薤白提取物的抗氧化作用研究

1、薤白提取物的抗氧化作用研究,/1i薤白提取物的抗氧化作用研究j)碎国中医研究院广安门医院(北京100053)李向虹顾丽贞v张百舜王爱红段绍瑾h摘要本文研究了薤白乙醚提取物,乙酸乙酯提取物,水提取物,挥发油及原汁对白酒造成的氧应激态大鼠血清超氧化物歧化醇(sod)活性,过氧化氢酶(cat)活性,过乳化脂质(lpo)和t淋巴细胞百分率的影响结果表明,薤白原汁对该大鼠的血清sod,cat和t淋巴细胞具有明显保护作用且显着抑制血清过氧化脂质形成.但是,低,中剂量(2.4gkg,4.8,动脉粥样硬化发生发展的某些病理过程和环节与脂质过氧化损伤有关,防止ldl的氧化修饰,在防治动脉粥样硬化中具有重要作用.

2、薤白同属植物大蒜(asativum)和野蒜(aurs$num)的抗氧化作用已被证实【”.本文探讨了薤白不同提取物的抗氧化作用,并初步观察其对t淋巴细胞的影响.1材料和方法1.1薤白;鲜品,产地内江.经鉴定为百合科植物小根蒜(atliummacrostenonbge.)的地下鳞茎.1.2薤白不同提取物的制备;取薤白300g,洗净打碎,先后用eto,etoac,ho提取,分别制成eto提取物(提,),etoac提取物(提),h.o提取物(提.).取薤白30g,洗净,打碎,提取挥发油,制得薤白挥发油(提.).取薤白300g,洗净,打碎,经两次压榨致谢i姥白植物来源由中国中医研究院中药研究所胡世林研究

3、员鉴定.丰宣万索君剐研究员在部舟实驻中给予帮助.车课题为国家自然科学基金资助项目?34?每ml相当于原生药0.48g5动物:wistar大鼠,早,体重13218g,购于北京医科大学实验动物部.随机将56只大鼠分为八组,空白组和白酒组以蒸馏水,ve+vc组按(0.21retool+0.68retoo1)m1,各提取物组按4.8gkg”d灌胃,连续25日后,除空白组,其余各组按1c.mlkg给56度二锅头酒(北京酿酒总厂出品),连续三日,时给药,取外周血坝it淋巴细胞百分率,处死,测定血清超氧化物歧化酶(sod)活性.在以上实验基础上,再将5o只大鼠随机分为六组,空白组,白酒组处理同上,vc组按1

4、.1mmolkgd,其它三个组以薤白原汁分别按低剂量(2.4gkgd)中剂量(4.8gkgd),高剂量(8.cgkgd)灌胃.其余处理同上,测外周血t淋巴细胞百分率,血清sod活性,过氧化氢酶(cat)活性,丙二醛(mda)含量.1.4测试方法血清sod活性测定;采用海军总医院试剂盒(亚硝酸盐法).血清cat活性测定:根据aebi法.血请mda测定:采用南京铁道医学院试剂盒ctba显色法).外周血t淋巴细胞百分率测定.根据改良的口一醋酸萘酯酶法羟自由基?oh测定:minotti法【”.利用fenton反应产生?oh.以圩露醇为清除?oh的阳性对照,于fruker一3c0型电子自旋共振波谱仪(德

5、屠)上测定该?oh信号.其强度以信号第二峰峰高值表达.见图1.鼻撩=塑饕煮.%清除率一蚕百萌啄一做浓度一自由基清除率曲线.同时测定体系ph值.珈一田1以dmpo为撼捉剂.用epr铡街的典型?oh信号洲试条件lx波段,微波频率9.77ghz,微波功率20row,扫描宽度348050g,调制幅度1g.时间常数81.92m2结果2.1蘸白不同提取物对白酒连成的氧应激态太鼠血清sod活性和外周血t淋巴细胞百分率的影响与正常大鼠相忧,过量白酒造成的氧应激态大鼠的sod活性和t淋巴细胞百分率均明显降低(p<o.o5).在蔗白不同提取物中,原汁能显着提高氧应激态大鼠的sod,活性(p<0.05)

6、并增加t淋巴细胞百分率(p<0.01).而其它各提取物的作用不咀显.见表1.2.2不同剂量薤白原汁对白酒遣成的氧应激志大鼠血清sod活性,cat活性,mda台量和外周血t淋巴细胞百分率的影响低,中剂最藏白原汁均能显着抑制白酒造成的氧应激态大鼠的lpo形成(低剂量p<o.05,中剂量p<0.01)并显着提高其t淋巴细胞百分率(p<o.01).中剂量薤白原汁显着提高氧应激态大鼠的sod活性(p<0.01).低剂量薤白原汁能显着提高氧应激态大鼠的cat活性(p<0.05).低剂量与,0;在sod的催化下歧化成过氧化氢(ho:)和氧(),过量的ho:不能及时清除则损

7、伤sod.实验结果表明,在薤白五种提取物中,原汁对白酒造成的氧应澈态大鼠的保护作用最佳.从薤白五种提取物的制备过程来看只有原汁未经加热,结合术文实验结果,提示薤白所含抗氧化活性物质具有热不稳定性.另.讣,原计成分较全,有利于发挥成分间的协同也可能是其作用最强的原因.实验结果还显示低,中剂量蓬白原汁作用强于高剂量者,提示选择合适剂量对于较好地发挥薤自原汁的抗氧,35t袭1燕白不同拄飒物对白酒造成的氧应激卷太鼠血清sod活性和外周血t淋巴细胞百分隼曲影响空白组白酒组0洒一ve十vc组白酒+.组白酒+提组白酒一提胡l白酒十提.组sod活性【nu/trd)79.211.5(7)63.05.7(6)63

8、.52.8(7)59.93.g(6)53.98.0(6)62.ii2.3(7)54.410.2(7)t淋毫细胞百分率(%)74.1i0.9(7)50.07.0(6)62.73.5(7j65.09.8(6)69.210.6(6)68.o9.3(6)64.99.4(7)白酒十提5组75.2i0.3(7)75.o士9.3(7)sod活性(nu/mi)cat活性(lu/wa)lpo(nmo1mda/m1)t淋巴细胞百分率(,a与空白组ip<o-05与白j酉组比p<o.08.p<o.01化作用是重要的.基的esr研究.中国药学杂志,1992,27现有研究表明,机体内活性氧代谢和免疫(1

9、6):030功能密切相关.本实验所得氧应激态大鼠的4bietzreta1.cardioprotectiveactionst淋巴细胞明显降低的结果与文献报道黄瞟呤ofwgarlic(ai.ursinum)insc和黄瞟呤氧化酶同pbmnc共同温育使玫瑰蝴cp_fu?mmndcd花形成细胞明显下降的结果接近.薤自在抗.:.氧化的同时还具有保护t淋巴细胞的作用说明ym01ogy|1.84.l05:121127薤白的抗氧亿活性与免疫调节作用可能有相关6万素君,荨.t淋巴细胞非特异性醣酶染色性.法.上海医学检验杂志,10q2,7(1):53参考文越7minottg.etai.therequirmentf

10、oriron1郭晓,等.薤白降脂作用的实验和临床研(i)intheinitiationofiipidperoxidat究.中西医结合杂志,i990年基础理论特ionbyiron(i)andhydrogenperoxide?桑,5153页thv.ournalofbiologicalchemistry,2胨瑷,等主编.自由基医学.北京人民军1987,962(3):1098医出版社,1991:223,189,1838rogern,etal?implicationoffreerad-5卢景彝等.大蒜及其提取物清除活性氧自由icalmeclmnsmsinethanolinducedcell.-38.,中

11、药材第17卷第11期1994年11i1larinjury?freeradicalb州市中医院肿瘤科根据古方及中医理论和多年临床实践而研制成的一种以马钱子,红娘子,北芪等为主药的抗癌复方中药制剂,临床上对肝癌,胃癌等多种癌瘤有良好疗效.为此,我们对马红丸进行有关动物移植性肿瘤的抑瘤试验.现报告如下.1实验材料马红丸:由广州市中医院提供,使用时用1cmc(羧甲基纤维索钠)研磨配成33.3及20两种浓度使用.羧甲基纤维索钠:配成1浓度使用.呋嘀氟脲嘧啶(ft一207)使用时用1%cmc研磨配成0.33浓度使用.小鼠s-180移植性肿瘤瘤株j小鼠肝癌移植性肿瘤瘤株j小鼠腹水癌(eac)瘤株以上癌株均由

12、中山医科大学肿瘤研究所提供.健康昆明种小白鼠t体重202g,雌雄兼用,由本所动物研究室提供.2方法与结果根据卫生部关于新药药理研究有关规定和1989年在南宁召开的第三届全国肿瘤药理及化疗学术会议对有关抗肿瘤新药药理研究的具体规范要求,我们设计并完成了以下实验.2.1马虹丸对小鼠移植性肝癌的抑瘤试验实验选取健康昆明种小鼠4o只,体重在202g,雌雄兼有,按肿瘤移植接种规范在每只小鼠前肢腋下皮下接种癌细胞混悬液0.2ml,并子次日按体重随机分为4组:cmc空白耐l中萄臂幕开藿第1一百j_1军五h中杰荔为,?中葺玛照组,ft-207阳性对照组,马红丸低剂量组马红丸高剂量组.各组小鼠均按20ml/kg

13、之容量分别开始给药每天日服灌胃一次,连续7天.在末次给药后的第二天,同时处死实验小鼠,分别称重,剖取瘤体,脾脏并称重纪录,作统计学处理,结果见表1.重复试验表明.马红丸g/kg及1cg/kg剂量口服均对小鼠移植性肝癌有一定抑瘤作用.统计学处理表明,与空白对照组比较,其差异有显着性意义.2.2马虹丸对小鼠腹啦癌的生命延长率试验实验选取健康昆明种小鼠4o只,体重范围20g,雌雄兼用.按腹水癌移植接种规范给每只小鼠腹腔接种癌性腹水稀释教0.2ml.次日按体重随机分为4组,按表2分组并灌服给药,每日一次,连续7天.并在停药后s0天内观察各组小鼠的死亡情况,记录每鼠存活天数柞统计学处理,结果如表2.重复