心脏疾病的诊断 心电图、超声心电图、心导管检查、核素心血心电图、超声心电图、心导管检查、核素心血 管照影、电子计算机断层扫描（管照影、电子计算机断层扫描（CT） 血液生化检查血液生化检查 心脏标志物检验专课件 WHO提出诊断提出诊断AMI的三个依据的三个依据 （1959年规定满足以下两种即可确诊年规定满足以下两种

2、即可确诊AMI） 临床表现和症状主要为胸部剧烈疼痛临床表现和症状主要为胸部剧烈疼痛; 心电图上特异性改变心电图上特异性改变; 血清中有关酶浓度或标志物出现升高下降血清中有关酶浓度或标志物出现升高下降 的动态过程的动态过程. 心脏标志物检验专课件 2000年年WHO对对AMI诊断指标诊断指标修改修改 的的依据依据 1、心肌肌钙蛋白升高后缓慢降低、心肌肌钙蛋白升高后缓慢降低 / CK-MB快速快速 升高后降低升高后降低 具有以下症状之一者可诊断为具有以下症状之一者可诊断为AMI A、缺血症状；缺血症状； B、心电图（心电图（ECG）出现病理出现病理Q波波; C、ECG呈缺血改变（呈缺血改变（ST段

3、抬高或下降）；段抬高或下降）； D、冠状动脉检查有异常冠状动脉检查有异常 心脏标志物检验专课件 血清酶与心电图在诊断血清酶与心电图在诊断AMI方方 面性能比较面性能比较 假阴性假阴性 灵敏度灵敏度 假阳性假阳性 特异性特异性 心电图心电图 34 % 66 % 0 100 % CK-MB 0 100% 1 % 99 % CK 2 % 98 % 15 % 85 % LD1 10 % 90 % 5 % 95 % 心脏标志物检验专课件 第二节第二节 心脏标志物的测定心脏标志物的测定 一、酶类标志物一、酶类标志物 LDH、AST、HBDH、CK CK-MB、LDH1 心脏标志物检验专课件 （一）AMI时

4、血清中心脏酶活性时血清中心脏酶活性 改变的机制改变的机制 1、心肌酶的释放速度心肌酶的释放速度 （1）细胞内外酶浓度的差异）细胞内外酶浓度的差异 （2）酶在心肌细胞内定位与存在形式）酶在心肌细胞内定位与存在形式 （3）酶蛋白分子量的大小）酶蛋白分子量的大小 2、心肌酶在细胞间隙的分布和运送心肌酶在细胞间隙的分布和运送 1）心肌细胞中的酶通过毛细血管直接进入血液）心肌细胞中的酶通过毛细血管直接进入血液 2）细胞酶进入组织液，经淋巴系统回流入血）细胞酶进入组织液，经淋巴系统回流入血 3、血中酶的清除血中酶的清除 1）尿路排泄）尿路排泄 2）血管内失活或分解）血管内失活或分解 3）肝脏及网状内皮系统

5、对酶的清除）肝脏及网状内皮系统对酶的清除 心脏标志物检验专课件 AMI的酶类标志物的酶类标志物 血清学方面出现明显变化血清学方面出现明显变化: 首先升高首先升高CK-MB;48hr; 随后总随后总CK出现升高出现升高; AST出现升高出现升高; LD1出现升高出现升高. 心脏标志物检验专课件 （二）（二）AMI的酶类标志物的酶类标志物 1、肌酸激酶、肌酸激酶(CK)及其同工酶和亚型及其同工酶和亚型 （一）生物化学特性（一）生物化学特性 组织分布：细胞定位于组织分布：细胞定位于细胞浆细胞浆;骨骼肌含量最高骨骼肌含量最高,脑、心等。脑、心等。 线粒体也有肌酸激酶线粒体也有肌酸激酶(CKmt) 生理

6、变异：性别、年龄、种族等有一定影响；生理变异：性别、年龄、种族等有一定影响； 运动影响。运动影响。 标本的采集，处理与贮存：标本的采集，处理与贮存： AK 溶血溶血： 2ADP = ATP + AMP 放置放置：室温放：室温放 4 hr或或 4 12hr以可使酶失活以可使酶失活 酶的种类酶的种类：CK-BB、CK-MB、CKMM 参考值范围参考值范围 : 男性男性:180 U/L 女性女性: 130 U/L (37 ) 心脏标志物检验专课件 肌酸激酶肌酸激酶(CK)及其同工酶及其同工酶 （二）测定方法（二）测定方法 肌酸激酶肌酸激酶(Creatine Kinase, ) (UV法法) 反应原理

7、反应原理 PH=9.0 肌酸肌酸 + 腺三磷酸腺三磷酸=磷酸肌酸磷酸肌酸 + 腺二磷酸腺二磷酸 PH=6.7 HK 葡萄糖葡萄糖 + 腺三磷酸腺三磷酸=G-6-P + 腺二磷酸腺二磷酸 G6PD 6-磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖 + NADP=G-6PA + NADPH2 CK-MB 测定方法用测定方法用抗体结合抗体结合M-亚基亚基,测定测定B-亚基活亚基活 性性,结果翻倍结果翻倍. 心脏标志物检验专课件 临床应用临床应用 CK是临床测定次数最多是临床测定次数最多; CK是是AMI的诊断辅助指标之一的诊断辅助指标之一； CK是是AMI的治疗及预后；的治疗及预后； 作为其它心肌损伤检测；作为其它心肌损伤

8、检测； CK也是肌肉损伤辅助诊断指标之一；也是肌肉损伤辅助诊断指标之一； CK-MB：AMI的诊断指标之一；的诊断指标之一； AMI的治疗及预后；的治疗及预后； CK亚型对早期亚型对早期AMI的检出更为灵敏的检出更为灵敏； 心脏标志物检验专课件 其它测定方法：其它测定方法： 酶偶联酶偶联-丙酮酸测定法丙酮酸测定法 丙酮酸激酶丙酮酸激酶 ADP + 磷酸烯醇式丙酮酸磷酸烯醇式丙酮酸=丙酮酸丙酮酸 + ATP 丙酮酸丙酮酸 + 2,4二硝基苯肼二硝基苯肼=丙酮酸丙酮酸- 2,4二硝基苯腙二硝基苯腙 逆向反应：化学法逆向反应：化学法 Cr + 双已酰双已酰 + 萘酚萘酚 = 红色化合物红色化合物 （

9、男：（男：5.575 女：女：14.540 U/L） 心脏标志物检验专课件 2、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶(LD)及其同工酶及其同工酶 （一）生物化学特征（一）生物化学特征 组织分布组织分布:细胞定位于细胞浆细胞定位于细胞浆;LD1心肌心肌,LD5横纹肌、肝脏横纹肌、肝脏 等等, 以肝、心、肾、肌肉等以肝、心、肾、肌肉等 生理变异生理变异: LD2LD1LD3LD4LD5、儿童较成人高一倍。儿童较成人高一倍。 标本的采集，处理与贮存标本的采集，处理与贮存: 血小板含大量血小板含大量LD，LD易冷变性，易冷变性， RBC/血清为血清为 100 倍倍 参考值范围参考值范围 : 80-500 U/L (

10、IFCC-P-L) 50-150 U/L (L-P)(国内用为主国内用为主) (37 ) 心脏标志物检验专课件 乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶(LD)测定方法测定方法 （二）测定方法（二）测定方法 反应原理反应原理: PH8.8-9.8 L-乳酸乳酸 + NAD =丙酮酸丙酮酸 + NADH + H PH7.4-7.8 LD同工酶测定同工酶测定: 用己六醇抑制用己六醇抑制M亚基活性亚基活性,测定测定LD（既既LD1）的酶活性：的酶活性： LD1测定可用其它底物测定可用其它底物:羟羟(酮酮)丁酸丁酸, 羟丙酮等酸羟丙酮等酸 临床应用临床应用: LD1是是AMI辅助诊断酶之一；辅助诊断酶之一； LD是心肌功

11、能检查指标之一；是心肌功能检查指标之一； 诊断和鉴别心、肝和骨骼肌的疾病；诊断和鉴别心、肝和骨骼肌的疾病； 心脏标志物检验专课件 3、天门冬氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶 AST:细胞定位于细胞浆及线粒体细胞定位于细胞浆及线粒体;器官以心、器官以心、 肝、骨骼肌肝、骨骼肌 及及 红细胞等；肝中红细胞等；肝中AST 70 %存存 在于线粒体在于线粒体 ； AST：主要用于诊断主要用于诊断AMI; 肝细胞损伤程度指标肝细胞损伤程度指标; 肝脏疾病预后指标肝脏疾病预后指标; 心脏标志物检验专课件 4、AST、LDH和和CK的特异性比较的特异性比较 （1）AST心肌含量多，但其他器官也多，心肌含

12、量多，但其他器官也多， 诊断特异性较差；诊断特异性较差； （2）LDH含量高，分子量大，血清中升含量高，分子量大，血清中升 高慢，但半衰期长，有一定诊断价值；高慢，但半衰期长，有一定诊断价值； （3）CK含量高，分子量较小，出现时间含量高，分子量较小，出现时间 早，阳性率较高，诊断价值较高早，阳性率较高，诊断价值较高； 心脏标志物检验专课件 （三）（三）AMI后心肌酶的时相变化后心肌酶的时相变化 心肌细胞膜通透性改变后开始释放胞内容心肌细胞膜通透性改变后开始释放胞内容 物，其顺序如下：物，其顺序如下： 无机离子、小分子有机物、大分子蛋白无机离子、小分子有机物、大分子蛋白 心肌酶释放心肌酶释放-

13、组织液组织液-淋巴液淋巴液-入血入血 心肌酶增高有延滞期心肌酶增高有延滞期： 延滞期的长短延滞期的长短取决于梗死区的大小、酶分子的大取决于梗死区的大小、酶分子的大 小、酶在细胞中的浓度、定位形式、酶在血中稀小、酶在细胞中的浓度、定位形式、酶在血中稀 释、破坏程度等释、破坏程度等 心脏标志物检验专课件 急性心肌梗塞主要血清酶变化急性心肌梗塞主要血清酶变化 酶种类酶种类 延缓期延缓期 峰值峰值 维持时间维持时间 增高倍数增高倍数 CK-MB 38 hr 1624hr 14天天 20 倍倍 CK 410hr 2030hr 36天天 10 倍倍 AST 410hr 2030hr 36天天 10 倍倍

14、LD/LD1 612hr 3060hr 714 天天 6 倍倍 ASTm 824hr 48 hr 8 天天 4 倍倍 GGT 24 天天 810天天 2530天天 3 倍倍 心脏标志物检验专课件 （四）心肌酶的生理变异（四）心肌酶的生理变异 1、性别、性别 2、年龄、年龄 新生儿新生儿CK三倍成人三倍成人 婴儿期为二倍婴儿期为二倍 LDH出生时为成人出生时为成人2倍，倍，14岁达成人水平岁达成人水平 3、运动、运动 心脏标志物检验专课件 （五）心肌酶的测定（五）心肌酶的测定 1、方法学及其发展、方法学及其发展 固定时间法固定时间法 连续检测法连续检测法 酶质量法酶质量法 2、标本的处理对结果的

15、影响、标本的处理对结果的影响 标本的采集，处理与贮存：标本的采集，处理与贮存： AK 溶血溶血： 2ADP = ATP + AMP 放置放置：室温放：室温放 4 hr或或 4 12hr以可使酶失活以可使酶失活 酶的种类酶的种类：CK-BB、CK-MB、CKMM ) 心脏标志物检验专课件 （六）参考范围及其临床意义参考范围及其临床意义 1、乳酸脱氢酶及其同工酶乳酸脱氢酶及其同工酶 参考范围参考范围：成人：成人：120 230 U/L（L-P） LD2LDH1 LDH3 LDH4 LDH5 2、肌酸激酶肌酸激酶(CK)及其同工酶及其同工酶 参考值范围参考值范围 : 男性男性:180 U/L 女性女

16、性: 130 U/L （37 ） CK-MB：10 25 u/L或或 5 %CK 3、天门冬氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶 参考值范围参考值范围 : 0 40 U/L 心脏标志物检验专课件 二、蛋白类标志物二、蛋白类标志物 血清心肌酶对测定血清心肌酶对测定AMI时的不足时的不足： 酶活性升高出现较晚酶活性升高出现较晚 持续时间短持续时间短 特异性较差特异性较差 希望的心脏标志物希望的心脏标志物 高度特异性高度特异性 损伤后快速释放入血损伤后快速释放入血 血中半衰期较长血中半衰期较长 可被快速分析可被快速分析 心脏标志物检验专课件 （一）AMI的蛋白类标志物 1、肌红蛋白、肌红蛋白 Mb 1

17、70kD最早出现的生化指标，最早出现的生化指标，1hr出现，其升出现，其升 高幅度和持续时间与梗死面积和坏死程度呈正相关高幅度和持续时间与梗死面积和坏死程度呈正相关 2、肌钙蛋白、肌钙蛋白 心肌肌钙蛋白用于诊断心肌肌钙蛋白用于诊断AMI。在早期血清浓度也明显增在早期血清浓度也明显增 加，敏感性和特异性高，持续时间长。心肌肌钙蛋白是加，敏感性和特异性高，持续时间长。心肌肌钙蛋白是 心肌损伤心肌损伤最具特异性最具特异性的标志物。的标志物。 3、CK-MB质量质量 心脏标志物检验专课件 （二）蛋白类标志物的测定蛋白类标志物的测定 1、测定的标准化、测定的标准化 肌红蛋白、心肌肌钙蛋白、肌红蛋白、心肌

18、肌钙蛋白、CK-MB质量均采用免疫学方法测定。质量均采用免疫学方法测定。 免疫学方法：抗干扰能力强，准确度高，大大提高诊断免疫学方法：抗干扰能力强，准确度高，大大提高诊断AMI时的准确性。时的准确性。 2、测定的不精确性、测定的不精确性 肌红蛋白和肌红蛋白和CK-MB的生物学变异（的生物学变异（CV）分别为分别为 5.6%和和4.2% ，许多分许多分 析方法的变异析方法的变异远大于远大于生物学变异。生物学变异。 3、测定前的因素影响、测定前的因素影响 存放时间、温度、反复冻溶及抗凝剂影响存放时间、温度、反复冻溶及抗凝剂影响 免疫法测定免疫法测定CTnI和和MYO时，时，肝素与肝素与EDTA抗凝产生抗凝产生6%的干扰的干扰。 心脏标志物检验专课件 AMI实验室诊断参数：实验室诊断参数： 肌红蛋白（肌红蛋白（MYO）测定；测定；