芳酸及其酯类药物的分析

1、第六章第六章 芳酸及其酯类药物的分析芳酸及其酯类药物的分析 Analysis of Aromatic carboxylic acids 为供为供e基基，如，如CH3,NH2时，时，酸性酸性 取代基位置：取代基位置：邻位邻位OH取代酸性强，能与邻取代酸性强，能与邻 位位COOH形成分子内氢键形成分子内氢键 （二）主要理化性质（二）主要理化性质 水杨酸水杨酸 阿司匹林阿司匹林 苯甲酸苯甲酸 HCl 芳酸芳酸 H2CO3 苯酚苯酚 2. 溶解性溶解性: 均为固体，有一定熔点。除钠盐溶于水，均为固体，有一定熔点。除钠盐溶于水， 其余不溶。其余不溶。 3. UV和和IR光谱特性：光谱特性：分子结构中具有

2、苯环分子结构中具有苯环，有有UV和和 IR特征吸收。特征吸收。 4. 芳伯氨基和酚羟基特性：芳伯氨基和酚羟基特性： 5. 水解特性：水解特性：ASA、双水杨酯及其制剂应检查水杨酸双水杨酯及其制剂应检查水杨酸， 对氨基水杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚。对氨基水杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚。 （一）典型药物结构一）典型药物结构 苯甲酸及其钠盐苯甲酸及其钠盐 二二、苯甲酸类、苯甲酸类 酸性酸性 （弱碱性）（弱碱性）紫外吸收紫外吸收 COOH(Na) COOH(CH3CH2CH2)2NSO2 丙磺舒丙磺舒 酸性酸性紫外吸收紫外吸收S元素元素 HOCOOC2H5 羟苯乙酯羟苯乙酯甲芬那酸甲

3、芬那酸 COOH NH H CH3 CH3 （二）主要理化性质（二）主要理化性质 1.1.溶解性溶解性: : 固体，有一定熔点。固体，有一定熔点。 除钠盐溶于水，其余不溶。除钠盐溶于水，其余不溶。 2.2.UVUV和和IRIR光谱特性：光谱特性： 3.3.分解反应特性：分解反应特性：苯甲酸钠分解为苯甲酸苯甲酸钠分解为苯甲酸 丙磺舒分解为丙磺舒分解为SOSO2 2 4.4.酸性：酸性：游离的羧基游离的羧基 三、其他芳酸类三、其他芳酸类 ( (一一) )典型药物结构典型药物结构 ClOC CH3 CH3 COOC2H5 氯贝丁酯氯贝丁酯 布洛芬布洛芬 CHCH2CH CH3 CH3 COOH CH

4、3 COOH R R R ( (二二) )主要理化性质主要理化性质 1.1.溶解性：溶解性：氯贝丁酯为液体；布洛芬为固体，氯贝丁酯为液体；布洛芬为固体， 有一定熔有一定熔 点；水中不溶，有机溶剂中易溶点；水中不溶，有机溶剂中易溶 2.2.UVUV和和IRIR特征吸收光谱：特征吸收光谱：苯环苯环 3.3.水解：水解：氯贝丁酯具酯键氯贝丁酯具酯键 4.4.酸性：酸性：布洛芬布洛芬 一、与铁盐反应一、与铁盐反应 1. 1. 含有含有酚羟基酚羟基药物可与药物可与FeClFeCl3 3反应；能与反应；能与FeClFeCl3 3反应反应 不一定不一定含酚羟基含酚羟基。 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 OH

5、 R Ar-OH + FeCl3 紫堇色紫堇色配位化合物配位化合物 pH46 AspirinAspirin 水解水解 SASA FeClFeCl3 3 紫堇色紫堇色 PAS-NaPAS-Na FeClFeCl3 3 紫红色紫红色 SASA 中性或弱酸性中性或弱酸性 紫堇色紫堇色 FeClFeCl3 3 COOHCOO OHO FeFe + 4FeCl3 ( )2 3 + 12HCl6 赭色赭色2.2.苯甲酸（中性或碱性水溶液）苯甲酸（中性或碱性水溶液） FeClFeCl3 3 3.3.丙磺舒丙磺舒 NaOHNaOH 钠盐钠盐 pH5.0-6.0pH5.0-6.0 FeClFeCl3 3 米黄色

6、米黄色 4.4.氯贝丁酯氯贝丁酯 碱水解碱水解 盐酸羟胺盐酸羟胺 羟肟酸盐羟肟酸盐 羟肟酸铁羟肟酸铁 (紫色紫色) 弱酸条件弱酸条件 FeClFeCl3 3 二、重氮化二、重氮化- -偶合反应偶合反应 含有芳伯胺基或潜在芳伯胺基的药物均可反应。含有芳伯胺基或潜在芳伯胺基的药物均可反应。 -萘酚 橙黄橙黄猩红猩红 1. 1. 直接反应直接反应 对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠 2. 2. 水解后反应水解后反应 贝诺酯具有潜在芳伯氨基贝诺酯具有潜在芳伯氨基 三、水解反应三、水解反应 1.AspirinNa2CO3 SA -Na CH3COONa H SA CH3COOH mp:156161 2.双水杨

7、酯双水杨酯 碱水解碱水解 酸化酸化 SA mp：158 溶于醋酸铵试液溶于醋酸铵试液 1.苯甲酸盐加热分解生成苯甲酸盐加热分解生成苯甲酸升华物苯甲酸升华物 2.丙磺舒与丙磺舒与NaOH熔融分解成熔融分解成Na2SO3，经硝酸氧化成经硝酸氧化成 Na2SO4 3. 丙磺舒高温加热分解丙磺舒高温加热分解，生成生成SO2气体，有臭味气体，有臭味 四、分解产物反应四、分解产物反应 (SO42-的反应）的反应） 1. 测定测定max ； ；min 例：布洛芬用 例：布洛芬用0.4%NaOH溶液制备溶液制备0.25mg/ml； max 265nm, 273nm; min245nm, 271nm。 。 2.

8、 在在max 处测定一定浓度供试液的吸收度处测定一定浓度供试液的吸收度A 例：羟苯乙酯，例：羟苯乙酯，5g/ml max =295nm; A=0.48 五、紫外吸收光谱法五、紫外吸收光谱法 3. 在在max 处测定供试液的处测定供试液的百分吸收系数百分吸收系数 例：贝诺酯在例：贝诺酯在max=240nm; = 730760 4. 在在规定的波长规定的波长测定测定吸收度比值吸收度比值 例：二氟尼柳例：二氟尼柳 20g/ml; A251/A315 = 4.24.6 Ecm %1 1 六、红外吸收光谱法六、红外吸收光谱法 水杨酸的红外吸收图谱水杨酸的红外吸收图谱 37002900cm-1 N-H、

9、O-H 1660cm-1 C=O 1610,1570 1480,1440 C=C 775cm-1 Ar-H 37002900c m-1 N-H、 O-H 1640cm-1 N-H 1580cm-1 1500cm-1 C=C 1300cm-1 C-N 1188cm-1 C-O 对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱 第三节第三节 特殊特殊杂质检查杂质检查 AspirinAspirin 生产工艺生产工艺 ONa CO2 加压， ONa COONa OH COOH H+ OH -CO2 副产物副产物 COOH OC O CH3 (CH3CO)2O H2SO4,7075 C 。 AS

10、A SA SASA炽灼残渣炽灼残渣 苯酚苯酚 易碳化物易碳化物 溶液的澄清度溶液的澄清度 重金属重金属 Aspirin 一、一、 AspirinAspirin中特殊杂质的检查中特殊杂质的检查 1.1.溶液的澄清度：溶液的澄清度：主要检查主要检查NaNa2 2COCO3 3中不溶物中不溶物 杂质：有苯酚、醋酸苯酯、水杨酸苯酯等杂质：有苯酚、醋酸苯酯、水杨酸苯酯等 Aspirin可溶于可溶于Na2CO3 ，而杂质不溶，而杂质不溶 由一定量的由一定量的Aspirin在碳酸钠试液中应溶解澄清来加以在碳酸钠试液中应溶解澄清来加以 控制控制 酸性：芳酸酸性：芳酸 碳酸碳酸 酚酚 2. 游离水杨酸检查：游离

11、水杨酸检查： SA：具酚：具酚-OH， 可与可与Fe3+呈色呈色 Aspirin：无酚：无酚-OH，不与，不与Fe3+呈色呈色 比色法适用：原料药、片剂、肠溶片比色法适用：原料药、片剂、肠溶片 HPLC适用：胶囊、泡腾片、栓剂适用：胶囊、泡腾片、栓剂 3. 易炭化物检查：易炭化物检查： 检查检查Aspirin中能被硫酸炭化显色的低分子有机杂质中能被硫酸炭化显色的低分子有机杂质 采用与标准比色液比色的方法检查。采用与标准比色液比色的方法检查。 比色法比色法 主要检查成品药物中可能残留的间氨基酚。间氨基主要检查成品药物中可能残留的间氨基酚。间氨基 酚易氧化呈色，而且有酚易氧化呈色，而且有毒性毒性，

12、因此要严格控制。，因此要严格控制。 双相滴定法：利用双相滴定法：利用间氨基酚溶于乙醚，呈碱间氨基酚溶于乙醚，呈碱 性性，样品用乙醚提取样品用乙醚提取, HCl 滴滴 定定,V0.3ml HPLC （USP）：内标法，以磺胺作内标：内标法，以磺胺作内标 二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查 方法方法 三、氯贝丁酯中特殊杂质的检查三、氯贝丁酯中特殊杂质的检查 主要检查成品药物中残留的对氯酚原料和挥发性杂质主要检查成品药物中残留的对氯酚原料和挥发性杂质 GC HPLC：以：以4-乙氧基酚作内标乙氧基酚作内标 2. 挥发性杂质的检查方法挥发性杂质的检查方法 ： GC，色

13、谱条件同对氯酚的检查色谱条件同对氯酚的检查 1. 对氯酚检查对氯酚检查 一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法 原理：药物具原理：药物具- -COOHCOOH； 第四节第四节 含量测定含量测定 苯甲酸苯甲酸pKapKa 4.20 4.20 水杨酸水杨酸pKapKa 2.98 2.98酸性较强酸性较强 C OH OH O 因此，可采取直接滴定法直接滴定法 （一）直接滴定法（一）直接滴定法 Ch.PCh.P. .（20102010版）版） v pKapKa 3-6 3-6 的药物溶于中性醇的药物溶于中性醇, ,可可直接用直接用NaOHNaOH滴定滴定 v pKapKa 6-9 6-9 的药物要用的药物要用非

14、水溶液滴定法非水溶液滴定法 （以（以AspirinAspirin为例）为例） 中性乙醇 COOH OCOCH3 NaOH 20以下 COONa OCOCH3 H2O 乙醇作用：溶解乙醇作用：溶解ASAASA；防止防止ASAASA在水溶在水溶 液中滴定过程易水解液中滴定过程易水解 中性乙醇：对指示剂中性乙醇：对指示剂( (酚酞酚酞) )而言为中性，可消除滴定误差而言为中性，可消除滴定误差 本法特点：简单本法特点：简单 应用：应用：多国药典用于阿司匹林、双水杨酯、苯甲酸、丙磺多国药典用于阿司匹林、双水杨酯、苯甲酸、丙磺 舒、布洛芬测定；舒、布洛芬测定；USPUSP和和BPBP还用于甲芬那酸的测定。

15、还用于甲芬那酸的测定。 （二）水解后剩余滴定法（二）水解后剩余滴定法 USPUSP（3232版）版） 1.原理：原理： 2.方法：方法： 供试品供试品 1.5g 0.5mol/LNaOH 50.0ml 煮沸煮沸 10 放冷放冷 酚酞酚酞0.25mol/L H2SO4 (V) 空空 白白 (V0) 定、过量定、过量 OCOCH3 COOH 2NaOHH2O OH COONa CH3COONa 2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O 3.讨论：空白试验的目的讨论：空白试验的目的 （SA超过限量时也不适用超过限量时也不适用） 4.计算：计算：T、含量的计算含量的计算 I 份份NaOH 供试品

16、供试品 I 份份NaOH 空白空白 VO (Vo-V)(Vo-V)相当于相当于AsipirinAsipirin消消 耗耗NaOHNaOH的的mlml数数 剩余剩余V ）（ 含含量量100 W TFVV0 （三）两步滴定法（三）两步滴定法 用于：阿司匹林片用于：阿司匹林片/ /肠溶片的含量测定肠溶片的含量测定（片剂中有稳定剂）（片剂中有稳定剂） 1. 原理：原理： 水解产物水解产物 水杨酸水杨酸SASA HAcHAc HOCCOOH CH2COOH CH2COOH 枸橼酸枸橼酸 HOCHCOOH CHCOOHHO 酒石酸酒石酸 为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法为了避免这些酸类的干扰，采用两

17、步滴定法 第一步第一步 中和中和 Aspirin + NaOH钠盐钠盐 + H2O 水解产物水解产物SA + NaOHSA-Na + H2O 酸性稳定剂酸性稳定剂+ NaOH 中性盐中性盐 第二步第二步 水解与测定水解与测定 COONa OCOCH3 NaOH COONa OH NaAc H2O 2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O 2.方法方法 第一步：第一步： 中和中和 供试品片供试品片 粉适量粉适量 中性乙醇中性乙醇 20ml 酚酞酚酞 NaOH（0.1mol/L) 滴定至粉红色滴定至粉红色 第二步：水解与测定第二步：水解与测定 中和后的中和后的 供试液供试液 0.1mol/L

18、NaOH 40ml 水浴水浴 15 0.05mol/L H2SO4（V） 空空 白白 （V0） 3.讨论讨论 适用于阿司匹林片、肠溶片适用于阿司匹林片、肠溶片 SA超过限量时也适用超过限量时也适用 4.计算计算 片片标标示示含含药药量量 片片实实测测含含药药量量 标标示示量量 / / TFV-V0 ）实实测测药药物物质质量量（ w w 片片数数 标标示示量量 ）（ 标标示示量量 ）（ 标标示示量量100 W WTFV-V 100 w w FTV-V 00 二、双相滴定法二、双相滴定法 1. 原理原理（如苯甲酸钠的含量测定：（如苯甲酸钠的含量测定： ） 不溶于水，终点不溶于水，终点pHpH突跃不

19、突跃不 明显，不易观察。易溶于明显，不易观察。易溶于 有机溶剂有机溶剂 易溶于水易溶于水 碱性碱性 在水相和有机相中滴定在水相和有机相中滴定 COONa + HCl + NaCl COOH 2.方法方法 溶剂：水溶剂：水乙醚乙醚 指示剂：甲基橙指示剂：甲基橙 滴定液：滴定液：0.5mol/L HCl 水相水相 乙醚相乙醚相 滴定前：苯甲酸钠甲基橙滴定前：苯甲酸钠甲基橙 （黄色黄色） 滴定中：苯甲酸钠甲基橙滴定中：苯甲酸钠甲基橙NaCl （黄色黄色） 苯甲酸苯甲酸 终点：甲基橙稍过量终点：甲基橙稍过量HClNaCl苯甲酸苯甲酸 （橙红色橙红色） HCl 乙醚乙醚( (苯甲酸苯甲酸) ) H H2

20、 2O(O(苯甲酸钠苯甲酸钠) ) 0.5mol/L 25ml1.5g 50ml 2d 甲基橙甲基橙 橙红色橙红色 分取乙醚层，分取乙醚层，5ml5ml水洗涤，洗液并入水层，水洗涤，洗液并入水层， 加乙醚加乙醚20ml20ml，继续用，继续用HClHCl滴定至水层显持续的橙红色滴定至水层显持续的橙红色 原因：原因：将溶于乙醚中的少量苯甲酸钠提取至水中将溶于乙醚中的少量苯甲酸钠提取至水中 三、三、亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法 原理：原理：对氨基水杨酸钠具芳伯氨基对氨基水杨酸钠具芳伯氨基 在在HCl中与中与 NaNO2发生重氮化反应发生重氮化反应 Ar-NH2 + NaNO2 + 2HClAr-N

21、2Cl + NaCl + 2H2O 此法在下章重点讨论此法在下章重点讨论 100 %1 1 Ecm X X A C （一）直接紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法 原料药：对照品比较法原料药：对照品比较法 片片 剂：吸收系数法剂：吸收系数法 标示量标示量 标示量标示量 标示量标示量 100 W100E WDA 100 W W DC 1 cm1 XX 四、紫外分光光度法四、紫外分光光度法 原理：原理：酸性杂质对酸性杂质对- -氯酚等也有吸收，干扰测定。氯酚等也有吸收，干扰测定。 方法：可采用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，在甲醇溶方法：可采用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，在甲醇溶 液

22、中，液中，226226nmnm波长处，波长处，采用对照品比较法测定含量。采用对照品比较法测定含量。 氯贝丁酯的测定氯贝丁酯的测定 （二）离子交换（二）离子交换- -紫外分光光度法紫外分光光度法 ClOC CH3 CH3 COOC2H5 洗脱液洗脱液3： CHCl3 洗脱液洗脱液1 1：CHCl3 硅藻硅藻土，土， FeClFeCl3 3- -尿素尿素 玻璃棉玻璃棉 硅藻土硅藻土- -磷酸磷酸 洗脱液洗脱液2 2：冰：冰HAcHAc- -乙醚乙醚 1.SA1.SA的限量测定的限量测定： 供试液：供试液：CHCl3 （三）柱分配色谱三）柱分配色谱- -紫外分光光度法紫外分光光度法 讨论：讨论： S

23、A与与FeClFeCl3 3- -尿素生成紫色水杨酸铁配位化合物，保尿素生成紫色水杨酸铁配位化合物，保 留于硅藻土色谱柱上留于硅藻土色谱柱上 用用CHCl3洗脱时，高浓度尿素使配位化合物移动较慢，洗脱时，高浓度尿素使配位化合物移动较慢， Asipirin先洗脱出先洗脱出 以冰醋酸的乙醚溶液洗脱时，紫色配位化合物解离，以冰醋酸的乙醚溶液洗脱时，紫色配位化合物解离， SA游离出来，游离出来，继而被继而被CHClCHCl3 3洗脱洗脱 max=306nm ， A供 供 A标 标 玻璃棉玻璃棉 供试品液：供试品液：CHCl3-HCl 洗脱液洗脱液1： CHCl3 洗脱液洗脱液2：冰：冰HAc-CHCl

24、3 10ml 洗脱液洗脱液3：冰：冰HAc-CHCl3 85ml 硅藻土硅藻土-NaHCO-NaHCO3 3 2.2.AspirinAspirin的含量测定的含量测定 在硅藻土在硅藻土-NaHCO-NaHCO3 3色谱柱中，色谱柱中，AspirinAspirin及及SASA成钠盐保留于柱上，成钠盐保留于柱上， 先用先用CHClCHCl3 3除去中性或碱性杂质，再用醋酸酸化，使除去中性或碱性杂质，再用醋酸酸化，使AspirinAspirin游游 离，以离，以CHClCHCl3 3洗脱后测定其含量。洗脱后测定其含量。 Ch.P.(2010)Ch.P.(2010)：阿司匹林肠溶胶囊、泡腾片、栓剂等：

25、阿司匹林肠溶胶囊、泡腾片、栓剂等 含量测定采用此法含量测定采用此法 USPUSP（2929）ASAASA片、对氨基水杨酸钠、甲芬那酸、布片、对氨基水杨酸钠、甲芬那酸、布 洛芬、丙磺舒等及其制剂，采用此法洛芬、丙磺舒等及其制剂，采用此法 五、五、HPLCHPLC 阿司匹林肠溶胶囊的含量测定阿司匹林肠溶胶囊的含量测定 色谱条件：色谱条件：色谱柱色谱柱C C18 18； ；检测波长检测波长2 276nm76nm 流动相为流动相为乙腈乙腈- -四氢呋喃四氢呋喃- -冰醋酸冰醋酸- -水水(20:5:5:70);(20:5:5:70); 系统适用性试验：系统适用性试验：n n3000; 3000; As

26、pirin Aspirin与水杨酸钠的与水杨酸钠的R R1.51.5 计算：计算： 标标示示量量 标标示示量量 对对 供供 对对 100 W W D A A C 一、血清中一、血清中AspirinAspirin和和SASA的的HPLCHPLC 色谱条件：色谱条件： 色谱柱为色谱柱为ODS-CODS-C18 18(150mm (150mm 4.6mm, 5m) 4.6mm, 5m) 流动相为甲醇流动相为甲醇- -水水- -正丁醇正丁醇-磷酸磷酸(30(300 :200 :100 :200 :10：0.05)0.05) 检测波长为检测波长为237237nmnm；内标物为苯甲酸内标物为苯甲酸 血清样

27、品预处理血清样品预处理 血清血清100100ll + HClO450l + l + 不同浓度不同浓度AspirinAspirin和和SA + SA + 内标内标 液液 涡旋混合涡旋混合2 2min min 离心离心5 5min min 取上清液取上清液20 20 ll进样。进样。 第五节第五节 体内药物分析体内药物分析 回归方程：回归方程：以峰高比（以峰高比（H H标 标/ /H H内内）对浓度回归 ）对浓度回归 AspirinAspirin的回归方程：的回归方程：Y =5.8Y =5.81010-3 -3 +5.29 +5.291010-2 -2X r= 0.9996 X r= 0.9996

28、 SA SA的回归方程：的回归方程：Y = 6.0Y = 6.01010-3 -3 + 8.33 + 8.331010-2 -2X r = 0.9981 X r = 0.9981 Aspirin Aspirin和和SASA的线性范围分别为：的线性范围分别为：1 12020gg/ml; 2/ml; 23030gg/ml/ml 回收率：回收率：空白血清空白血清 + + 五种不同浓度测定，五种不同浓度测定， AspirinAspirin为为96.0%96.0%106.0%;106.0%; SA SA为为92.0%92.0%119.5%;119.5%;（五种不同浓度均应在线性范围内）（五种不同浓度均应

29、在线性范围内） 色谱条件：色谱条件： 色谱柱为色谱柱为LiChrospher100RP(125mm4mm, 5m) 流动相为流动相为25%乙腈溶液乙腈溶液-醋酸缓冲溶液梯度洗脱。醋酸缓冲溶液梯度洗脱。 检测波长为检测波长为254nm；内标物为依他尼酸。内标物为依他尼酸。 尿样品预处理：尿样品预处理： C C8 8固相萃取柱，固相萃取柱，100100mgmg填料填料/ /mlml用甲醇用甲醇1.01.0ml,ml,后用后用0.50.5mlml蒸馏水活化。蒸馏水活化。 2.02.0mlml尿样尿样 + + 内标内标300300l(10g/ml) 上柱上柱 1.0ml水洗脱生物水洗脱生物 杂质杂质

30、再用甲醇再用甲醇0.5ml洗脱保留在柱上的丙磺舒和内标。洗脱液洗脱保留在柱上的丙磺舒和内标。洗脱液 0.45m浸滤膜滤过，取浸滤膜滤过，取5l直接进样分析。直接进样分析。 二、尿中丙磺舒的固相萃取净化二、尿中丙磺舒的固相萃取净化- -HPLCHPLC ( (运动员违禁药物运动员违禁药物) ) 线性关系：线性关系： 取空白尿样取空白尿样2.0ml +不同浓度丙磺舒不同浓度丙磺舒+ +内标液，按内标液，按 上述方法分析上述方法分析( (浓度范围为浓度范围为0.1g/ml100g/ml)A A丙 丙/ /A A内内对 对C C丙 丙回归 回归 回收率：回收率： 丙磺舒为丙磺舒为100%100%3%(

31、3%(n=14)n=14)； 内标为内标为101%101%3%(3%(n=12)n=12)； 三、三、HPLCHPLC测定人血浆中布洛芬含量测定人血浆中布洛芬含量 色谱条件：色谱条件： 色谱柱为色谱柱为Shim-packCLC-ODS(150mm6mm, 10m) 预柱为预柱为YWG-C18；流动相为甲醇流动相为甲醇-20mol/L磷酸二氢钾缓磷酸二氢钾缓 冲溶液冲溶液(70:30, pH=4.0); 流速为流速为1.0ml/min; 检测波长为检测波长为221nm；内标物为肉桂酸内标物为肉桂酸。 样品预处理：样品预处理： 取肝素抗凝血浆取肝素抗凝血浆0 0。2424ml+ml+内标液内标液+

32、 +甲醇甲醇0.50.5ml,ml,振荡混匀，离心振荡混匀，离心 (1000(1000r/min)15min,r/min)15min,取上清液取上清液1010l直接进样分析。直接进样分析。 布洛芬和肉桂酸布洛芬和肉桂酸tR为为5.15和和2.85min。 回归方程：回归方程： 以对照品与内标的峰高比对浓度回归以对照品与内标的峰高比对浓度回归 其回归方程为：其回归方程为：Y = 4.05 10-2C 2.0 10-3, r = 0.9999。 回收率测定：回收率测定： 空白血浆空白血浆 + 布洛芬对照品高、中、低三种浓度，按样品处理项下布洛芬对照品高、中、低三种浓度，按样品处理项下 测定，测得平

33、均回收率为测定，测得平均回收率为99.2 1.6%1.6%。 精密度：精密度： 日内精密度为日内精密度为RSDRSD1.8%1.8%；日间精密度为日间精密度为2.8%2.8%。 人血浆样品测定：人血浆样品测定： 受试者受试者8 8人；给药剂量人；给药剂量600600mgmg，给药后给药后0.50.5，0.75 0.75 1.0，1.5，2.0，3.0， 4.0，6.0，8.0，10.0，12.0h自肘静脉取血自肘静脉取血1.5ml，肝素抗凝，按肝素抗凝，按“样样 品处理方法品处理方法”项下操作，求算血药浓度。项下操作，求算血药浓度。 思考与练习思考与练习 A A型题型题 1 1阿司匹林中检查的特殊杂质是阿司匹林中检查的特殊杂质是 A.A.水杨醛水杨醛 B.B.砷盐砷盐 C.C.水杨酸水杨酸 D.D.苯甲酸苯甲酸 E.E.苯酚苯酚 2 2对氨基水杨酸钠中检查的特殊杂质是对氨基水杨酸钠中检查的特殊杂质是 A.A.水杨醛水杨醛 B. B. 间氨基酚间氨基酚 C.C.水杨酸水杨酸 D.D.苯甲酸苯甲酸 E.E.苯酚苯酚 3 3两步滴定法测定阿司匹林片剂的依据是两步滴定法测定阿司匹林片剂的依据是 A.A.剩余滴定法剩余滴定法 B.B.羧基的酸性羧基的酸性 C.C.酸水解定量消耗碱液酸水解定量消耗碱液 D.D.其酯水解定量消耗碱液其酯水解定量消耗碱液 E.E.利用水解产物的酸