结核感染T细胞检测呼吸科(1)

1、 contents 目录目录 1. 1. 结核病的诊断现状结核病的诊断现状 2. TB-IGRA2. TB-IGRA产品介绍产品介绍 3. TB-IGRA3. TB-IGRA的临床应用的临床应用 4. TB-IGRA4. TB-IGRA检测方法及结果解释检测方法及结果解释 3 结核病结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(tubercle bacillus)引 起的一种慢性肉芽肿性炎。 以肺结核最常见，死亡人数仅次于艾滋病。也可见于全可见于全 身各器官身各器官。肺外结核肺外结核占整个发病率的10%-20%10%-20%，死亡率，死亡率占 结核病全部死亡率的14.1%-17.6%14

2、.1%-17.6%。 全世界约三分之一的人群感染，2014年全球结核病报告 显示：2013年有900万新发病例， 150万人死亡。 中国是结核病高发区中国是结核病高发区，发病数居全球第二发病数居全球第二，现有600万活 动性肺结核，且患者人数逐年增加，始终位居全国甲乙类 传染病的前列。 电镜下的结核杆菌电镜下的结核杆菌 LTBI 结核分枝杆菌（MTB） 暴露 感染 自愈自愈 90% 不发展为结核病不发展为结核病 Latency 2-5% 疾病进展疾病进展 1% 活动性结核病活动性结核病 细菌全部被清除细菌全部被清除 一直存在活菌一直存在活菌 需预防性服药 不需要预防性服药 Latency 潜伏

3、潜伏 9% 复燃复燃 注：感染后发病与否和机体易感性有关！注：感染后发病与否和机体易感性有关！ 5-10%HIV10% 治愈治愈 l活动性结核： 发病状态 l潜伏性结核感染（LTBI）：是宿主感染结核杆菌后 尚未发病的一种特殊状态 未根治未根治 COPD合并肺结核的特点 结核症状不典型结核症状不典型 老年男性为多，男性为女性7倍之多 痰结核菌检查涂片或培养阳性率70% PPD呈呈阴性或弱阳，结核抗体亦呈阴性或阳性呈呈阴性或弱阳，结核抗体亦呈阴性或阳性 X线胸片不典型，线胸片不典型，类似于一般炎症而常被误诊 对对COPDCOPD合并肺结核诊断的延误，导致治疗不及时，易造成：合并肺结核诊断的延误，

4、导致治疗不及时，易造成： 1. 1.肺部病灶痰菌量增加，传染性扩大肺部病灶痰菌量增加，传染性扩大 2. 2. 病人体质进一步消耗，抗结核药物耐受能力差，不良反应加大病人体质进一步消耗，抗结核药物耐受能力差，不良反应加大 3. 3. 免疫力进一步下降，痰菌阴转率降低，耐药菌增加免疫力进一步下降，痰菌阴转率降低，耐药菌增加 4.4. 病情迅速恶化，甚至危及生命，死亡率增加病情迅速恶化，甚至危及生命，死亡率增加 大量流行病学资料发现，矽肺患者合并结核发生率为 10%30%。矽肺患者的肺结核患病率为全国平均肺结 核患病率的3.1628倍。 潜伏性结核感染的诊断潜伏性结核感染的诊断 u皮肤结核菌素试验皮

5、肤结核菌素试验（TSTTST） 10mm10mm u 干扰素释放试验（干扰素释放试验（IGRAsIGRAs） 潜伏性结核感染潜伏性结核感染 免疫学检测阳性，显示结核感染 体内有活的结核分枝杆菌，但非活 动型 无疾病和症状 不传播给他人 给予药物，防止发展为活动性结核 活动性结核活动性结核 结核诊断结核诊断 u 影像学方法影像学方法 u 细菌学方法细菌学方法 u 病理学方法病理学方法 u 免疫学方法免疫学方法 有临床症状或影像学改变 具传染性 主要的传播源 需及时治疗 APC T cell 细胞 因子 活化/细 胞因子 细胞 因子 ELISAELISPOT流式细胞术流式细胞术 细胞因子 活化标志

6、物 IGRAs IFN-g release assay TNFa IFNg CK 体外刺激：体外刺激： RD1RD1抗原抗原 原理原理: 机体内被结核菌抗原致敏的效效 应应T细胞细胞，在体外受到相同抗原的 刺激（在APC辅助下）后，会分泌 大量IFN- (细胞因子)。通过IFN- 的检测，判断结核感染情况。 TNFa IFNg CK TB-IGRATB-IGRA快速简便快速简便，是一种值得推广的检测方法：，是一种值得推广的检测方法： 国内外相关国内外相关研究研究 国内文章国内文章sensitivitysensitivity 结核分枝杆菌结核分枝杆菌-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用

7、干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用90.2490.24% %（74/8274/82） TB-IGRATB-IGRA与与TSTTST检测菌培阳性肺结核患者比较检测菌培阳性肺结核患者比较80.380.3% %（118/147)118/147) -干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义88.6488.64% %（39/4539/45） 结核分枝杆菌相关结核分枝杆菌相关-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值90.790.7% %（243/268243/268） 两种结核分枝杆菌相关两种结核分枝杆

8、菌相关-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究90.990.9% %（290/319290/319） 体外释放酶联免疫法检测结核杆菌体外释放酶联免疫法检测结核杆菌-干扰素的实验研究干扰素的实验研究89.1189.11% %（90/10190/101） 干扰素释放酶联免疫法（干扰素释放酶联免疫法（TB-IGRATB-IGRA）用于检测结核分枝杆菌的优越性）用于检测结核分枝杆菌的优越性96.12%(99/103)96.12%(99/103) 体外体外-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价

9、值比较90.1%(308/34290.1%(308/342 干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值88.6%(39/44)88.6%(39/44) 国外同类试剂国外同类试剂优势优势 A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and T-A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and T- SPOT.TB in ChildrenSPOT

10、.TB in Children Latent TBLatent TB检出高检出高 Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Assay in Patients Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Assay in Patients with Radiographic Lesions Suggesting Old Healed Tuberculosiswith Radiographic Lesions Suggesting Old Healed

11、 Tuberculosis Latent TBLatent TB检出高检出高 Estimating diagnostic accuracy of tests for latent tuberculosis infection Estimating diagnostic accuracy of tests for latent tuberculosis infection without a gold standard among healthcare workerswithout a gold standard among healthcare workers 特异性特异性93.6%93.6%

12、 Clinical Utility of Interferon Gamma Assay in the Diagnosis of TuberculosisClinical Utility of Interferon Gamma Assay in the Diagnosis of Tuberculosis灵敏度灵敏度90%,90%,特异性特异性97%97% 11. 廖明等对比了血IGRAIGRA、TST、抗酸杆菌、结 核抗体在SCTB中的检测性能： 敏感度分别为94.4%94.4%、52.8%、38.9%、41.7%； 阴性预测值分别为91.7%91.7%、52.8%、48.8%、 55.3% I

13、GRAIGRA在矽肺合并结核病中的应用在矽肺合并结核病中的应用 12. IGRAIGRA方法辅助诊断结核性胸膜炎：方法辅助诊断结核性胸膜炎： 天津市海河医院，124例受试者，包括健康对照 者30名、初诊结核性胸膜炎患者37例、恶性胸腔 积液患者32例、非结核性胸膜炎患者25例。 结论：用结论：用IGRA方法对结核性胸膜炎诊断的敏感方法对结核性胸膜炎诊断的敏感 性、特异性和诊断准确率分别为性、特异性和诊断准确率分别为91.9 、90.6 、91.3 ，优于，优于ADA和和TB-Ab。 17 临床应用案例临床应用案例 MTBMTB与与NTMNTM的的鉴别诊断：鉴别诊断： 某院感染科病人，男 临床临

14、床症状：症状：发热1周，咳嗽，少量痰 检测结果：检测结果：两次痰涂片（两次痰涂片（+ +），两次），两次TB-IGRATB-IGRA（- -），肺部），肺部X X射线射线 无异常，后经菌培鉴定为菌培（无异常，后经菌培鉴定为菌培（- -） 结果结果分析：分析：痰涂片不能区分非结核分枝杆菌，造成假阳性，而 TB-IGRA与菌培结果相符，对结核分枝杆菌有很好的特异性。 临床诊断：临床诊断：鸟型分枝杆菌感染鸟型分枝杆菌感染 发病率发病率 /100.000 患者患者/年年 Dixon W G et al. Ann Rheum Dis 2010;69:522528. Tubach et al. Arthr

15、itis 60: 1884-1894 发病率发病率 /100.000 患者患者/年年 某中学高三年级小规模结核爆发 初始病例1例（7班）6月初 第一批疫情5例（7班）8-9月 第二批疫情10例（8例7班）9月 对师生采血进行 IGRA检测 IGRA阳性者进行预 防性服药 疫情控制疫情控制 自行住院 全年级师生胸透， 胸透阴影预防性 服药 全年级师生PPD试 验 疫情发展阶段疫情发展阶段 结核病例及分布结核病例及分布疫情时间疫情时间疫情初处理疫情初处理 l一起小规模结核暴发流行的调查与控制 潜伏性感染、抗结核治疗监控潜伏性感染、抗结核治疗监控 定量检测定量检测干扰素释放强度，可用于持续监控：干扰

16、素释放强度，可用于持续监控： 国内潜伏性感染人群占结核感染人群国内潜伏性感染人群占结核感染人群40%40%以上；以上； 无干预情况下无干预情况下2 2年内发展成活动性结核的比例为年内发展成活动性结核的比例为5%-10%5%-10%； 使用使用IGRAsIGRAs可以有效发现潜伏性感染，通过定量检测可以有效发现潜伏性感染，通过定量检测 IGRAsIGRAs强度，可以监控病人病情发展状态，防治潜伏性感强度，可以监控病人病情发展状态，防治潜伏性感 染发展成为活动性结核。染发展成为活动性结核。 潜伏性潜伏性 感染感染 耐药结核比例逐渐增加，主要由于抗结核治疗不规范；耐药结核比例逐渐增加，主要由于抗结核

17、治疗不规范； TB-IGRATB-IGRA具有宽泛的具有宽泛的 干扰素定量量程，可跟踪抗结核治干扰素定量量程，可跟踪抗结核治 疗效果，为临床治疗方案调整做参考。疗效果，为临床治疗方案调整做参考。 抗结核抗结核 治疗治疗 23. 治疗开始后，结核患者中IGRA的敏感性和反应强度 均有明显的下降趋势 n综上，综上，TB-IGRATB-IGRA： 高特异性，高灵敏性，体外，全血，定量检测高特异性，高灵敏性，体外，全血，定量检测 n应用方向：应用方向： n肺结核辅助诊断肺结核辅助诊断 n肺外结核辅助诊断肺外结核辅助诊断 n结核感染排查结核感染排查 n潜伏性感染监控，抗结核治疗追踪潜伏性感染监控，抗结核

18、治疗追踪 肺结核的辅助诊断，尤其是细菌学检测阴性的肺结核的辅 助诊断：TB-IGRA从细胞水平上检测结核感染，检出率高， 早期感染即可检出，实现早诊断早治疗。 肺外结核的辅助诊断：TB-IGRA取静脉血进行检测，克服 肺外结核患者痰样找不到结核菌，病灶部位取样难的问题。 呼吸系统疾病与结核的鉴别诊断：发热、咳嗽、咳痰2周； 咯血；胸痛等症状疑似结核，胸片/CT不能明确诊断者； 抗炎治疗治疗效果不佳患者的结核排查，阴性结果在很大 程度上可以排除结核。 2周以上不明原因发热病人的结核感染排查：有研究发现其 中20%是结核引起的，大部分是肺外结核。 高危人群的结核感染筛查：如使用生物制剂/免疫抑制剂

19、、 大剂量激素患者，HIV患者，糖尿病患者，血液病和癌症放 化疗之前患者进行结核筛查，以防陈旧性结核、潜伏性结 核爆发以及近期结核感染。 抗结核治疗效果跟踪以及潜伏性结核定期监控：TB-IGRA结 果是一个定量值，活动性结核患者随治疗进行阳性强度降 低甚至转阴；潜伏感染患者若发生阳性强度明显升高，有 发展成活动性结核风险。流调显示有85%90%新诊断的活 动性肺结核由潜伏性结核演变而来。 国家传染病诊断试剂与 疫苗工程技术研究中心 TB-IGRATB-IGRA检测方法检测方法 阴性对照管阴性对照管NN 阳性对照管阳性对照管P P 检测管检测管T T 培养液培养液 无刺激原无刺激原 培养液培养液 刺激抗原刺激抗原 培养液培养液 PHAPHA TB特异性特异性 刺激抗原刺激抗原 （RD1区：区： ESAT-6、 CFP-10） 无刺激效应无刺激效应 非特异性非特异性 刺激抗原刺激抗原 （PHAPHA） 评估评估-IFNIFN 升高水平升高水平 评估评估-IFNIFN 本