流行病调查中的实验室支持

1、实验室在传染预防 控制中的作用 传染病的基本特征 1.1.有病原体存在：每一种传染病都是由特异的病原体所引起。有病原体存在：每一种传染病都是由特异的病原体所引起。 2.2.有传染性：所有的传染病都有传染性。有传染性：所有的传染病都有传染性。 3.3.有流行病学特征：如流行性、季节性、地方性和周期性有流行病学特征：如流行性、季节性、地方性和周期性 4.4.感染后产生免疫力：有的可终生免疫，有的免疫不持久，出现二感染后产生免疫力：有的可终生免疫，有的免疫不持久，出现二 次感染或重复感染现象。次感染或重复感染现象。 一、流行病与检验关系 l腿和眼腿和眼 l夫妻理解夫妻理解 关爱关爱 支持；支持； 推

2、诿推诿 应付应付 粗心。粗心。 二、工作次序 l谁是主流谁是主流 l谁采样谁采样 三、责任与能力 1. 1. 责任责任 - - 是对自己所负使命的忠诚和信守，是对自己工是对自己所负使命的忠诚和信守，是对自己工 作出色的完成，是忘我的坚守，责任就是人性的升华。作出色的完成，是忘我的坚守，责任就是人性的升华。 2. 2. 能力能力 - - 掌握和运用知识机能所需的个性心理特征。掌握和运用知识机能所需的个性心理特征。 3.3. 清醒地意识到自己的责任，并勇敢地扛起它，无论对于清醒地意识到自己的责任，并勇敢地扛起它，无论对于 自己还是对于社会都将是问心无愧的。自己还是对于社会都将是问心无愧的。人可以不

3、伟大，人人可以不伟大，人 也可以清贫，但我们不可以没有责任也可以清贫，但我们不可以没有责任。任。任何时候，我们都何时候，我们都 不能放弃肩上的责不能放弃肩上的责任，扛着它，就是扛着自己生命任，扛着它，就是扛着自己生命 的信念。的信念。 4 4. .责任大于能力责任大于能力 责任，从本质上说，是一种与生俱来的使命，它伴随着每一个生责任，从本质上说，是一种与生俱来的使命，它伴随着每一个生 命的始终。事实上，只有那些能够勇于承担责任的人，才有可能命的始终。事实上，只有那些能够勇于承担责任的人，才有可能 被赋予更多的使命，才有资格获得更大的荣誉。一个缺乏责任感被赋予更多的使命，才有资格获得更大的荣誉。

4、一个缺乏责任感 的人，或者一个不负责任的人，首先失去的是社会对自己的基本的人，或者一个不负责任的人，首先失去的是社会对自己的基本 认可，其次失去了别人对自己的信任与尊重，甚至也失去了自身认可，其次失去了别人对自己的信任与尊重，甚至也失去了自身 的立命之本的立命之本信誉和尊严。信誉和尊严。 四、细节与成败 1.1.细节决定成败细节决定成败 “泰山不拒细壤，故能成其高；江海不择细流，故能就其深。泰山不拒细壤，故能成其高；江海不择细流，故能就其深。”所以，所以， 大礼不辞小让，细节决定成败。在中国，想做大事的人很多，但愿大礼不辞小让，细节决定成败。在中国，想做大事的人很多，但愿 意把小事做细的人很少

5、；我们不缺少雄韬伟略的战略家，缺少的是意把小事做细的人很少；我们不缺少雄韬伟略的战略家，缺少的是 精益求精的执行者；精益求精的执行者；决不缺少各类管理规章制度，缺少的是规章条决不缺少各类管理规章制度，缺少的是规章条 款不折不扣的执行款不折不扣的执行。我们必须改变心浮气躁、浅尝辄止的毛病，提我们必须改变心浮气躁、浅尝辄止的毛病，提 倡注重细节、把小事做细。倡注重细节、把小事做细。 2 2. . 三级台阶的作用三级台阶的作用 出口转弯的作用出口转弯的作用 一条装饰线的作用一条装饰线的作用 不同的站台宽度不同的站台宽度 站台门省掉站台门省掉 认真认真做事只是把事情做做事只是把事情做对对， 用心用心做

6、事才能把事情做做事才能把事情做好好。 五、实验室在传染病控制中的作用 l 日常监测日常监测 l 传染病暴发传染病暴发 l 突发公共卫生事件突发公共卫生事件 l 不明原因疾病不明原因疾病 监测时线 暴露暴露 求医求医 菌株上传菌株上传 phl pfge phl/cdc 出现出现 症状症状 医院实验室医院实验室 确诊培养确诊培养(?) phl血清分型血清分型 其它检测其它检测 信息信息 lab epi 流调流调 实验室实验室 爆发爆发 发现和确定暴发的过程 (i) 首例首例 发病发病 首例首例 就诊就诊 报告报告 实验室实验室 结果结果 采样采样 开始开始 反应反应 病例病例 控制机会控制机会 天

7、 发现和确定暴发的过程(ii) prim hc repressamp response begins 病例病例 潜在的病例预防潜在的病例预防 天 第第1 1阶段未检测到新病毒阶段未检测到新病毒, ,第第2 2阶段检测到新病毒；阶段检测到新病毒； 第第3 3阶段：人间散发病例；阶段：人间散发病例； 第第4 4阶段阶段: :出现人传人出现人传人; ; 第第5 5阶段阶段: :聚集性病例聚集性病例; ; 第第6 6阶段阶段: :大流行大流行 实验室在传染病控制中的作用 l临床试验室临床试验室 l公卫实验室公卫实验室 l大学实验室大学实验室 l科研院所科研院所 l私人实验室私人实验室 l企业实验室企业

8、实验室 人人 动物动物 环境环境 l建立检测方法建立检测方法 分离鉴定分离鉴定 溯源方法溯源方法 定性、定量方法定性、定量方法 l方法标准化方法标准化 l病原体研究病原体研究 毒力毒力 变异变异 耐药耐药 实验室在实验室在传染病控制中传染病控制中作作用用 l疫苗的研究疫苗的研究 l疫苗效果评价疫苗效果评价 l治疗药物研究治疗药物研究 实验室在传染病控制的作用 实验室在传染病控制中的作用 l实验室在传染病疫情控制中具有重要作用实验室在传染病疫情控制中具有重要作用。 无论是基础研究还是应用研究都离不开实验室的工作，这些无论是基础研究还是应用研究都离不开实验室的工作，这些 工作主要包括病原学、检测与

9、诊断、预防与控制（包括疫工作主要包括病原学、检测与诊断、预防与控制（包括疫 苗）、药品研究等方面。苗）、药品研究等方面。 病原学研究包括病原的鉴定、病原体分子生物学、病原体可病原学研究包括病原的鉴定、病原体分子生物学、病原体可 能的来源、病原体致病机理等。能的来源、病原体致病机理等。 l传染病的诊断需要综合实验室检验结果传染病的诊断需要综合实验室检验结果。 传染病的诊断应包括流行病资料、临床病史、体格传染病的诊断应包括流行病资料、临床病史、体格 检查以及实验室检验结果等。检查以及实验室检验结果等。 l病原体的检出是确诊传染病的主要依据病原体的检出是确诊传染病的主要依据。 应尽一切可能分离到病原

10、体，特别是细菌、真菌等。应尽一切可能分离到病原体，特别是细菌、真菌等。 病毒感染因病原不易被检出，培养需较长时间，一病毒感染因病原不易被检出，培养需较长时间，一 般实验室难以开展病毒分离工作，因此在大多数情般实验室难以开展病毒分离工作，因此在大多数情 况下依赖免疫学试验而确立诊断。此外，还有分子况下依赖免疫学试验而确立诊断。此外，还有分子 生物学检测、影像检查、活体组织检查等。生物学检测、影像检查、活体组织检查等。 实验室在传染病控制中的作用 l 遏制传染病爆发取决于遏制传染病爆发取决于 p早期发现和报告可疑病例早期发现和报告可疑病例 p调查调查 p快速实验室诊断和证实快速实验室诊断和证实 p

11、有效控制措施有效控制措施. l 这些措施有赖于病原体、可能的传染源及传播途径的确定这些措施有赖于病原体、可能的传染源及传播途径的确定. 初步调查涉及两个重要环节：初步调查涉及两个重要环节： 收集可疑病人的信息和采收集可疑病人的信息和采 集临床标本因而必须：集临床标本因而必须： 提前计划和采集标本提前计划和采集标本 样本适当的包装并快速运至实验室样本适当的包装并快速运至实验室 实验室的检测能力实验室的检测能力 六、实验室与爆发调查 l在调查组去现场之前，在调查组去现场之前， 几个需要讨论的关键问题：几个需要讨论的关键问题： 确定症候群及可能的病因确定症候群及可能的病因 1. 确定采集那些临床标本

12、、样品采集和运输的程序和方法、所需物品确定采集那些临床标本、样品采集和运输的程序和方法、所需物品 2. 确定和联系实验室，取得实验室的支持确定和联系实验室，取得实验室的支持 3. 确定谁采样。采样人员必须熟知样品采集、包装、运送及生物安全的要求确定谁采样。采样人员必须熟知样品采集、包装、运送及生物安全的要求 4. 安排好所有细节安排好所有细节 采样装备、运输采样装备、运输(时间、路线、时间、路线、 运输工具和所需文件运输工具和所需文件) 、通信、实验室接收、通信、实验室接收 和检测和检测 等等 现场采样须注意 1.安全安全 需保护需保护 自己自己 样本样本 环境环境 2.样本编号和标签样本编号

13、和标签 病人姓名唯一的识别号码标本的类别标本采集的日期和地病人姓名唯一的识别号码标本的类别标本采集的日期和地 标本采集人每个载玻片必须单独标签标本采集人每个载玻片必须单独标签,并注意不应该干绕染色过程并注意不应该干绕染色过程. 3. 送样单送样单 病人信息：名称病人信息：名称,识别号码识别号码,性别性别,年龄年龄(或者出生日期或者出生日期),完成地点完成地点. 临临 床资料和临床免疫史、危险因素床资料和临床免疫史、危险因素,使用抗生素的时间使用抗生素的时间. 实验室信息：实验室信息： 标本类型，采样的日期标本类型，采样的日期,时间和地点时间和地点; 采样人姓名采样人姓名; 是否重复标本是否重复

14、标本. 4.送样本的包装、保存、运送送样本的包装、保存、运送 公共卫生实验室网络 在各种突发公共卫生事件、传染病暴发疫情、在各种突发公共卫生事件、传染病暴发疫情、 生物恐怖事件中早期快速、准确地鉴定病原微生生物恐怖事件中早期快速、准确地鉴定病原微生 物，特别是疑似和未知的病原微生物物，特别是疑似和未知的病原微生物 美国、法国、俄罗斯、日本、韩国、加拿大等国已建立美国、法国、俄罗斯、日本、韩国、加拿大等国已建立 lwho 建立了全球化单病种的实验室网络。建立了全球化单病种的实验室网络。 l我们省正在建立。我们省正在建立。 七、标本的采集七、标本的采集 1 1. .基本要求基本要求 （1 1）标本

15、由现场流行病学人员会同实验室人员配合）标本由现场流行病学人员会同实验室人员配合 采取。（关系）采取。（关系） （2 2）采集标本用具、容器必须无菌，盛装标本的容）采集标本用具、容器必须无菌，盛装标本的容 器必须有标签、编号，并详细填写采样单。器必须有标签、编号，并详细填写采样单。 （3 3）带齐所用物品。）带齐所用物品。 （4 4）特殊标本的采集）特殊标本的采集 2.标本采集前的准备 l 安全性安全性 l人员要采取防护措施 l原始标本收集于防漏容器；运输时应置于防漏、 可密封的塑料袋 l装有标本的容器发生泄漏时，需及时处理。 3.标本的采集与保存 原则：原则： 避免自身菌群的污染避免自身菌群的

16、污染。 l避免外界因素污染，应用适当的技术和设备技术和设备。 l标本的采集量采集量要足够。 l每份标本上有明确的标识标识，内容应与该患者的个案登记表 和标本登记表一致。 l标本置于防漏防漏的容器内。 1.1.粪便标本粪便标本 （1 1） 采集腹泻病人粪便应用两个灭菌棉拭子多点蘸取患者新采集腹泻病人粪便应用两个灭菌棉拭子多点蘸取患者新 鲜排出粪便的脓血、黏液、水样便或稀便等可疑部分，采便鲜排出粪便的脓血、黏液、水样便或稀便等可疑部分，采便 量量1 12 g2 g。 （2 2） 若患者不能自然排出大便，可用无菌的采便管或灭菌直若患者不能自然排出大便，可用无菌的采便管或灭菌直 肠棉拭子先在灭菌生理盐

17、水中蘸湿后（棉拭子多余的液体贴肠棉拭子先在灭菌生理盐水中蘸湿后（棉拭子多余的液体贴 管壁挤出），轻轻旋转插入肛门内约管壁挤出），轻轻旋转插入肛门内约4 45 cm5 cm（婴幼儿约（婴幼儿约 2 23 cm3 cm）处，于紧靠肛环边的隐窝处旋转采集直肠表面黏）处，于紧靠肛环边的隐窝处旋转采集直肠表面黏 液后退出。（仅限于霍乱）液后退出。（仅限于霍乱） 3.血标本 （1 1）培养：培养：伤寒、副伤寒病人血液标本采集时应严格伤寒、副伤寒病人血液标本采集时应严格 按照无菌手续采集，标本直接注入血培养瓶中。按照无菌手续采集，标本直接注入血培养瓶中。 （2 2）抗体：抗体：2 23ml3ml，分离血清做

18、血清学诊断用，一般，分离血清做血清学诊断用，一般 要求双份血清，特殊情况下多份血清。要求双份血清，特殊情况下多份血清。 （3 3）pcrpcr：抗凝血进行基因检测。抗凝血进行基因检测。 3.脑脊液 （1 1）采集的脑脊液标本应尽量避免凝固和混入）采集的脑脊液标本应尽量避免凝固和混入 血液。血液。 （2 2）冷藏）冷藏 4.病毒分离 l病人抗凝血病人抗凝血 l疹子、疱疹液、咽拭子、大便疹子、疱疹液、咽拭子、大便 l 媒介生物：蜱、螨、媒介生物：蜱、螨、 l 动物：老鼠肝、脾内藏；狗头动物：老鼠肝、脾内藏；狗头 低温冷冻。低温冷冻。 超过超过 时间必须氮罐保存，上送。时间必须氮罐保存，上送。 2样

19、品的运送 l 采集的样品，应在规定的时间内送到实验室。采集的样品，应在规定的时间内送到实验室。 l 病毒性腹泻标本等采集后应立即冰冻保存（病毒性腹泻标本等采集后应立即冰冻保存（-20以以 下），在特殊环境下），在特殊环境(冰瓶或其它冷藏器具冰瓶或其它冷藏器具)中运送。中运送。 l 肠道病原微生物检验的标本，应保存在肠道病原微生物检验的标本，应保存在carry-blair运运 送培养基中放置在适宜的温度条件下运送。送培养基中放置在适宜的温度条件下运送。 l 怀疑厌氧菌感染或需要进行厌氧菌检验的标本，具备怀疑厌氧菌感染或需要进行厌氧菌检验的标本，具备 微需氧分离培养条件的用灭菌棉拭子采集粪便标本微

20、需氧分离培养条件的用灭菌棉拭子采集粪便标本12g， 立即保存于立即保存于carry-blair运送培养基中（置冰排采样箱内存运送培养基中（置冰排采样箱内存 放），放），4小时内送实验室检测。不具备微需氧分离培养条小时内送实验室检测。不具备微需氧分离培养条 件的，可将粪便标本置空肠弯曲菌样品保存液中，冷冻保件的，可将粪便标本置空肠弯曲菌样品保存液中，冷冻保 存（存（-20或或-80，样品运输过程中不可解冻），后送往，样品运输过程中不可解冻），后送往 有条件实验室检测。样品分离培养前不可将样品解冻。有条件实验室检测。样品分离培养前不可将样品解冻。 l 运送血液，应当避免剧烈震荡，防止溶血。需运送血

21、液，应当避免剧烈震荡，防止溶血。需 要血清的检样，采血后应使其在试管中凝固后运要血清的检样，采血后应使其在试管中凝固后运 送，并及时分离血清冻存。送，并及时分离血清冻存。 怎么检 l快速灵敏方法的应用快速灵敏方法的应用 l仪器自动化方法仪器自动化方法 l分离培养方法的改进分离培养方法的改进 美国实验室应急网络 laboratory response network lrn l19991999年建立年建立 l目的目的 用来快速应对生物恐怖、重大传染病疫情和突发公共卫生用来快速应对生物恐怖、重大传染病疫情和突发公共卫生 事件。事件。 l组成组成 cdc cdc、公共卫生实验室协会、陆军感染病研究所

22、合作建立、公共卫生实验室协会、陆军感染病研究所合作建立 的多学科、多部门和多层次的实验室网络。包括卫生、兽医、食品、的多学科、多部门和多层次的实验室网络。包括卫生、兽医、食品、 环境和农业等学科，由联邦和地方的公共卫生机构、军事医学实验环境和农业等学科，由联邦和地方的公共卫生机构、军事医学实验 室、工业实验室、兽医实验室和大学等学术机构的实验室组成。这室、工业实验室、兽医实验室和大学等学术机构的实验室组成。这 个网络将临床实验室和不同州、地区和城市的公共卫生机构及联邦个网络将临床实验室和不同州、地区和城市的公共卫生机构及联邦 机构联系在一起。机构联系在一起。 l在在911911之后的炭疽事件中

23、发挥了重要的作用。之后的炭疽事件中发挥了重要的作用。 l加拿大和澳大利亚也加入了这个网络。加拿大和澳大利亚也加入了这个网络。 美国实验室应急网络 laboratory response network lrn l lrn lrn 网络结构为金字网络结构为金字 塔型塔型 l 根 据 生 物 安 全 级 别根 据 生 物 安 全 级 别 （bslbsl）分为）分为a a、b b、c c、 dd四级四级 l 根据实验室所能提供根据实验室所能提供 的检验项目和对感染物的检验项目和对感染物 质的控制能力分为国家质的控制能力分为国家 级实验室、参比实验室级实验室、参比实验室 和哨点实验室。和哨点实验室。

24、美国实验室应急网络 laboratory response network lrn l哨点实验室哨点实验室医院和社区临床实验室。任务为采集和提交病原微生物或医院和社区临床实验室。任务为采集和提交病原微生物或 样品给附近的参比实验室。它们是受威胁人群最早接触的医疗机构样品给附近的参比实验室。它们是受威胁人群最早接触的医疗机构 l参比实验室参比实验室州级或市级卫生部门实验室、学术研究机构实验室和联邦州级或市级卫生部门实验室、学术研究机构实验室和联邦 实验室，生物安全标准为实验室，生物安全标准为bsl2或或3级。参比实验室具有一些主要病原级。参比实验室具有一些主要病原 微生物的鉴定能力，掌握更高难度

25、的实验室检测手段，目的是用来检测微生物的鉴定能力，掌握更高难度的实验室检测手段，目的是用来检测 和确证感染物质的存在。其主要任务是对可疑样品进行分析和鉴定，具和确证感染物质的存在。其主要任务是对可疑样品进行分析和鉴定，具 有给予有结论性结果的能力，能在应急的情况下能够给予地方部门及时有给予有结论性结果的能力，能在应急的情况下能够给予地方部门及时 的应对，加快地方机构的应急反应速度。如无法判定送交国家级实验室。的应对，加快地方机构的应急反应速度。如无法判定送交国家级实验室。 现在分布在美国现在分布在美国50个州的参比实验室共计个州的参比实验室共计200余个，成为整个实验室余个，成为整个实验室 网络的中坚力量。网络的中坚力量。 l国家级实验室国家级实验室cdc和美国陆军感染病研究所的实验室。达到和美国陆军感染病研究所的实验室。达到