糖化血红蛋白检测标准化及方法学进展

1、中国糖尿病现状中国糖尿病现状 中国糖尿病现状中国糖尿病现状 1.14亿糖尿病患者，亿糖尿病患者，4.93亿糖尿病前期人群亿糖尿病前期人群 (2010年调查结果，根据年调查结果，根据2010年年ADA糖尿病诊糖尿病诊 断标准断标准) 背景： CDC和上海内分泌研究所慢 性流行病调查 覆盖全国31省，98658成 年人群 在成年人群中，糖尿病患 者11.6%，前期人群 50.1% IDF=International Diabetes Federation 重要变革：重要变革：20102010年年ADAADA糖尿病诊治指南糖尿病诊治指南 增加糖化血红蛋白增加糖化血红蛋白 ( (HbA1c)6.5%作

2、为糖尿病的诊断标准作为糖尿病的诊断标准 source： HbA1cHbA1c标准化的目的标准化的目的 电荷差异电荷差异 离子层析法：HPLC 电泳法 结构特异性结构特异性 免疫法 亲和层析法 标准化标准化 不同方法测定 结果具有可比性 HbA1HbA1C C参考系统的种类参考系统的种类 1、国际临床化学协会(IFCC) 2、美国国家糖尿病标准化计划(NGSP) 3、日本的糖尿病协会/临床检验协会体系(JDS/JSCC) 4、瑞典的Mono-S HbA1cHbA1c检测标准化进程检测标准化进程 确认确认 IFCC 参考系统是检测参考系统是

3、检测“金标准金标准” 1985年 DCCT（糖尿病控制和综合征研究试验） 目的：评估了严格控制血糖对预防糖尿病人的慢性并发症的重要意义。 1993年 NGSP(国家糖化血红蛋白标准化计划） 目的：对HbA1c检测结果标准化，以使临床实验室的检 测结果和DCCT的结果有可比性。 1995年 IFCC（国际临床化学学会）HbA1c标准化工 作组，2002年完成参考系统建立。 目的：确定HbA1c检测的国际标准化 2010年 ADA/EASD/IDF/IFCC 国际共识 确认IFCC参考系统为全球HbA1c标准化唯一系统 各国糖化血红蛋白标准化计划各国糖化血红蛋白标准化计划 同一个样本，结果差异大同

4、一个样本，结果差异大 瑞典美国 NGSPNGSP和和IFCCIFCC的区别的区别 HbA1cHbA1c国际标准化国际标准化 IFCC建立最高溯源标准建立最高溯源标准 HbA1cHbA1c NGSPNGSP缺乏统一公认的标准物质和参考方法。缺乏统一公认的标准物质和参考方法。 制备高度纯化的一级标准物质制备高度纯化的一级标准物质 明确定义明确定义HbA1cHbA1c 建立特异性检测建立特异性检测HbA1cHbA1c的方法的方法 IFCC IFCC 建立目标建立目标 ADA/EASD/IDF/IFCCADA/EASD/IDF/IFCC 国际共识国际共识( (20102010年年) ) 确认确认IFC

5、C参考系统是标准化唯一参考系统参考系统是标准化唯一参考系统 Source: Consensus statement, DIABETES CARE, VOLUME 30, NUMBER 9, SEPTEMBER 2007, 2399-2400 1.A1C test results should be standardized worldwide, including the reference system and results reporting. 2. The new IFCC reference system for A1C represents the only valid ancho

6、r to implement standardization of the measurement. 3. A1C results are to be reported worldwide in IFCC units (mmol/mol) and derived NGSP units (%), using the IFCC-NGSP master equation. Dual reporting 4. If the ongoing “average plasma glucose study” fulfills its a priorispecified criteria, an A1C-der

7、ived average glucose (ADAG) value calculated from the A1C result will also be reported as an interpretation of the A1C results. IFCCIFCC参考系统是参考系统是HbA1cHbA1c标准化唯一的检测标准标准化唯一的检测标准 糖化血红蛋白实验室检测指南糖化血红蛋白实验室检测指南 ( (20132013年年8 8月月) ) 中国糖尿病杂志中国糖尿病杂志 IFCCIFCC参考系统是参考系统是HbA1cHbA1c测定标准化唯一有效的参考系统。测定标准化唯一有效的参考系统。

8、应用国际标准物质。应用国际标准物质。 现行的现行的NGSPNGSP可溯源到可溯源到IFCCIFCC参考系统参考系统 IFCC 参考系统的建立参考系统的建立 科学家 （欧洲-美国-日本-澳大利亚） IFCC 参考方法 欧 盟 一级参考一级参考 实验室实验室 IFCCIFCC参考方法流程（特异性检测）参考方法流程（特异性检测） 2. 2. 用用Agilent HPLCAgilent HPLC进进 行酶切肽链粗品分离行酶切肽链粗品分离 HPLCHPLC* * 3. 3. 用质谱定量分离糖用质谱定量分离糖 化和非糖化肽链化和非糖化肽链 mass spectrometer mass spectromet

9、er* * 1. 1. 血红蛋白酶切血红蛋白酶切 非糖化非糖化 (HbA0) N-(HbA0) N-端六肽端六肽 糖化糖化 (HbA1c) (HbA1c) N-端六肽端六肽 Process patented by Roche * Used in our Penzberg facilities 卫生部临检中心卫生部临检中心HbA1cHbA1c室间数据（室间数据（20132013年）年） 罗氏检测平台的室间罗氏检测平台的室间CVCV为为 2.52.5和和3.173.17 Source: ngsp pt 2013 11%11% 11%11% 54%54% 24%24% 31%31% 67%67% 2

10、%2% n免疫法 n离子交换色谱 n电泳法 n亲和层析色谱 19951995年年 （889889家）家） 20132013年年 （32403240家）家） CAP HbA1c CAP HbA1c 室间比对用户方法学统计（室间比对用户方法学统计（2013.102013.10） 免疫法操作便捷、通量大、成本低，已成为国际的主流方法免疫法操作便捷、通量大、成本低，已成为国际的主流方法 全球：参加全球：参加 CAPCAP HbA1cHbA1c室间比对用户中免疫法是主流室间比对用户中免疫法是主流 32403240家参与用户中免疫法占家参与用户中免疫法占67%67%（2013 2013 年年 PTPT）

11、423 家 413 家 176 家 844 家 FDAFDA诊断声明诊断声明（2013/5/23） 罗氏是唯一拥有罗氏是唯一拥有CE和和FDA诊断声明诊断声明的厂商的厂商 诊断声明说明：诊断声明说明： - - 精密度精密度 & & 准确性准确性 - - 抗干扰能力抗干扰能力 罗氏免疫检测是首家可用于诊断的罗氏免疫检测是首家可用于诊断的HbA1cHbA1c试剂，其他试剂目前只能用于血糖试剂，其他试剂目前只能用于血糖 监测监测 变异体特异性识别是变异体特异性识别是HPLCHPLC等方法等方法短期内的技术门槛短期内的技术门槛 /NewsEvents/Newsroom

12、/PressAnnouncements/ucm353653.htm 诊断声明强调抗变异体及衍生物干扰能力诊断声明强调抗变异体及衍生物干扰能力 FDA 510(k) :121291 510(k)510(k)文件评估变异体文件评估变异体 C C，D D，S S，E E 及及 A2A2出现时的检测结果出现时的检测结果 可靠而正确的检测结果可靠而正确的检测结果 免疫竞争抑制法检测 HbA1c 检测检测IFCCIFCC参考系统定义的参考系统定义的“真正的真正的”HbA1cHbA1c 抗体的独特设计保证了试剂具有卓越的抗干扰能力 GlcValHisLeuThrProGlu 罗氏抗体识别罗氏抗体识别 罗氏罗

13、氏-全球全球 HbA1cHbA1c标准化领导者标准化领导者 和和 IFCC紧密同行紧密同行 拥有拥有IFCCIFCC参考方法专利证书和参考方法专利证书和IFCCIFCC溯源性证书溯源性证书1 1 向向IFCCIFCC提供一级参考物质提供一级参考物质2 2 特异性检测特异性检测IFCCIFCC定义的真正的定义的真正的HbA1cHbA1c（卓越的抗干扰性能）（卓越的抗干扰性能）3 3 Thank you for your attentionThank you for your attention 重要变革：重要变革：20102010年年ADAADA糖尿病诊治指南糖尿病诊治指南 增加糖化血红蛋白增加

14、糖化血红蛋白 ( (HbA1c)6.5%作为糖尿病的诊断标准作为糖尿病的诊断标准 source： HbA1HbA1C C参考系统的种类参考系统的种类 1、国际临床化学协会(IFCC) 2、美国国家糖尿病标准化计划(NGSP) 3、日本的糖尿病协会/临床检验协会体系(JDS/JSCC) 4、瑞典的Mono-S HbA1cHbA1c检测标准化进程检测标准化进程 确认确认 IFCC 参考系统是检测参考系统是检测“金标准金标准” 1985年 DCCT（糖尿病控制和综合征研究试验） 目的：评估了严格控制血糖对预防糖尿病人的慢性并发症的重要意义。 1993年 NGSP(国家糖化血红蛋白标准化计划） 目的：对HbA1c检测结果标准化，以使临床实验室的检 测结果和DCCT的结果有可比性。 1995年 IFCC（国际临床化学学会）HbA1c标准化工 作组，2002年完成参考系统建立。 目的：确定HbA1c检测的国际标准化 2010年 ADA/EASD/IDF