课题3血红蛋白的提取和分离(二)

1、血红蛋白的提取与分离测试题第i卷选择题一、单选题1. 凝胶色谱法是根据蛋白质（ ）分离蛋白质的有效方法。a 对其他分子的亲和力 b 相对分子质量的大小 c 带电荷的多少d 溶解度的大小2. 缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。a 温度 b ph c 渗透压 d 氧气浓度3. 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。a 相同 b 相反c 相对d 相向4. 血液由血浆和各种血细胞组成，其中（ ）的含量最多。a 白细胞 b 血小板 c 红细胞d 淋巴细胞5. 血红蛋白因含有（ ）而呈红色a. o2 b. co c. co2d.血红素.6. 血红蛋

2、白的提取和分离中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为 4 层，其中第3 层是（ ）a 无色透明的甲苯层b 脂溶性物质的沉淀层c 血红蛋白的水溶液d 其他杂质的暗红色沉淀物第二卷非选择题7. 红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：8. 1）血红蛋白提取和分离的程度可分为四步： 、 、 和。9. 2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的

3、目的是 。以上所述的过程即是样品处理，它包括 、收集血红蛋白溶液。10. 3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是 。透析的原理是 。11. 然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是 。血红蛋白有什么特点？ 。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？ 。8 .在蛋白质的提取和分离实验中，若用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液来分离血红蛋白，需 对样品如何处理？9 .你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？10 .有4瓶失去标签的无色透明液体。已知各装有：大肠杆菌超标的自来水，丙种球蛋白溶液 (一种抗体)，溶解着

4、dna分子的2mol/l的nacl溶液，葡萄糖溶液。请根据提供的第一步鉴定方法，简要写出用相应物质进行鉴定的其余步骤和结果。第一步：各取4种液体少许分别倒入 4个试管中，缓慢加入蒸储水并用玻璃棒搅拌，则第二步：除上述鉴定 dna的方法外，还可以用哪些方法进行鉴定？ 凝胶色谱法血红蛋白的提基础知识，缓冲溶液取和分离i电泳同品处理 实验操作y凝胶色谱操作、ds一聚丙烯酰凝胶电 红细胞的洗涤实验操作，色谱主填料的处理凝胶色谱柱的装填 蛋白质的分离 结果分析与评价课题延伸专题5 dna和蛋白质技术答案 1b 2b 3b 4c 5d 6c7. (1)样品处理；粗分离；纯化；纯度鉴定(2)防止血液凝固红细

5、胞的洗涤，血红蛋白的释放(3)去除分子质量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内(4)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去血红蛋白呈现红色， 在凝胶色谱分离时， 可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液；这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。8红细胞的洗涤；血红蛋白的释放；分离血红蛋白溶液；透析（注意每步的细节问题）9血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步。包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首 先通过洗涤红细胞、 血红蛋白的释放、 离心等操作收集到血红蛋白溶液， 即样品的处理；在经 过透析去除分子量较小的杂质， 即样品的粗分离； 然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。10.第一步：出现丝状物的溶液，为溶解着dna分子的2mol/l的nacl溶液。第二步：向其 余 3 支试管中加入伊红美兰试剂， 呈现深紫色的为大肠杆菌超标的自来水。 第三步：将其 余 2 种溶液各取少许倒入 2 支试管中，加入双缩脲试剂，呈现紫色反应的为丙种球蛋白溶液。最后一瓶为葡萄糖溶液用二苯胺沸水浴变为蓝色；或加入冷却的酒精，搅拌出现丝状物12. 分离血红蛋白溶液时，将混合液离心后可看到试管中的液体分为 4 层：