发酵藻体生物量测定方法_干重法

1、1.2.3 藻体生物量测定方法采用干重法7 (DW)按式(1)计算干重。取培养液 20mL 于已烘干 至 恒重的纸片抽滤，蒸馏水冲洗两次，85烘 干至恒重，用精密电子天平称量。 DW(g/L)=M2M1201000 式(1) 式中:M1抽滤前纸片烘干至恒重质量， g;M2抽滤后纸片烘干至恒重质量，g。 1.2.4 藻胆蛋白的测定方法采用紫外分光光 度法8。 采用低温冷冻干燥获得螺旋藻干粉。准确称 取 螺 旋 藻 干 粉 0.020g ， 用 10mL 左 右 的 拉些人陪，但派头还是要做足的。从上面的例子不难看出 0.1mol/LpH 为 7.0 的磷酸盐缓冲溶液溶解。超声振荡 10min，使

2、藻粉分散并部分破碎。置于20冰 箱内冷冻 12h(或放置过夜)取出解冻，反复冻融 两次，在 3500r/min 转速下离心 10min。取出上 清液于 25mL 容量瓶中，将下层沉淀再加入磷酸 盐缓冲溶液，摇匀，超声振荡 5min，在 3500r/min 转速下离心10min。取出上清液于25mL容量瓶中。 反复上一步操作直到上清液无明显蓝色为止。定 容至 25mL，1cm 比色皿，在分光光度计上分别测 定 562、620、652nm 处的吸光度，用缓冲液做空 白。根据式(2)式(5)计算出试样中藻胆蛋白的 质量分数含量。 拉些人陪，但派头还是要做足的。从上面的例子不难看出 CPC=A620(

3、0.474A652)5.34 式(2) APC=A652(0.208A620)5.09 式(3) CPE=A562(2.41CPC)(0.849APC) 9.62 式(4) PB= (CPC+APC+CPE)V100m1000 式(5) 式中:CPC测试样中藻蓝蛋白的含量，单位 为(mg/mL);APC测试样中别藻蓝蛋白的含量， 单位为(mg/mL);CPE测试样中藻红蛋白的含 量，单位为(mg/mL);A相应波长处(562、620、 652nm)测得吸光值;PB试样中藻胆蛋白的质量 拉些人陪，但派头还是要做足的。从上面的例子不难看出 分数，单位为(g/100g);V样品定容体积，单位 为(m

4、L);m试样质量，单位为(g)。 注意:结果取平均实验结果，保留小数点后 第三位，平行实验允许误差(相对)不大于 4%。 1.2.5 螺旋藻中叶绿素 a 的测定方法采用低 温冷冻干燥获得得螺旋藻干粉9。 准确称取螺旋藻干粉 0.010g，加入一定量的 90%乙醇溶液，用超声破碎藻体细胞。镜检藻细 胞 破碎率达 90%时，于(531)恒温水浴锅中 萃取 10min。在 3500r/min 转速下离心 5min。将 上清液置于 25mL 具塞比色管中。再将沉淀加入 拉些人陪，但派头还是要做足的。从上面的例子不难看出 一定量的 90%乙醇溶液，振荡摇匀。重复上一步 操作，直到上清液无色。将上清液定容

5、至 25mL。 以 90%乙醇溶液作为空白。用 1cm 比色皿，分光 光度计测定其在 665、750nm 处的吸光值 A665、 A750。再将样品加入 3 滴 1mol/LHCl，进行酸化。 15min 后测定其在 665、750nm 处的吸光值 B665、 B750。 根据式(6)计算 chla 的浓度: chla=27.9(A665A750(B665 B750) 叶绿素含量(mgg1)=CVA100 式(6) 拉些人陪，但派头还是要做足的。从上面的例子不难看出 式中:C叶绿素 a 的浓度;A665乙醇萃取 液于波长 665nm 处的吸光值;A750乙醇萃取液 于波长 750nm 处的吸光值;B665乙醇萃取液酸 化后于波长 665nm 处吸光值;B750乙醇萃取液 酸化后于波长 750nm 处的吸光值;V乙醇萃取液 的体积(mL);A藻粉重量(g)。 1.2.6 螺旋藻培养液 pH 的测定方法用 pH 3C 数字式酸度计测定培养液的 pH。 1.2.7 光照强度的测定方法用 LX101 数字 光度表来测定光照强度，单位为 klx。 1.2.8 螺旋藻形态检测用 ECLIPSEE200 显 微镜观察细胞的形态和可能的染菌情况，并采用 拉些人陪，但派头还是要做足的。从上面的例子不难看出 平板涂 布的方法进行进一步的