微囊藻毒素神经毒理学研究进展

1、生态毒理学报2011 年 第 6 卷第 1 期 ,18222vol . 6 , 2011no . 1 , 18222a sia n j o ur nal of eco to xicolo gy微囊藻毒素神经毒理学研究进展居静娟1 , 浦跃朴1 ,尹立红1 ,3 王大勇2 ,3,1 . 东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室 ,南京 2100092 . 东南大学生命科学研究院发育与疾病相关基因教育部重点实验室 ,南京 210009摘要 : 微囊藻毒素 ( microcystins ,mcs) 是蓝藻产生的主要毒素 ,中毒人群或动物会表现出神经毒害症状 ,目前越来越多的研究关注其神经毒害

2、及毒理 。mcs 可能由有机阴离子转运肽 ( oa t p) 转运并穿过血脑屏障 ,在动物脑组织中分布与蓄积 。mcs 会严重 影响神经发育 ,损害动物的神经系统功能 。mcs 可能通过影响脑组织中的解毒与抗氧化系统 ,诱发其对动物神经系统发育与功能 的伤害 。在分析与讨论 mcs 神经毒理研究目前所面临的问题基础上 ,提出了相应研究策略的建议 。关键词 : 微囊藻毒素 ; 神经毒理 ; 模式动物文章编号 : 167325897 (2011) 62018205 中国分类号 : x171 . 5文献标识码 : astudies on microcystin neurotoxicologyj u

3、j i ngj ua n1 , pu yuep u1 , yi n l i ho ng1 , 3 , wa ng dayo ng2 , 31 . key l a bo rato r y of enviro nmental medicine engineering , mini st ry of educatio n ; school of public healt h , so ut hea st u niver sit y , nanjing 210009 , china2 . key l a bo rato r y of develop mental gene s a nd h uma n

4、 di sea ses , instit ut e of l if e science s , so ut hea st u niver sit y , na njing 210009 , chinareceived 2 may 2010accepted 3 a ugu st 2010abstract : microcy sti n s ( m cs) a re co n si dere d to be t he mo st co mmo n to xi n p ro duced by cya no bact eria , a ndm cs e xpo sure i nduce s t he

5、fo r matio n of ne uro to xicitive symp to ms i n h uma n a nd a ni mal s. so f a r , mo re a nd mo re st udie s ha ve focu se d o n m cs ne uro to xicolo gy . m cs ma y be t ra n spo r t ed by me mbe r s of o r ga nic a nio nt ra n spo r ti ng polyp ep ti de ( o a t p) t hro ugh bloo d2brai n ba r

6、rier to di st ri b ut e a nd accu mulat e i n brai n cell s of a n2i mal s. m cs e xpo sure ca n seve rel y i n hi bit t he ne uro nal develop me nt a nd di sr up t t he f unctio n s of ner vo u s sy s2t e m i n a ni mal s. m cs may re sult i n t he da ma ge o n t he develop me nt a nd f u nctio n s

7、 of ne r vo u s sy st e m t hro ugh i nf l ue nci ng t he deto xificatio n a nd a ntio xi da nt re spo n se s i n a ni mal s. the que stio n s w hic h need to be sol ve d fo r m cs ne uro to xicolo gical st udie s a re a nal yzed a nd di sc u sse d. mo reo ver , sugge stio n s fo r f ut ure st udie

8、s o n m cs ne uro to xicolo gy a re p ro vi ded .key words : microcysti n ; ne uro to xicolo gy ; mo del o r ga ni sm1引言( introduct ion)近年来 ,随着工农业生产的发展以及工业和生活 污水对地面水体污染的日趋严重 ,大量氮 、磷进入水体中 ,导致 水 体 富 营 养 化 现 象 日 益 严 重 , 水 华 形 成 。 水体富营养化会导致水面形成厚厚的蓝绿色湖靛 ,散发出难闻气味 ,水质恶化 ,水中溶解氧减少 ,生物多样性降低 ,严重破坏健康平衡的水生生态平衡 (

9、 ha ve n s ,2008) 。更严重的是 , 因为藻细胞破裂后释放出多种 藻毒素 ,这些毒素对动物和人类的饮水安全构成了严重的威胁 (de fi guei re do et al . , 2004) 。淡水水体中收稿日期 :2010205202录用日期 :2010208203基金项目 :国家自然科学基金项目 ( no . 30870810 ,81072258 ,30901167 ,30972440) ,江苏省自然科学基金 ( no . b k2009281)作者简介 :居静娟 (19852) , 女 , 博士生 , e2mail : 76387804 qq. co m ; 3 通讯作者

10、 (corresponding aut hor) , e2mail : dayongw seu. edu. cn or l hyinseu. edu. cn的藻毒素污染已经是全球性严峻的环境问题 ,世界上淡水湖泊蓝藻水华发生的频率与严重性均呈现迅猛 增长趋势 。中国是世界上水体富营养化现象最严重 的国家之一 ,早在 20 世纪 60 年代太湖中就已经发现 有蓝藻水华出现 , 富 营养 化湖 泊 比例 由上 个 世纪 70 年代末的 41 %发展到 90 年代后期的 77 % ,其中太湖 和滇 池 为 劣 类 , 富 营 养 化 问 题 十 分 严 峻 ( ya n et al . , 2002

11、) 。蓝藻是一种广泛生长和浮游在水体中的有害藻 类 ,世界上 25 % - 70 %的蓝藻水华污染 可产 生藻 毒 素 。其中微囊藻通常是蓝藻水华中的优势藻株 ,而对 应的微囊 藻毒 素 ( microcy sti n s , m cs) 则 是 一 种 在 蓝 藻水华污染中出现频率最高 、产生量最大和产生危害 最严重的 藻毒 素种 类 。在淡 水中 , 目 前已 经 发现 60 多种 m cs ,其基本结构是由 7 个氨基酸组成的环状多 肽 ,也称 7 肽单环肝毒素 ,分子量都在 1 000 左右 ,且 已知的 m cs 中均含有一种特殊的 32氨基292甲氨基22 ,6 , 82三 甲 基

12、2102苯 基 癸24 , 62二 烯 酸 ( a dda ) ( ha2 ve n s , 2008) 。在这些 m cs 中 ,毒性较大 、含量较多的 有 m c2l r 、m c2r r 、m c2yr 。其 中 , m c2l r 存 在 较为普遍 ,产量较大 、毒性较强 ,研究较为广泛 。mcs ,作为具有高度肝毒性毒物的代表 ,除了引起 肝脏损伤外 ,目前证明还可能引起肾脏损伤 、胃肠道紊 乱 、生殖毒害和神经毒害等 。1996 年 ,在巴西的血液透 析中心 ,131 位病人使用了被藻毒素污染的水进行透析 ,其中的 76 位病人死于肝损伤或多器官衰竭 ( car2 michael

13、et al . , 2001) 。事发后 ,从这些病人接触的透析 水中检 测 到 mcs 的 浓 度 大 约 是 19. 5 g l - 1 ( car2 michael et al . , 2001) 。另外 , fischer et al . (2005) 发现 有一些参与转运 mcs 的阴离子转运多肽同时存在于肝脏和脑中 ,这说明除了肝脏外 ,脑组织可能也是 mcs 的 毒害靶器官 ,进而诱发产生相应的严重神经毒性 。鉴 于 mcs 的神经毒害以及神经毒理越来越受到国内外环 境毒理学领域的重视与关注 ,本文就近些年来国内外 对 mcs 神经毒理的研究进展进行综述 ,并分析与讨论进一步研究

14、的趋势与策略 。射 m c2l r 约 45 和 60 mi n 后 , 脑 组 织 中 即 出 现 了m c2l r 分 布 ( me ril uo to et al . , 1990 ; ni shiwa ki et a l . , 1994) 。进而 ,向大鼠静脉按 80 gkg - 1 体重比 例注射 m c2l r 约 1 、2 、4 、6 、12 、24 h 并 经 液 质 联 用 (l s2m s) 技术测定各组织中 m cs 含量 。结果显示在 大鼠脑内存在一定量的 m cs 分布与蓄积 , 且在大鼠脑内分布的主要是 m c2r r , m c2l r 蓄积较少 ( wa ng

15、 et al . , 2008) 。最近 ,在小鼠中利用 m cs 抗体进行免 疫杂交分 析 表 明 , 在 全 脑 细 胞 中 m cs 的 积 累 具 有m cs 暴露浓度依赖的特性 ( fe ur st ei n et a l . , 2009) 。 鉴于藻毒素在自然环境中与鱼类的关系最为紧密 ,对鱼类的危害也十分严重 ,进一步用标记的 m cs注射鲤鱼 ,发现 m c2l r 在其脑组织中存在分布与蓄 积 ( fi sc he r a nd diet rich , 2000) 。其后 ,利用 m c2r r 喂饲野生 鱼 类 j e n u ns i a m u l t i de nt

16、 at a , 经 h pl c 技术分析发现 m c2r r 也在该种鱼类的脑组织中存在分布与蓄积 ( caze nave et al . , 2005) 。3 mcs 向动物脑组织转运的机制研究 m cs 的分布和转运将为进一步探讨其健康 损害的机制奠定重要的基础 。在鱼类的研究中指出 ,m cs 可以由肠道与鳃部 ( 分别对应消化与呼吸功能) 吸收 ,而同 时 m cs 还 可 以 分 布 于 脑 组 织 中 , 这 说 明 m cs 可以经血流运输并穿越血脑屏障进入脑组织中产生危害 ( caze nave et al . , 2005) 。这些结果为我们 提出了新的问题 ,即 m cs

17、 是如何通过血脑屏障到达动物脑组织的 。有关 m cs 的转运机制 , 最初利用爪蟾卵母细胞 表 达 体 系 证 实 了 有 机 阴 离 子 转 运 肽 ( o r ga nic a nio nt ra n spo r ti ng pol yp ep ti de , o a t p) 参 与 m cs 的 转 运 调控 。在 曾 经 考 察 的 有 机 阴 离 子 转 运 肽 中 , 大 鼠oatp 1 b2 、 人 o a t p1b1 、 人 o a t p1b3 与 人o a t p1a2 可 以 高 效 参 与 m cs 的 转 运 , 且 其 对 于m cs 的转运受到有机阴离子转运

18、肽底物牛黄胆酸盐 以及磺 溴 酞 钠 盐 的 抑 制 ( fi sc he r et a l . , 2005 ) 。同时 , 证 明 oatp 1 b 2 、oa t p1b1 与 o a t p1b3 参 与m cs 向肝脏的转运 ,而 oa t p1a2 参与 m cs 向脑组织的转运 ( gao et a l . , 2000 ; fi scher et al . , 2005) 。2mcs 在动物脑中存在分布与蓄积的证据目前对于肝脏作为 m cs 作用的主要靶器官已经 得到确认 ( de fi guei re do et a l . , 2004) , 同时在水生 与陆生 动 物 中

19、 也 证 实 m cs 在 动 物 的 脑 中 分 布 与 富集 。最早 ,当向雌性大鼠静脉注射标记后的 m cs 后发现在其大脑内存在少量 m cs 分布与蓄积 ( falco ne ret a l . , 1986) 。其后 ,对小鼠进行口腔灌服或腹腔注此外 ,oatp 1a1 、oatp 1a 4 与 o a t p2b1 也可以表达于动物脑组织中 ( fi sc her et a l . , 2005 ) ,但是其是否以及如何参与 m cs 向脑 组 织 的 转 运 需 要 深 入 研 究 。最近 ,有机 阴 离 子 转 运 肽 参 与 m cs 向 脑 组 织 的 转运功能进一步 在

20、 小 鼠 全 脑 细 胞 研 究 体 系 中 得 到 了 证 实 ,作者基于研究数据并推断 m c2l f 与 m c2l w 可能具 有 相 对 于 m c2l r 更 强 的诱导动物神经毒害20生态毒理学报第 6 卷的潜力 ( fe ur st ei n et a l . , 2009 ) 。但是 , 在大鼠中的研究中 , 其 脑组 织蓄 积 更多 的 是 m c2r r , 相 对 m c2l r 蓄积的量很少 ,因此推测大鼠的血脑屏障可能会 选择性地 抑制 高毒 性 的 m cs ( wa ng et al . , 2008 ) 。 因而 ,对于不同种类的 m cs 在动物脑组织中的转

21、运 以及毒害机理尚需要深入解析 ,目前尚难定论 。重影响神经系统的功能 。神经运动行为包括一系列可观察到的明确的全身运动 ,受神经系统的支配 , 协 助动物的生存 、生长和繁殖 。较早时期考察 m cs 暴露对神经系统功能的损害 ,是运用的鱼类研究体系 。低浓度 m c2l r 暴 露 诱发 斑马 鱼 白天 运 动 能 力 的 增加 ,高浓度 m c2l r 暴露导致斑马鱼白天运动能力与 产卵能力的显著降低以及夜晚斑马鱼游动能力的显 著提高 (ba ga nz et a l . , 1998) 。进一 步比 较 m c2l r暴露斑马鱼与 l e uc as p i us del i ne a

22、t us 的神经系 统功能 ,发现 m c2l r 暴露对于 斑 马鱼 与 l e uc as p i us de2l i ne at us 的运动行为影响相似 ,但是对于两种鱼类的 生物节律反应影响则呈现出很大差异 , m c2l r 暴露对于不同动物的神经毒害以及机理可能不同 (ba ga nzet al . , 2004) 。此外 ,利用鱼类 j e n u ns i a m u l t i de nt a2 t a 考察 m c2r r 暴露对于神经系统功能的影响 ,发现 低浓度 m c2r r 暴露显著提高该种鱼类的泳动速率与 运动频率 ,而高浓度 m c2r r 暴露显著降低该种鱼

23、类 的泳动速率与运动频率 ( caze nave et al . , 2008) 。运用模式动物秀丽线虫考察 m c2l r 暴露对于神 经系统功能的影响 ,发现当 m c2l r 暴露浓度大于或 等于 10 gl - 1 时显著降低动物的头部摆动频率和身 体弯曲频率 ,而且神经系统是 m c2l r 暴露伤害的主 要组织部位之一 (l i et al . , 2009 b) 。此外 ,在秀丽线 虫中 ,当 m c2l r 暴露浓度大于或等于 40 g l - 1 时 显著降低动物对于 na cl 和丁二酮的趋向性 ,当 m c24 mcs 对神经系统发育的损害较早意识到 m cs 暴露能够对

24、神经系统发育产生 严重损害 ,是通过微囊藻提取物喂饲小鼠的 5 d 龄后 代脑组织结构的观察实验 。结果发现 10 %的初生小 鼠脑组织区域体积缩小 ,而且控制认知功能的海马区 外周组织严重病变 ( falco ne r et al . , 1988) 。其后 ,在临床上的观察更意识到 m cs 暴露将会 导致对神经系统发育严重的损害 。1996 年 ,在巴西的 血液透析 中 心 , 被 藻 毒 素 污 染 水 透 析 的 131 位 病 人 中 ,89 %的病人均出现即发的神经系统症状 ,如头晕 、 耳鸣 、眩晕 、头痛 、呕吐 、恶心 、轻度耳聋 、视力障碍和 失明等 ( ca r mic

25、 hael et al . , 2001) 。对于培养的神经元细胞 ,m cs 暴露将会诱导产生 更明显的发育缺陷 。将分离培养得到的小鼠全脑神 经元细胞暴露于不同剂量的 m c2l r 约 48 h 后 ,可以 观察到 m c2l r 既可以分布于神经元细胞的细胞质也 可以分布于神经元细胞的细胞核中 ,而且随着暴露浓 度的增加神经元细胞细胞骨架的完整性被破坏得越 来越严重 ,细胞核附近的肌动蛋白丝聚集得越来越密 集 ( fe ur st ei n et a l . , 2009) 。最近 ,利用模式动物秀丽线虫作为研究体系 , 进 一步证实 m cs 暴露将会诱导特定动物感觉神经元的 发育缺

26、陷 。当 m c2l r 暴露浓 度大 于 或等 于 10 g l - 1 时 ,秀丽线虫的 a s e 、a wa 与 a fd 感觉神经元 以及 a i y 中间神经元均出现了严重的发育缺陷 , 而 且控制 a s e 与 a wa 感 觉 神 经 元 发 育 特 性 的 基 因c he21 与 o d r27 表达水平在 m c2l r 暴露浓度大于或 等于 10gl - 1 时显著降低 ,尤其是控制 a fd 感觉神 经元 与 a i y 中 间 神 经 元 发 育 特 性 的 基 因 c he21 与 o d r27 表达水平在 m c2l r 暴露浓度大于或等于 1 gl - 1

27、时即观察到显著降低的趋势 (l i et a l . , 2009a) 。l r 暴露浓度大于或等于 20 gl 时显著降低动物对于培养温度的趋向性 (l i et al . , 2009a ) 。而且 ,控 制 a s e 、a wa 与 a fd 感觉神经元以及 a i y 中间神经元发育特性与功能的 c he21 、o d r27 、t t x21 、t t x23 基因发生突变后分别导致秀丽线虫相对于野生型出现 更严重的对于 na cl 和丁二酮以及培养温度的趋向性 (l i et a l . , 2009a) 。在高等动物大鼠中 , 发现 m cs 提取物可以严重 影响动物的短时程和

28、长时程记忆 ,空间学习能力同样 呈现出降低的趋势 ( mai da na et al . , 2006) 。作者在 针对数据进行讨论时 , 进而提出在 m cs 暴露大鼠中 所观察到的记性行为伤害可能是 m cs 暴露诱发的次 级影响 ,因为神经损伤等可以直接相关氧化胁迫 、脂质过 氧 化 或 dn a 损 伤 而 形 成 ( mai da na et a l . ,2006) 。另外 ,早期的研究曾 经证 实 , m c2l r 作 为蛋 白磷酸酶的抑制剂可以延长五羟色胺与 ca m p 诱导 的感觉神经元电流并影响膜上离子通道生理活性的 调节 ( ic hi no se , et a l

29、. , 1990 ; ichi no se a nd b yr ne ,1991) ,因而 m cs 也可能是经由对于蛋白磷酸酶功能 的影响从而调控动物的神经系统功能 。- 15mcs 对神经系统功能的损害m cs 暴露不仅仅严重影响神经系统的发育 ,更严尤其是这些有机阴离子转运肽究竟具体经由怎样的分子机制调控着 mcs 在生物体内的转运尚不清楚 。同 时 ,针对 mcs 转运机理的解 析 更需 要与 上 文讨 论的 mcs 可能在神经元中的定位结合起来进行研究 。针对 m cs 的神经毒害机制 , 目前的研究数据暗示了如下 3 种可能 : ( 1) 直接影响与调控相应神经系 统的发育与功能

30、,例如伴随着 m c2l r 暴露秀丽线虫 中 a s e 、a wa 与 a fd 感觉神经元以及 a i y 中间神 经元严重发育缺陷的发生 ,控制相应感觉神经元与中 间神经元发育特性的基因表达水平也显著降低 (l i et a l . , 2009a) ; (2) 通过诱发氧化胁迫或抑制抗氧化系 统而间接影响神经系统发育与功能 ,针对此种可能目 前尚缺乏相应的直接证据 ; ( 3) 通过抑制蛋白磷酸化 酶活性而间接影响神经系统发育与功能 ,针对此种可 能目前无论直接还是间接证据均缺乏 。但是 ,针对第3 种可能作用机制目前存在了一些研究数据支持 ,例 如发现在动物脑组织存在 m cs 与

31、蛋白磷酸化酶 p p1 以及 p p2a 的结合效应 ( fe ur st ei n et al . , 2009) , 而 且 m cs 处理的神经元细胞细胞骨架的完整性与蛋白磷酸 化 酶 活 性 的 抑 制 密 切 相 关 ( fe ur st ei n et a l . ,2009) 。 鉴于目前模式动物在神经系统发育与功能研究中的重要贡献 ,接下来针对 m cs 转运机理以及神经 毒理的研究 ,建议充分利用模式动物在发育毒理学上的研 究优 势 , 从更 深层 次 的分 子与 遗 传机 制上 阐 明m cs 的转运机理以及神经毒理 。例如 ,模式动物秀丽 线虫 ,其全身一共只有 302

32、个神经元 , 动物的完整细胞谱系已经绘制完整 ,所有神经元之间的连接信息清楚 ,神经发育与功能相关研究背景丰富 。尤其是 , 该 种模式动物目前已经在国内外广泛并成功地应用于 环境毒理研究 ( 张艳芬等 , 2008) 。此外 , 斑马鱼也是 开展 m cs 转运机理以及神经毒理学研究的很好的模 式动物 。此外 ,目前我们对 m cs 暴露诱发人类神经的毒 害以及机理几乎一无所知 。鉴于 m cs 是在人类饮用 水中无法完全去除的有害毒素 ,因此可否结合特定区 域开展大规模人群的队列调查以确认 m cs 暴露与人 类神经系统功能伤害之间可能的因果关系更值得关 切 。并在此基础上 , 系统开展

33、m cs 暴露诱发人类神 经毒害的机理工作 。6mcs 对动物脑组织解毒与抗氧化系统的调控抗氧化酶的活性增强间接反映了活性氧 ( ro s) 的形成 ,同时也表明了动物组织正在进行解毒行为 。 针对 m cs 对于动物抗氧化系统的影响 , 首先在鱼类 co r y d o r as p a l e at us 中发现 m c2r r 处理可以抑制脑 组织中谷胱甘肽转移酶 ( gs t) 的活性 ,表明其脑组织 中的解毒能力随着 m c2r r 处理浓度的升高逐渐降低( caze na ve et al . , 2006) 。同时 ,较高浓度 m c2r r 处 理相对特 异地 导致 鱼 类 c

34、o r y d o r as p al e at us 脑组 织 中脂质过氧化水平的升高 ( caze na ve et al . , 2006 ) 。 进而 ,在大鼠的脑海马组织区域 ,发现 m cs 提取物处 理导致该区域内抗氧化酶 gs t 活性的降低以及脂质 过氧化与 dn a 损伤的发生 ( mai da na et a l . , 2006) 。 此外 ,在 m c2l r 处理的秀丽线虫神经系统中也观察 到显著的胁迫反应 (l i et al . , 2009 b) 。因此 ,进一步 考察抗 氧 化 药 物 , 例 如 维 生 素 e 与 谷 胱 甘 肽 , 对 于m cs 神经

35、毒害的预防与恢复效应便显得十分必要 。 以往报道已经表明 ,针对 m cs 诱导的肝脏细胞毒害 可以通过早期进行谷胱甘肽前体处理显著预防 ( di nget a l . , 2000) 。7 问题与展望目前 ,虽然有关 m cs 的神经毒理研究已经取得 了一些进展 ,但是没有被深入阐明的问题仍然很多 。首先 ,利用水生与陆生动物虽然已经证实 m cs 定位 于动物的脑组织中 ( falco ner et a l . , 1986 ; me ril uo to et a l . , 1990 ; ni shiwa ki et a l . , 1994 ; fi sc he r a nd di2e

36、t ric h , 2000 ;de fi guei redo et a l . , 2004 ; caze nave et a l . , 2005 ; wa ng et al . , 2008 ; fe ur st ei n et al . ,2009) ,但是具体来讲 ,m cs 是否主要直接定位于神经元细胞尚没有任何证据 。脑组织除了神经元细胞 ,还 包括神经胶质细胞以及其他一些与神经系统功能可 能并不直 接 相 关 的 细 胞 。因 此 , 目 前 十 分 迫 切 确 定m cs 是否主要定位于神经元细胞 。此外 ,若 m cs 可 以定位于神经元细胞 , 那么 m cs 是更偏爱兴

37、奋性还 是抑制性神经元 ,或者并不存在偏爱性 。上述问题的解析将有助于我们预测或评价 m cs 可能对人体神经系统功能的伤害 ,或者是否可能作为相应神经疾病诱 发的重要的环境因素 。针对 mcs 转运机理的解析 ,目前基于基因表达模 式以及药物实验鉴定了 4 个有机阴离子转运肽 ( gao etal . , 2000 ; fischer et al . , 2005 ; feur stein et al . ,2009) ,但是到目前一直没有直接的分子与遗传证据 。通讯作者简介 :王大勇 (1972 ) ,男 ,东南大学生命科学研究院教授 ,博士生导师 ,2007 年入选教育部新世纪优秀人才支

38、持计 划 ,主要从事模式生物毒理学与认知神经生物学研究 。尹立红 (1963 ) ,女 ,东南大学公共卫生学院 ,教授 ,博士生导师 ,主要22生态毒理学报第 6 卷从事环境卫生与卫生毒理学研究 。macolo gy , 203 (3) : 257 - 263gao b , hagenbuch b , kulla k2u blick g a , et al .2000 . o r2ref erencesbaga nz d , staak s g , steinber g c. 1998 . impact of t he cya2 no bacteria to xin , microcystin

39、2l r o n behavio ur of zebrafi sh , d a ni o re ri o j . water re search , 32 (3) : 948 - 952baga nz d , staak s g , pf l ugmacher s , et al . 2004 . co mpa ra2 tive st udy of microcystin2l r2induced behavio ral cha nge s of t wo fi sh sp ecie s j . enviro nmental to xicolo gy , 19 (6) : 564 - 570ca

40、 r michael w w , azevedo s m , a n j s , et al . 2001 . h uma n f at alitie s f ro m cya no bacteria : chemical a nd biolo gical evidence fo r cyano to xins j . enviro nmental healt h a nd per sp ective s ,109 (7) : 663 - 668cazenave j , wunderlin d a , bistoni m a , et al . 2005. uptake , tissue di

41、st ributio n and accumulation of microcystin2rr in cory do2 ras p aleat us , j eny nsi a m ul ti dent at a and o dontest hes bona riensis : a field and laborato ry st udy j . aquatic toxicology , 75 (2) : 178- 190cazenave j , bi sto ni m a , pesce s f , et al . 2006 . diff erential deto xificatio n

42、a nd a ntio xida nt re spo nse in diver se o r ga ns of cor y do ras p ale at us exp erimentally expo sed to microcystin2rr j . aquatic to xicolo gy , 76 (1) : 1 - 12cazenave j , no re s m l , miceli m , et al . 2008 . cha nge s in t he swimming activit y and t he gl utat hio ne s2t ra nsf era se ac

43、tivit y of j en y ns i a m ul t i de nt at a f ed wit h microcystin2rr j . water resea rch , 42 (4 - 5) : 1299 - 1307de figueiredo d r , azeiteiro u m , esteve s s m , et al . 2004 . microcystin2p ro ducing bloo ms : a serio us glo bal p ublic healt hga nic anio n2t ranspo rting polypep tides mediat

44、e t ranspo rt of opi2 oid p ep tide s acro ss bloo d2brain bar rier j . j o ur nal of pha r ma2 colo gy a nd exp erimental therap eutic s , 294 (1) : 73 - 79havens k e. 2008 . cyano bacteria bloo ms : eff ect s o n aquatic eco systems j . adva nce s in experimental medicine a nd biolo2 gy , 619 : 73

45、3 - 747ichino se m , endo s , critz s d , et al . 1990 . microcystin2l r , a po tent p ro tein p ho sp hat a se inhibito r , p rolo ngs t he sero to nin2 a nd ca m p2induced cur rent s i n senso r y neuro ns of a p l y s i a c al 2i f o rnic a j . brain resea rch , 533 (1) : 137 - 140ichino se m , b

46、yr ne j h . 1991 . role of p ro t ei n p ho sp hata ses i n t he mo dulatio n of neuro nal membra ne cur rent s j . brain re2 sea rch , 549 (1) : 146 - 150l i y h , ye h y , du m , et al . 2009a . inductio n of chemo ta x2 i s to so dium chlo ride a nd diacet yl a nd t her mo ta xi s def ect s by mi

47、crocystin2l r expo sure in nemato de cae nor h ab d i t is ele g a ns j . j o ur nal of enviro nmental science s , 21 (7) : 971 - 979l i y h , wa ng y , yin l h , et al . 2009b. u sing t he nemato de cae no r hab d i t is ele g a ns a s a mo del a ni mal fo r a sse ssing t he to x2 icit y induced by

48、 microcystin2l r j . j o ur nal of enviro nmental science s , 21 (3) : 395 - 401maida na m , ca rli s v , gal ha r di f g , et al . 2006 . eff ect s of microcystins o ver sho rt2 and lo ng2ter m memo r y and o xidative st re ss generatio n in hippoca mp us of rat s j . chemico2biolo gi2 cal interact

49、io ns , 159 (3) : 223 - 234meril uo to j a , n yga r d s e , da hlem a m , et al . 1990 . syn2 t he si s , o r gano t ropi sm a nd hepatocell ular up ta ke of t wo t ritium2 labeled epimer s of dihydro microcystin2l r , a cya no bacterial p ep tide to xi n a nalo g j . to xico n , 28 (12) : 1439 - 1

50、446ni shiwa ki r , o hra t , ei saburo s , et al . 1994 . two signifi2 ca nt a sp ect s of microcystin2l r : specific binding a nd liver sp e2 cificit y j . ca ncer l et ter s , 83 (1 - 2) : 283 - 289wang q , xie p , chen j , et al . 2008 . di st ributio n of micro2 cystins in vario us o r ga ns ( h

51、ea rt , liver , inte stine , go nad , brain , kidney and l ung) of wi sta r rat via int raveno us injectio n j . to xico n , 52 (6) : 721 - 727ya n h , pa n g , zhang m m . 2002 . a dvance s in t he st udy of microcytio n to xin j . acta ecolo gica sinica , 22 (11) : 1968 -1974 (in chine se)zha ng y f , wa ng d y. 2008 . esta bli shment of to xicit y eval u2 atio n system using mo del o r gani sm of cae no r h ab d i t is ele g a ns j . a sia n j o ur nal of eco to xicolo gy , 3 (4) : 313 - 322 (in ch