食品卫生微生物学检验技术

1、精品课件 精品课件 精品课件 食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变 菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌 大肠菌群计数大肠菌群计数 沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法 其他致病菌及检测方法简介其他致病菌及检测方法简介 食品卫生微生物学检验技术基础知识食品卫生微生物学检验技术基础知识 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品

2、课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 杀菌锅 (Autoclave) 无菌操作台 (Laminar flow) 精品课件 以量桶量桶裝取適當量蒸蒸 馏水馏水於玻璃容器中 於玻璃容器上标示培 养基名称 精品课件 放上秤藥紙 並歸零歸零 以秤藥匙舀 出適當量培 養基 (請看 培養基罐上 說明) 精品课件 傾倒培養基時小心 不要沾到玻璃壁上 精品课件 清理配藥桌面與天平 清洗秤藥匙，擦乾放回 藥品放回藥品櫃 精品课件 調整分注器分注器 (Dispensette) 刻度 分裝試管 蓋上試管蓋 精品课件 放入杀菌锅杀菌锅 (Autoclave) 灭菌 精品课件 加水蓋過鐵板 放東西 關門 調整溫

3、度時間 關緊洩壓閥 精品课件 滅菌結束後，等 壓力降回零壓力降回零 時才可打開門 進入殺菌釜 之物 品，蓋子不可關 太緊或太鬆 精品课件 滅過菌之固態培養 基於無菌操作台無菌操作台 (Laminar flow) 內倒製平板培養基 (Plate) 日光燈UV燈風扇 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 5. 試管前端 過火，蓋上 試管蓋 6. 接種環 燒紅滅菌 精品课件 2. 自 Plate 上取單一 菌落 (方法一：蓋子微 開遮住培養基，避免空 氣中菌體掉入) (方法二：plate 反面拿起) 精品课件

4、 1. 試管前端過火 2. 打開試管蓋 精品课件 操作時離火源遙遠 試管直放，空氣中菌體 容易掉入 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变 菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌 大肠菌群计数大肠菌群计数 沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法 其他致病菌及检测方法简介其他致病菌及检测方法简介 食品卫生微生物学检验技术基础知识食品卫生微生物学检验技术基础

5、知识 精品课件 精品课件 GB4789.2008GB4789.2008 目前，GB/T4789-2003的修订工作 已经接近完成。大部分标准已经制 修订完毕。 已于2008年11月1日正式实施的有 GB/T4789.4-2008沙门氏菌检验 GB/T4789.7-2008副溶血性弧菌 GB/T4789.36-2008肠出血性大肠埃希 氏菌O157:H7/NM检验。 2008年11月21日正式公布的有14个。 GB4789-2003GB4789-2003 精品课件 精品课件 食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变 总则、菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌总则

6、、菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌 大肠菌群计数大肠菌群计数 沙门氏菌、志贺氏菌检验方法、金黄色葡萄球菌沙门氏菌、志贺氏菌检验方法、金黄色葡萄球菌 其他致病菌其他致病菌 食品卫生微生物学检验技术基础知识食品卫生微生物学检验技术基础知识 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 dnn C N )1 . 0( 21 菌落总数 所有符合计数 要求的平板菌 落数之和 较低稀释度 有效平板数 较高稀释度 有效平板数 较低稀释度 的稀释倍数 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 酵母菌菌落多类似细菌菌落，但大而酵母菌菌落多类似细菌菌落，但大而 厚，湿润

7、、粘稠、易挑起，某些厚，湿润、粘稠、易挑起，某些 菌种长时间培养而呈皱缩状。菌种长时间培养而呈皱缩状。 颜色多为乳白、少数红色。颜色多为乳白、少数红色。 霉菌菌丝粗长，其菌落疏松，呈绒霉菌菌丝粗长，其菌落疏松，呈绒 毛状、棉絮状或蛛网状。有的菌落毛状、棉絮状或蛛网状。有的菌落 呈圆形，有的无定形。由于呈圆形，有的无定形。由于 其形成的孢子不同故其其形成的孢子不同故其 菌落常呈现肉眼可见的菌落常呈现肉眼可见的 不同结构和色泽特征。不同结构和色泽特征。 精品课件 精品课件 食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变 菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌菌落总数、霉菌

8、酵母菌计数、商业无菌 大肠菌群计数大肠菌群计数 沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法 其他致病菌及检测方法简介其他致病菌及检测方法简介 食品卫生微生物学检验技术基础知识食品卫生微生物学检验技术基础知识 精品课件 精品课件 精品课件 产气克雷白氏菌产气克雷白氏菌 ETEC EIEC 阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌 EHEC 产气克雷白氏菌产气克雷白氏菌 大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌 柠檬酸杆菌柠檬酸杆菌 O157：H7 精品课件 精品课件 0 将产气的试管内将产气的试管内 样品接种到样品接种到 BGLB肉汤肉汤 LST不产气（不产气（-） 小导管里无气泡小导管里

9、无气泡 LST产气（产气（+） 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变 菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌 大肠菌群计数大肠菌群计数 沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法 其他致病菌及检测方法简介其他致病菌及检测方法简介 食品卫生微生物学检验技术基础知识食品卫生微生物学检验技术基础知识 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 美国两种花生酱含沙门氏菌美国两种花生酱含沙门氏菌 精品课件 精品课件 前增菌：用无

10、选择性的培前增菌：用无选择性的培 养基使处于濒死状态的细养基使处于濒死状态的细 菌恢复活力菌恢复活力;BPW 选择性增菌：使沙门氏菌选择性增菌：使沙门氏菌 优势繁殖，其它细菌变到优势繁殖，其它细菌变到 抑制抑制;SC+TTB 选择性平板分离培养：选择性平板分离培养： BS+XLD/HE/显色培基显色培基 生化试验：鉴定分离出来生化试验：鉴定分离出来 的细菌是否符合沙门氏菌的细菌是否符合沙门氏菌 的生化谱，可采用的生化谱，可采用API 20E 等成套生化试剂等成套生化试剂 血清学鉴定：特异性诊断血清学鉴定：特异性诊断 血清鉴定到种。血清鉴定到种。 精品课件 BS XLD DHL 海博第二代 显色

11、培基 HE SS XLT4 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 原理：三糖利用 培养基：干粉或生化管 接种方法：穿刺划线 结果：产酸碱，产气，硫化氢 注意：高层斜面 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 7. 将反应结果输将反应结果输 入数据库软件中入数据库软件中 得到生化谱代码得到生化谱代码 8.软件自动查询报软件自动查询报 告最符合的菌名告最符合的菌名 6. 根据标准色卡判读反应结果根据标准色卡判读反应结果 精品课件 精品课件 精品课件 抗体攻击抗原（居中者） 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 H抗

12、原 菌体抗原 （O抗原） 表面抗原 （Vi抗原） 精品课件 精品课件 精品课件 A-F多价血清凝集 O4O3,10O7O8O9O2O11 O19O34O15O10 B群？C1/C4群？C3群？ E3群？E2群？E1群？E4群？ D群？A群？F群？ 精品课件 A-F多价血清不凝集采用9种多价血清逐一排查 O多价1 O多价2 O多价3 O多价4 O多价5 O多价6 O多价7 O多价8 O多价9 AF群包括6，14群 13，16，17，18，21群 28，30，35，38，39群 40，41，42，43群 44，45，47，48群 50，51，52，53群 55，56，57，58群 59，60，61

13、，62群 63、65，66，67 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 葡萄糖半固体葡萄糖半固体 （无动力）（无动力） 精品课件 HE上不发酵乳糖的肠道菌，上不发酵乳糖的肠道菌， 可能就是志贺氏菌可能就是志贺氏菌 SS上无黑色中心很可能上无黑色中心很可能 是志贺氏菌了是志贺氏菌了 Mac Mac 精品课件 精品课件 计数及 血浆凝 固酶实 验 接种BHI肉汤及 营养琼脂斜面 精品课件 金葡在金葡在Baird-Parker平板上菌落直径平板上菌落直径23mm，灰色到黑，灰色到黑 色，边缘淡色，周围有一浑浊带，外层有一透明圈。接色，边缘淡色，周围有一浑浊带，外层有一透明圈。接 种针接触有奶油至树

14、脂硬度。偶见非脂肪溶解的类似菌种针接触有奶油至树脂硬度。偶见非脂肪溶解的类似菌 落耽误浑浊带和透明圈。落耽误浑浊带和透明圈。 触媒实验 电镜下的金葡电镜下的金葡 海博显色培基 精品课件 精品课件 精品课件 食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变食品卫生微生物学检验方法国家标准的演变 菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌菌落总数、霉菌酵母菌计数、商业无菌 大肠菌群计数大肠菌群计数 沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验方法 其他致病菌及检测方法简介其他致病菌及检测方法简介 食品卫生微生物学检验技术基础知识食品卫生微生物学检验技术基础知识 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 精品课件 10 ml + ml ST-Vm 90 ml或10ml+EE肉汤90ml 361，24 h2h 检样100g（ml）+ BPW 稀释液900 ml 36 1，18 h 2h DFI琼脂或