尿中δ—氨基—γ—酮戊酸δ—ALA的测定

1、 临床意义临床意义 铅吸收或铅中毒时，尿中铅吸收或铅中毒时，尿中-氨基氨基-酮戊酮戊 酸（酸（-ALA-ALA）的含量增高，故测定尿中）的含量增高，故测定尿中- ALAALA的含量，有助于了解铅吸收和铅中毒的含量，有助于了解铅吸收和铅中毒 的诊断。的诊断。 特异性，灵敏性均较差特异性，灵敏性均较差 乙酸乙酯萃取乙酸乙酯萃取对二氨基苯甲醛基比色法对二氨基苯甲醛基比色法 尿中尿中-ALA + -ALA + 乙酰乙酸乙酯乙酰乙酸乙酯 吡咯化合物吡咯化合物 （经乙酸乙酯提取）（经乙酸乙酯提取）+ +显色剂（对二甲氨基苯甲醛显色剂（对二甲氨基苯甲醛) ) 红色化合物红色化合物 100 PH=4.6 l

2、分光光度计；分光光度计； l 水浴锅，水浴锅， l 电炉；电炉； l 离心机离心机(1500-2000r/min)(1500-2000r/min)； l 具塞比色管具塞比色管10m1 2010m1 20支；支； l 移液管移液管2m1 12m1 1支；支； l 吸管吸管10m1 410m1 4支、支、5m1 15m1 1支、支、2m1 22m1 2支；支； l 离心管离心管10m1 1010m1 10支。支。 l 乙酰乙酸乙酯；乙酰乙酸乙酯； l 乙酸乙酯；乙酸乙酯； l 醋酸盐缓冲液；醋酸盐缓冲液； l 对对二甲氨基苯甲醛显色剂二甲氨基苯甲醛显色剂 ； l ALAALA标准溶液；标准溶液；

3、l 标准色列制备与标准曲线绘制标准色列制备与标准曲线绘制 l 尿样测定：测定前须用比重计测定尿比重尿样测定：测定前须用比重计测定尿比重 试剂 管号 012345样品管空白管 ALA标液（ml）0.00.10.30.50.71.0 尿样1.0尿样1.0 蒸馏水（ml）2.01.91.71.51.31.01.01.0 乙酸缓冲液（ml）2.0 乙酰乙酸乙酯（ml）0.4 乙酸缓冲乙酸缓冲 液液0.40.4 混匀，沸水中加热10分钟，冷却至室温 乙酸乙酯（ml）4.0 加塞振摇1分钟，静置分层离心离心5 5分钟分钟 提出液2ml于另具赛比色管中，加2ml显色剂，加塞振摇，静置10分钟 分光光度计 ，

4、波长554nm ，零管参比零管参比乙酸乙酯参比乙酸乙酯参比 1 1标准曲线的绘制标准曲线的绘制 2 2样品管吸光度减去尿样空白管吸光度，查标准曲样品管吸光度减去尿样空白管吸光度，查标准曲 线得样品管中线得样品管中ALAALA含量含量(g)(g) 3 3计算公式：计算公式： （1 1）尿样比重）尿样比重在正常范围（在正常范围（1.010-1.0351.010-1.035）内）内 尿中尿中 ALA(mgALA(mgL)=L)=样品管中样品管中 ALAALA含量含量(g) (g) （2 2）尿样比重）尿样比重不在正常范围内不在正常范围内 尿中尿中ALA(mmo1ALA(mmo1L)= L)= 0.0

5、076 0.0076 样品管含量（g ） 1（尿样） 1.020-1.000 尿比重-1.000 乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好为近期产品。显色剂宜新鲜配制。乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好为近期产品。显色剂宜新鲜配制。 加入显色剂后，静置加入显色剂后，静置1010分钟，应在半小时内完成比色。分钟，应在半小时内完成比色。 尿样易腐败，可导致尿样易腐败，可导致 pHpH增高，影响测定结果。如不能及时测增高，影响测定结果。如不能及时测 定，应将尿样保存在冰箱中。定，应将尿样保存在冰箱中。 乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好近期产品，显色剂宜新鲜配制乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好近期产品，显色剂宜新鲜配制 参比液有两种：标准色列：零管参比液有两种：标准色列：零管 样品管：乙酸乙酯样品管：乙酸乙酯 l 乙酰乙酸乙酯；乙酰