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文档简介

1、习用金银花抑菌功能论文 【摘要】目的探讨川产习用金银花的抑菌作用。方法平板打孔法。结果川产习用金银花在体外对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、福氏志贺菌、卡他球菌有比较明显的抑制作用,对溶血性链球菌和鼠伤寒沙门菌不太敏感。结论为川产习用金银花的利用和深入研究提供了科学参考。 【关键词】川产习用品种;金银花;体外抑菌;平板打孔法 前言 金银花FlosLonicerae为常用中药,具有清热解毒、通经活血、疏风散热之功效。2005年版中国药典规定金银花为忍冬科Caprifoliaceae植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或初开的花,但我国作为中药金银花流通及使用的品种却是复杂的2

2、。四川地处西南,为我国金银花主要产区之一,品种比较复杂。为了客观评价其品质,我们测定了川产金银花主要有效成分绿原酸的含量。本实验以道地正品金银花河南密县“密银花”作对照,用平板打孔法对川产金银花品种细毡毛忍冬L.similisvar.similis,淡红忍冬L.acuminata,红腺忍冬L.hypoglauca,峨嵋忍冬L.similisvar.omeiensis进行了体外抑菌作用研究。 一、材料 1.1药物川产习用金银花细毡毛忍冬、淡红忍冬、红腺忍冬、峨嵋忍冬经成都中医药大学万德光教授鉴定,“密银花”委托河南中医学院曹继华教授采集鉴定。 1.2菌种金黄色葡萄球菌(Staphylococcu

3、saureus)、溶血性链球菌(Staphylococcushaemolyticus)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、福氏志贺菌(Shigellaflexneri)、鼠伤寒沙门菌(Salmonellatyphimurium)、肺炎球菌(pneumonococcus)由四川卫生干部学院微生物教研室提供;卡他球菌(Branhamellacatarrhlis)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)由成都中医药大学微生物教研室提供。 1.3试剂琼脂粉和蛋白胨(购自广州海洋生物有限公司)、牛肉浸出粉(购自灵武市泰运生化制品有限公司)、脱纤维兔血(自制)、分析纯

4、氯化钠等。 二、方法 2.1培养基的制备 2.1.1营养肉汤培养基取蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、蒸馏水,按中国药典规定比例混合,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,调节pH值使灭菌后为7.20.2,在115灭菌30min。 2.1.2营养琼脂培养基照上述营养肉汤培养基的处方及制法,按中国药典规定比例加入适量琼脂,调节pH值使灭菌后为7.20.2,在115灭菌30min。 2.1.3血琼脂培养基将营养琼脂培养基加热溶化,待冷至50左右,以无菌操作加入10%无菌脱纤维兔血,摇匀,置冰箱备用。 2.2菌液的制备于实验前将上述保存菌种于相应的琼脂平板上划线,于37培养箱内培养48h,取出,用白金

5、环挑起典型菌落接种营养肉汤管中,为了溶血性链球菌、肺炎球菌的生长,后二者需要在血琼脂培养基中培养,经过37下培养24h,将菌液稀释成1107cfuml-1,供实验备用。: 2.3供试液的制备称取川产习用金银花药材及“密银花”各5g,分别加蒸馏水适量,煎煮3次,第1次40min,后两次各30min,分别合并水煎液,浓缩至6ml,分别定容于消过毒的10ml容量瓶中,各得500mgml-1的供试液,冰箱中保存备用。 2.4抑菌实验将溶血性链球菌、肺炎球菌菌液0.1ml滴在血琼脂培养基上,其它菌液0.1ml滴在营养琼脂平板上,用无菌L型玻棒涂布均匀。用6mm直径打孔器打孔,每平板打孔3个,除取孔内琼脂

6、,并向每孔内加药液约0.1ml,放置37培养箱内培养1824h,观察并记录抑菌环直径。结果见表1。表1抑菌实验结果(略) 三、小结 参照微生物和检验技术判定结果,抑菌圈直径20mm为高敏;抑菌圈直径为1019mm为中敏;抑菌圈直径 【参考文献】 1国家药典委员会.中国药典,部S.北京:化学工业出版社,2005:152. 2徐炳声.中药金银花原植物的研究J.药学学报,1979,14(1):23. 3苟占平,万德光.HPLC法测定5种1变种金银花中绿原酸含量J.中国中医药信息杂志,2004,11(5):421. 4国家药典委员会.中国药典,部S.北京:化学工业出版社,2005:附录83. 5王彩玉.常用细菌培养基制备及注意事项J.卫生职业教育,2004,23(12):102. 6杨建江,韩文瑜,杜锐,等.30种中草药对耐药性猪链球菌的抑菌试验

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