微生物学化脓性细菌1PPT课件

1、1 第三篇第三篇 微生物学各论微生物学各论 三性两法 生物学性状 微生物学检查法 致病性 免疫性 防治法 2 第十四章第十四章 化脓性细菌化脓性细菌 3 化脓性细菌：一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。常 引起创伤感染和医院内感染。 根据革兰染色性的不同可分成 lG+菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等 lG-菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、铜绿假单胞菌等。 4 第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属 (Staphylococcus) 对人类致病的主要是金黄色葡萄球菌（S.aureus）。 5 p分布广泛，是最常见的化脓性球菌 p医院内交叉感染的重要传染源 p所致疾病 l化脓性炎症 l食物中毒 l

2、烫伤样皮肤综合征 l毒性休克综合征 p耐药率高 6 1、形态与染色 p球形或椭圆形，平均直径1m，典型排 列呈葡萄串状； p无鞭毛，无芽胞，体外培养 时一般不形成荚膜； p革兰染色阳性。 p衰老、死亡或被中性粒细胞 吞噬后易G。 一、生物学性状一、生物学性状 7 脓标本革兰染色镜检 8 2、培养特性 p营养要求不高，耐盐，最适生长温度为37，最适pH为7.4。 p在普通琼脂平板上孵育2448h后，形成S型（光滑）菌落。 p可产生脂溶性色素，菌落呈现金黄色、白色、柠檬色不同的颜 色。 p血琼脂平板上，致病性葡萄球菌形成明显的全透明溶血环（溶 血）。 9 三种葡萄球菌培养三种葡萄球菌培养 琼脂琼脂

3、 培养培养 基基 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌 金黄色色素金黄色色素 白色色素白色色素 柠檬或白色色素柠檬或白色色素 致病力强致病力强 条件致病菌条件致病菌 一般不致病一般不致病 10 金黄色葡萄球菌金黄色菌落 11 金黄色葡萄球菌血平板 12 3、生化反应 p触酶阳性；可与链球菌区别 p多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖； p致病株能分解甘露醇。 13 capsule polysaccharide (teichoic acid) SPA 14 p葡萄球菌A蛋白 (staphylococcus A protein ，SPA) 是葡萄球菌细胞壁

4、的一种表面蛋白，可与人类免疫球蛋白 IgG的Fc段非特异性结合，而IgG分子的Fab段仍能同相应抗 原分子特异性结合，介导完成协同凝集试验。 15 意义： I. 含SPA的葡萄球菌可作为载体，结合特异性抗体后，开展简 易、快速的协同凝集试验，检测多种微生物抗原。 16 II. SPA 与IgG结合后的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、引 起超敏反应、损伤血小板等多种生物学活性。 17 p荚膜体内的大多数金黄色葡萄球菌有荚膜，有粘附作用， 与细菌侵袭力有关。 p多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁。 18 5、抵抗力 p葡萄球菌在无芽胞菌中抵抗力最强。60 1h或8030分钟 才被杀死。 p对碱性染

5、料敏感，龙胆紫可抑制其生长。 p对许多抗生素敏感，但易产生耐药性。近年来出现的耐甲氧 西林金黄色葡萄球菌（）已成为医院感染最常见的致 病菌。 19 根据色素与生化反应 根据噬菌体：分为5个噬菌体群和26个噬菌体型。 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌 6、分类、分类 20 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 致病物质 所致疾病 21 （一）致病物质 p毒素 细胞毒素（、杀白细胞素）、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1、肠毒素等。 p酶 凝固酶、纤维蛋白溶酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等。 p其他 粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖等。 22 凝固酶（c

6、oagulase） p能使含有枸橼酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。 p作用： l抗吞噬作用（纤维蛋白沉积细菌表面） l保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 l使感染易于局限化和形成血栓 p意义：鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。 23 葡萄球菌溶素（膜损伤毒素）： p损伤细胞膜的毒素，主要是溶素。 p溶素对多种哺乳动物RBC有溶血作用。对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等 均有损伤作用。 p溶素是一种外毒素，可制成类毒素。 杀白细胞素：攻击中性粒细胞和巨噬细胞，能抗吞噬和增强病菌 的侵袭力。 24 肠毒素（enterotoxin） p约1/3临床分离的金黄色葡萄球

7、菌可产生肠毒素。 p耐热的外毒素 p引起急性胃肠炎即食物中毒。 p作用机制：到达中枢神经系统后刺激呕吐中枢而导致以呕吐为 主要症状的食物中毒。 25 表皮剥脱毒素（exfoliatin） p蛋白质外毒素，使表皮和真皮脱离。 p可引起烫伤样皮肤综合征（staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS），又称剥脱性皮炎，多见于新生儿、幼 儿和免疫功能低下的成人。 26 毒性休克综合征毒素-1 （ TSST-1） pTSST-1可引起机体发热，增加对毒素的敏感性； p可引起机体多个器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征 （TSS）。 27 其他 耐热核酸酶（heat-

8、stable nuclease） 致病性葡萄球菌能产生该酶。耐热，经10015min或60 2h不被破坏；能较强的降解 DNA和RNA。 耐热核酸酶可作为测定葡萄球菌有无致病性的重要指标之一。 28 1、化脓性感染: 化脓性炎症大多由致病性较强的金葡菌引起。 （1）局部感染：疖、痈、毛囊炎、甲沟炎、蜂窝组织炎、脓胸、 伤口化脓 （2）全身感染：败血症、脓毒血症 特点：脓液稠厚，不易扩散 29 化脓性感染 疖疖 痈 : 30 化脓性感染 31 2、毒素性疾病 l食物中毒 由葡萄球菌肠毒素引起。为毒素性食物中毒，16h出现症 状，以呕吐为主要症状，大多于12d内恢复。 32 l假膜性肠炎 是一种菌

9、群失调性肠炎。主要表现为腹泻。病理特点是肠粘 膜被一层炎性假膜覆盖。现认为主要由艰难梭菌所致，金黄色 葡萄球菌仅为伴随菌。 33 l烫伤样皮肤综合征 由表皮剥脱毒素引起，导致表皮上层脱落。 34 l毒性休克综合征毒性休克综合征 由毒性休克综合征毒素-1引起，主要表现为急性高热、低血 压、腥红热样皮疹伴脱屑。严重时出现休克。 35 （三）免疫性 p人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力。 p患病后，能获得一定的免疫力，但不强。 36 幼猫试验 三、微生物学检查法 标本标本脓汁、血液、脑脊液、剩余食物、呕吐物等 分离培养分离培养 与鉴定与鉴定 触酶 血浆凝固酶 发酵甘露醇 耐热核酸酶 直接涂片镜检直接涂

10、片镜检革兰阳性葡萄球菌 生长现象色素、溶血等 生化反应 毒素检查 37 致病性葡萄球菌的主要鉴别依据 l金黄色色素 l 溶血 l凝固酶阳性 l耐热核酸酶阳性 l分解甘露醇 38 四、防治原则 防防 注意 消毒隔离 注意 个人卫生 防止 医源性感染 防止 耐药性产生 治 抗菌素 药敏试验 自身菌苗疗法 39 第二节第二节 链球菌属链球菌属 （StreptococcusStreptococcus） 对人类致病的主要是A A群链球菌群链球菌和肺炎链球菌。肺炎链球菌。 40 1、形态与染色 p球形或椭圆形，呈链状排列。 p无芽胞，无鞭毛。培养早期（24h）形成透明质酸的荚膜。 p细胞壁外有菌毛样结构，

11、含有型特异性M蛋白。 p革兰染色阳性。 一、生物学性状 41 42 2、培养特性 p营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖等。 p在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀。 p在血琼脂平板上形成灰白色半透明、表面光滑、边缘整齐的菌 落，不同菌株溶血不一。 43 3、生化反应 p分解葡萄糖，产酸不产气。 p触酶阴性。 p链球菌一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两特性可用来鉴别 甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。 44 4、抗原结构 p蛋白质抗原：或称表面抗原。具有型特异性。A群链球菌有M、 T、R和S不同性质的蛋白质抗原，与致病性有关的是M抗原。 p多糖抗原：或称C抗原。是群特异性抗原，是细胞壁的多糖组

12、分。 p核蛋白抗原：或称P抗原。无特异性。 45 5、分类 l根据溶血现象分类 l根据抗原结构的分类 46 根据溶血现象分类 l甲型溶血性链球菌：草绿色溶血环，称甲型溶血或溶血，溶 血环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。 l乙型溶血性链球菌：完全透明溶血环，称乙型溶血或溶血， 溶血环中的红细胞完全溶解，致病力强。 l丙型链球菌：无溶血环，又称不溶血性链球菌。一般不致病。 47 48 根据抗原结构的分类 p按多糖抗原，可分成20群。对人致病的链球菌菌株，90%左右 属A群。 pA群根据其M抗原不同，可分为100个型。 49 6、抵抗力 p抵抗力比较弱。 p对常用消毒剂敏感。 p对青霉素、红

13、霉素，四环素和磺胺药都很敏感。青霉素是治疗 首选药物，极少发现有耐药菌株。 50 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 51 （一）致病物质 l链球菌溶素（streptolysin） l致热外毒素（pyrogenic exotoxin） l透明质酸酶 l脂磷壁酸 lM蛋白 l链激酶（streptokinase; SK） l链道酶（streptodornase; SD） 52 1 1、毒素 l是人类猩红热的主要毒性物质。 l由A群链球菌溶原菌菌株产生。 53 根据对氧的稳定性可分为： lSLO (链球菌溶素O)： 对O2敏感，氧化后即失去溶血活性。 抗原性强，可刺激机体产生SLO抗体（即抗“O”

14、）， 常用于风湿热活动性及肾小球肾炎的辅助诊断。（1:400） lSLS (链球菌溶素S)： 对O2稳定 破坏红细胞 无免疫原性，不产生抗体。 54 2 2、侵袭性酶 p透明质酸酶 l又名扩散因子 l能分解细胞间质的透明质酸，使病菌易在组织中扩散。 55 p链激酶（streptokinase; SK） 能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，可溶解血块或 阻止血浆凝固，有利于病菌在组织中扩散。 p链道酶（streptodornase; SD） 亦称链球菌DNA酶。能降解脓液中具有高度粘稠性的DNA， 使脓液稀薄，促进病菌扩散。 56 3 3、细胞壁成分 p脂磷壁酸（LTA） l 围绕在M蛋白外层

15、，与M蛋白共同组成链球菌的菌毛样结构。 l与人类多种细胞膜上的受体结合，使细菌能定植在皮肤和粘 膜表面。 pM蛋白 l有抗吞噬和抵抗吞噬细胞内的杀菌作用 l与某些超敏反应疾病有关 57 58 （二）所致疾病 A群链球菌为主，占90% p化脓性（淋巴管炎、淋巴结炎、扁桃体炎、咽炎、中耳炎等） p中毒性 l猩红热 p超敏反应性 l风湿热 l急性肾小球肾炎 59 猩红热皮疹猩红热皮疹 小儿猩红热 60 61 （三）免疫性 p可获得对同型链球菌的特异性免疫力。 p但因其型别多，各型间无交叉免疫力，故常可反复感染。 p患猩红热后能建立牢固的同型抗毒素免疫。 62 三、微生物学检查法三、微生物学检查法 p

16、标本：脓液、咽拭子 p直接涂片镜检 p分离培养与鉴定 接种在血琼脂平板 l如有溶血菌落，应与葡萄球菌区别 l溶血菌落，要和肺炎链球菌鉴别 63 血清学诊断 p抗链球菌溶血素O试验（antistreptolysin O test, ASO test） SLO+RBC 溶血 SLO+患者血清+RBC 不溶血 结果：效价大于400单位 意义：风湿热及其活动性的辅助诊断风湿热及其活动性的辅助诊断 64 四、防治原则四、防治原则 p减少传染源 p注意消毒 p治疗患者以青霉素G为首选药物，须治疗彻底，防止超敏反应性 疾病的发生。 65 第三节第三节 肺炎链球菌肺炎链球菌 （S S. .pneumoniae

17、pneumoniae） 66 G+双球菌，呈矛尖状 培养：营养要求高。在血平板上的菌落细小、圆形略扁、灰白色 半透明，菌落周围出现草绿色溶血环，培养时间 48小时，菌落 呈脐状 生化反应：与甲型链球菌的鉴别菊糖发酵试验、胆汁溶菌试菊糖发酵试验、胆汁溶菌试 验验 一、生物学性状 67 68 肺炎链球菌菌落-扁平状 69 肺炎链球菌落-脐状 70 二、致病性 p致病物质 l荚膜 l肺炎链球菌溶素O l脂磷壁酸 l神经氨酸酶 p所致疾病 l大叶性肺炎 l化脓性中耳炎、胸膜炎、脓胸、脑膜炎或败血症 71 三、微生物学检查法 p标本：取痰液、脓汁、血液或脑脊液等 p直接涂片镜检 p分离培养与鉴定：（与甲

18、型溶血性链球菌鉴别） 胆汁溶菌试验 Optochin试验 荚膜肿胀试验 p动物试验：少量具有毒力的肺炎链球菌注入小鼠腹腔内，一般 24h内死亡。 72 右侧：肺炎链球菌（澄清、透明） 左侧：甲型溶血性链球菌（浑浊） 胆汁溶菌试验 73 四、防治原则 p荚膜多糖多价疫苗 p治疗前作常规药物敏感试验 74 第四节第四节 奈瑟菌属奈瑟菌属 （NeisseriaNeisseria） 75 概述 p革兰阴性双球菌。无鞭毛。无芽胞。有荚膜和菌毛。 p种类 l脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis） l淋病奈瑟菌（N. gonorrhoeae） l干燥奈瑟菌（N. sicca）、浅黄奈瑟菌（N. sub

19、flava）、金黄奈瑟菌（N. flavescens）、粘膜奈瑟 菌（N. mucosa）等 76 一、脑膜炎奈瑟菌一、脑膜炎奈瑟菌 （meningococcusmeningococcus） 77 （一）生物学性状 p形态与染色：肾形或豆形革兰阴性双球菌，新分离菌株大多有 荚膜和菌毛。 p培养特性：营养要求较高，常用巧克力（色）培养基。专性需 氧，5% CO2 条件下生长更佳。菌落为圆形光滑似露滴状。血 平板上不溶血。 p抵抗力：很弱。对干燥、热力、消毒剂等均敏感。 78 79 A BA B 80 （二）致病性 p致病物质 侵袭力：荚膜和菌毛 毒素：内毒素，是脑膜炎奈瑟菌的主要致病物质。 p所

20、致疾病 p 流行性脑脊髓膜炎（简称流脑） p 主要经飞沫传播：鼻咽部炎症-败血症-脑膜炎 81 标本 分离培养与鉴定 脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭子 保暖、保湿、立即送检，培养基预温。 最好床边接种。 直接涂片镜检 中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊 断。断。 巧克力（色）培养基，5% CO2气体。 生化反应和玻片凝集试验鉴定。 快速诊断对流免疫电泳，SPA协同凝集试验 （三）微生物学检查法 82 （四）防治原则 p流脑荚膜多糖疫苗（A+C）进行特异性预防。 p注意隔离治疗流脑患者，控制传染源。 p流行期间儿童可口服磺胺药物等预防

21、。 83 二、淋病奈瑟菌二、淋病奈瑟菌 （gonococcusgonococcus） 84 （一）生物学性状 p形态与染色：革兰阴性双球菌，似一对咖啡豆。无芽胞。无鞭毛。 有荚膜和菌毛。 p培养特性：专性需氧，初次分离培养时需供给5% CO2。营养要求 高，巧克力（色）血琼脂平板是适宜培养基。 p抵抗力：热、冷、干燥和消毒剂极敏感，1%石炭酸 3 min或 1:4000硝酸银2 min即死亡。 85 Neisseria gonorrhoeae Gram stain of pure culture Neisseria gonorrhoeae Gram stain of a pustular ex

22、udate Neisseria gonorrhoeae 淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 86 87 人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。 主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症。 淋病淋病 新生儿新生儿 淋菌性结膜炎淋菌性结膜炎 新生儿由产道感染 所致疾病所致疾病 88 （三）微生物学检查法 标本标本用无菌棉拭沾取 直接涂片镜检直接涂片镜检 在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌时，有诊断价值在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌时，有诊断价值 分离培养与鉴定分离培养与鉴定 标本采集后应注意保暖保湿，立即送检接种 泌尿生殖道脓性分泌物 子宫颈口表面分泌物 巧克力色平板，510% CO2气体 89 （四）防治原则 90 Neisseria gonorrhoeae Purulent conjunctivitis Ophthalmia neonatorum Infection in newborns during vaginal delivery 91 第五节第五节 假单胞菌属假单胞菌属 PseudomonasPseudomonas 92 p一类G-杆菌，种类繁多，其中铜绿假单胞菌常见的条件 致病菌，也是院内感染常见菌。 p因在生长过程中产生绿色水溶性色素，感染后的脓汁或敷料上 出现绿色，故俗称绿脓杆菌。 93 p直或微弯G杆