商品化食品检测试剂盒评价试点工作汇报

1、,商品化食品检测试剂盒评价试点工作汇报,福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 2011年3月 山西,2021/4/13,3,汇报内容,试点评价工作的背景 试点评价工作介绍 试点评价工作规则 评价实例 链霉素elisa试剂盒 菌落总数试纸片 沙门氏菌试纸条,2021/4/13,4,试点工作的背景,试剂盒现状： 在包括检验检疫系统在内的各行业广泛使用，研发与市场呈快速上升趋势，多项相关的国家标准及行业标准方法已发布。 面临问题： 缺乏规范的评价制度和市场准入门槛，冒牌产品、无证产品和无说明书产品屡见不鲜，不同厂家生产的针对同一目标物的产品所得到的结果差异甚大，质量得不到保证，从源头上存在检测结果不

2、准确的隐患 。,2021/4/13,5,试点工作的背景,基于目前试剂盒产品的现状，需要对试剂盒进行规范管理，以保证用于检测的试剂盒性能指标满足相关要求。 由福建局牵头，国家认监委、湖南局和广东局共同完成的国家质检总局科研项目商品化食品检测试剂盒评价制度的研究于2011年1月通过鉴定。 项目针对试剂盒评价进行了研究，提出评价方法与评价试点规则。,2021/4/13,6,试点工作的范围,在项目完成的基础上，国家认监委科标部决定组织开展检验检疫行业标准中商品化检测试剂盒试点评价工作； 2011年的试点工作范围包括： 与食品理化和食品微生物检测相关试剂盒； 截至2010年年底已经发布和已列入计划尚未审

3、定且含有试剂盒内容的食品专业检验检疫行业标准； 新立项的尚未送审的行业标准计划项目。,2021/4/13,7,试点工作的组织机构,组织机构示意图,国家认监委科标部,专家委员会,秘书处,技术小组,统计小组,验证实验室,2021/4/13,8,试点工作的组织机构,主管部门：国家认监委科标部 专家委员会： 组织制定评价规则和评价技术要求并提交主管部门发布； 组织制定评价机构要求并承担评价机构技术能力的审核，同时提出推荐意见并提交主管部门； 对试剂盒评价材料进行终审，提出最终评价意见并提交主管部门。 秘书处： 负责根据评价规则要求组织试剂盒评价申请受理、安排评价机构及相关工作； 负责试剂盒评价材料的初

4、审并提交专家委员会终审； 承办主管部门和专家委员会交办的其他工作。,2021/4/13,9,试点工作评价的依据,商品化食品检测试剂盒（简称试剂盒）评价规则 规定了基于实验室验证的试剂盒评价程序； 包括试剂盒申请、审核、实验室验证、暂停、恢复、撤销和注销评价程序； 是试剂盒评价活动相关方应遵循的程序规则。 sn/t 2775-2011商品化食品检测试剂盒评价方法 规定了商品化食品检测试剂盒定义与通用要求； 规定了定性与定量检测试剂盒的技术指标要求； 规定了对验证实验室的要求。,2021/4/13,10,试点评价工作规则,对试剂盒的评价步骤包括： （1）申请者准备相关数据资料； （2）提交评申请书

5、； （3）秘书处组织技术小组制定评价方案并报专家委员会审定； （4）确定验证实验室并进行实验室验证； （5）秘书处汇总验证结果，组织统计小组进行统计分析； （7）审核验证结果； （8）专家委员会做出最终结论； （9）上报国家认监委科标部确认。,2021/4/13,11,试点评价工作规则,评价资料提交： 试剂盒生产企业按照评价规则和sn/t 2775-2011的要求，向秘书处提交书面申请与申请资料。,2021/4/13,12,试点评价工作规则,文件审核及评价方案设计： 秘书处负责对申请资料进行全面技术审核，对于审核通过的产品，秘书处应组建技术小组和统计小组，针对申请评价的试剂盒组织制定评价方案，

6、评价方案须经专家委员会审核通过后方可执行。,2021/4/13,13,试点评价工作规则,实验室验证： 承担验证工作的实验室应按照具体评价方案要求 ，在规定时间内完成实验室验证工作，并将验证数据汇总交秘书处。,2021/4/13,14,试点评价工作规则,数据统计与结果反馈： 在收集完成所有验证数据后,秘书处负责组织统计小组完成结果统计，做出初步结论； 若初步结论为否定，秘书处应及时与申请人联系，以及申请人可提供申诉材料； 若需补充数据或有其它修改评价方案的需要，应及时与申请人和验证实验室联系。,2021/4/13,15,试点评价工作规则,评价结论的发布： 秘书处将所有验证数据、初步结论及申诉材料

7、（必要时）提交专家委员会进行终审，终审后上报国家认监委，由国家认监委发布试点评价结论。,2021/4/13,16,例：验证程序的制定与实施,链霉素酶联免疫试剂盒验证项目 线性 选择性（交叉反应率） 基体验证 基体适用性 准确度/回收率 重现性 检测限和定量限 稳健性（耐变性） 产品批间变异,2021/4/13,17,例：验证程序的制定与实施,线性,2021/4/13,18,例：验证程序的制定与实施,2021/4/13,19,例：验证程序的制定与实施,选择性（交叉反应率）,2021/4/13,20,例：验证程序的制定与实施,选择性（交叉反应率）,2021/4/13,21,例：验证程序的制定与实施

8、,选择性（交叉反应率）,2021/4/13,22,例：验证程序的制定与实施,选择性（交叉反应率）,2021/4/13,23,例：验证程序的制定与实施,基体验证： 基体适用性： 基体适用性 准确度/回收率 重现性 检测限和定量限,2021/4/13,24,例：验证程序的制定与实施,基体适用性 对牛奶、鸡蛋、蜂蜜、蜂王浆、组织、脂肪进行了验证。,2021/4/13,25,例：验证程序的制定与实施,基体验证： 准确度/回收率 重现性 检测限和定量限,2021/4/13,26,四、验证程序的制定与实施,2021/4/13,27,例：验证程序的制定与实施,2021/4/13,28,例：验证程序的制定与实

9、施,稳健性（耐变性）：,2021/4/13,29,例：验证程序的制定与实施,稳健性（耐变性）： 计算各个因素的影响。各因素的影响结果如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=0.059 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.304 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=-0.231 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=1.49 1/4（s+u+x+z）-1/4(t+v+w+y)=e-e=d5=-2.91 通过将差值di与该分析方法在相同条件下重复测定的标准偏差相比较，可判

10、断因素的影响是否显著。 根据验证结果可知，相同条件下重复测定的标准偏差为0.77，而第5个因素即底物作用时间所得到的差值大于2倍的标准偏差，表明底物作用时间对结果有显著影响，应小心进行控制。 洗板次数的差值近于相同条件下重复测定的标准偏差，也应引起注意。,2021/4/13,30,例：验证程序的制定与实施,验证结论： 利用试剂盒自带的标准品进行的线性验证中检测结果良好，相关系数高，三日不同试验中，差值变化小； 在药物选择性实验室，与双氢链霉素的交叉反应率较低，与其他药物的交叉反应率符合说明书标示； 不同基体对检测结果的影响较大，牛奶和鸡蛋的检测限基本符合说明书标示，但其它基体的检测限与说明书标

11、示有一定差距。 不同检测条件对检测结果影响较大，特别是目标物含量在检测限附近时。 底物作用时间对检测结果有显著性影响，应在检测时小心控制。另外，洗板时间也应引起特别关注。,2021/4/13,31,例：验证程序的制定与实施,3m菌落总数试纸片 基体验证 准确度和精密度 结果比较 稳健性（耐变性） 批间变异,2021/4/13,32,例：验证程序的制定与实施,基体验证 生猪肉、午餐肉、生鸡肉、牛肉干、鸡蛋 、婴儿配方奶粉、冰激淩、奶油巧克力、巴氏消毒液态奶、通心粉,2021/4/13,33,例：验证程序的制定与实施,准确度和精密度（参比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,34,例：验

12、证程序的制定与实施,准确度和精密度（参比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,35,例：验证程序的制定与实施,准确度和精密度（参比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,36,例：验证程序的制定与实施,准确度和精密度（参比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,37,例：验证程序的制定与实施,准确度和精密度（参比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,38,例：验证程序的制定与实施,准确度和精密度（参比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,39,例：验证程序的制定与实施,与参比方法（gb 4789.2）的比较,2021/4/13,40,例：验证程序的

13、制定与实施,与参比方法（gb 4789.2）的比较,2021/4/13,41,例：验证程序的制定与实施,与参比方法（gb 4789.2）的比较 采用t检验方法对采用基准方法（gb 4789）与纸片法进行比较，每种样品、每个水平重复测定5次（n=5），自由度f=4。 在95%置信水平上t0.05(8)2.306，除生鸡肉的低、高水平以及牛肉干的高水平验证所得t值大于t0.05(8)2.306，其余均小，证明无显著性差异。,2021/4/13,42,例：验证程序的制定与实施,稳健性（耐变性）,2021/4/13,43,例：验证程序的制定与实施,稳健性（耐变性） 计算各个因素的影响。各因素的影响结果

14、如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=2.25 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.75 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=10.25 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=7.25 通过将差值di与该分析方法在相同条件下重复测定的标准偏差相比较，可判断因素的影响是否显著。如果差值大于2倍标准偏差，则该因素的影响是显著的 根据验证结果可知，相同条件下重复测定的标准偏差为9.81，试验的4个因素均未大于标准偏差，表明对结果无显著影响。,2021/4/13,44,例：

15、验证程序的制定与实施,产品批间变异,2021/4/13,45,例：验证程序的制定与实施,杜邦沙门氏菌试纸条 包容性 排它性 基体适用性 稳健性（耐变性）,2021/4/13,46,例：验证程序的制定与实施,包容性： 在天津局所检测的100株菌株中，100株检出、0株未检出； 在江苏局所检测的共80株菌株中，80株检出，0株未检出。,2021/4/13,47,例：验证程序的制定与实施,2021/4/13,48,四、验证程序的制定与实施,排它性 在天津局在所检测的33株菌株中，33株检出，0株未检出； 在江苏局验证的4种共80株菌中，只有s85的20株检出，其余均未检出。,2021/4/13,49

16、,例：验证程序的制定与实施,2021/4/13,50,例：验证程序的制定与实施,基体适用性,2021/4/13,51,例：验证程序的制定与实施,2021/4/13,52,四、验证程序的制定与实施,基体适用性（以检出概率表示）,2021/4/13,53,例：验证程序的制定与实施,稳健性（耐变性）,2021/4/13,54,例：验证程序的制定与实施,稳健性（耐变性） 计算各个因素的影响。各因素的影响结果如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=0.075 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.025 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=0.025 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=0