检验科微生物室PPT学习教案

1、会计学1 检验科微生物室检验科微生物室 第1页/共81页 协会)标准化文件要求还相差很 远，我们应进行规范操作，才可 能应对微生物向人类的挑战，才 能适应临床的需要。 l临床微生物检验，在感染性疾病 及相关病患的诊断治疗预防及研 究工作中起着越来越重要的作用， 为了保障检验结果的准确性和可 靠性，日常工作中要注意开展质 量控制。 第2页/共81页 l细菌耐药性监测需要 l为合理使用抗菌药物提供依据 l为生物安全、医院感染管理和 监控预防提供科学依据 第3页/共81页 为了保证检验结果准确无误，应对室间质 评和室内质控实行全面质量管理。 临床微生物检验临床微生物检验 是对人体的各种物质进行微生物

2、学检验， 整个检验过程包括病人样品的采集、运送 、处理，样品中致病微生物的分离、培养 、鉴定，药物敏感试验，出具检验报告。 其质量控制环节多、涉及的知识面广、 复杂性高、需要超强的责任心。 第4页/共81页 第5页/共81页 第6页/共81页 第7页/共81页 分析后 质量控制范畴质量控制范畴 分析前 分析中 质量保持持续改进 第8页/共81页 第9页/共81页 第10页/共81页 第11页/共81页 临床微生物临床微生物 实验室的基实验室的基 本装备本装备 孵育箱、CO2培养箱、高压灭菌器 生物安全柜 试剂、染液、质 控菌株、培养基 冰箱、酒精灯、 接种环、游标 卡尺、温度计 等 光学显微镜

3、 第12页/共81页 第13页/共81页 临床微生物 室需建立室 内质控 1 1 2 3 4 常规试验室内质控 培养基质控 药敏试验的质控 自动化设备质控：鉴定和药敏、血培养 系统 第14页/共81页 ATCC：美国典型菌株保存中心：美国典型菌株保存中心-主要主要 来源来源 NCTC：英国国家典型菌株保存中：英国国家典型菌株保存中 实验中用标准方法鉴定，鉴定值实验中用标准方法鉴定，鉴定值 95典型菌株，并经多次传代，典型菌株，并经多次传代， 特征衡定的菌株特征衡定的菌株 质控质控 菌株菌株 参考参考 菌株菌株 临床临床 分离分离 菌菌 第15页/共81页 第16页/共81页 低温速冻低温速冻

4、苛养细菌苛养细菌 冷冻干燥冷冻干燥 长期保留菌株长期保留菌株 参考菌株参考菌株 保存方法保存方法 高层琼脂高层琼脂 非苛养菌非苛养菌 琼脂斜面琼脂斜面 现用菌株现用菌株 参考菌株保存方法参考菌株保存方法 第17页/共81页 第18页/共81页 第19页/共81页 第20页/共81页 第21页/共81页 第22页/共81页 第23页/共81页 第24页/共81页 第25页/共81页 第26页/共81页 第27页/共81页 第28页/共81页 第29页/共81页 第30页/共81页 第31页/共81页 第32页/共81页 第33页/共81页 第34页/共81页 第35页/共81页 第36页/共81

5、页 第37页/共81页 第38页/共81页 第39页/共81页 第40页/共81页 第41页/共81页 第42页/共81页 第43页/共81页 第44页/共81页 第45页/共81页 第46页/共81页 第47页/共81页 无无 菌菌 部部 位位 标标 本本 第48页/共81页 第49页/共81页 第50页/共81页 第51页/共81页 第52页/共81页 第53页/共81页 第54页/共81页 第55页/共81页 第56页/共81页 第57页/共81页 第58页/共81页 第59页/共81页 第60页/共81页 纸片扩散法操作步骤纸片扩散法操作步骤 制备接种物（制备接种物（0.50.5麦氏单

6、位麦氏单位） M-HM-H琼脂平板上（琼脂平板上（1515分钟内接种，涂抹均匀分钟内接种，涂抹均匀） 在接种好的琼脂平板上贴加纸片在接种好的琼脂平板上贴加纸片 孵育（孵育（1515分钟内反转平板，分钟内反转平板，3535C C空气孵育空气孵育） 苛养菌苛养菌5 5COCO2 2孵育孵育 判度结果和解释结果判度结果和解释结果 第61页/共81页 第62页/共81页 ESBL确认试验 第63页/共81页 第64页/共81页 可诱导的克林霉素耐药可诱导的克林霉素耐药 ( (erm-erm-介导介导) ) 常规常规D D试验试验: : 阳性阳性 15 15 g g 红霉素纸片及红霉素纸片及 2 2 g

7、 g克林霉素之间距离为克林霉素之间距离为15-26.15-26. “D Test” 阳性反应 第65页/共81页 纸片扩散法判读结果纸片扩散法判读结果 将游标卡尺置于反转的平板的背面，测量到最接近的整数毫米数。平板应距离一个黑色不反光的背景数英寸，并用反射光照明。 如果是加血的琼脂培养基，则应在透射光照射下，打开培养皿盖，从上表面测量抑菌圈。 如果被测菌是葡萄球菌或肠球菌，则应孵育24小时，再在透射光下分别观察苯唑西林或万古霉素的透明抑菌圈内有无耐甲氧西林或耐万古霉素菌落的微弱生长，遇不敏感的结果需用稀释法测定MIC法确 变形杆菌(迁移生长)以及磺胺类药物的纸片法药敏忽略薄纱样蔓延生长，微弱生长（20%或更少），克林霉素对葡萄球菌的抑菌圈内如有薄雾状菌苔应报告细菌对克林霉素耐药,不管其是否显示“D”抑菌圈 第66页/共81页 第67页/共81页 第68页/共81页 第69页/