外周淋巴细胞冻存技术在复发性流产主动免疫治疗中的应用研究5900字

1、外周淋巴细胞冻存技术在复发性流产主动免疫治疗中的应用研究5900字 目的：探?外周淋巴细胞冻存技术用于复发性流产（RSA）主动免疫治疗的临床效果。方法：对2014年11月-2016年1月经本院中医科门诊确诊的77例RSA患者的临床资料进行回顾性分析，所有浓缩白细胞通过无偿献血方式获得，进一步采用Ficoll密度梯度离心法分离淋巴细胞，淋巴细胞经自体血浆冻存，深低温保存，分次复苏后用于RSA患者主动免疫治疗。通过台盼蓝拒染实验和流式细胞技术比较冻存不同时期淋巴细胞存活率和CD3+T、CD3+CD8+T和CD3+CD4+T细胞免疫表型变化，评价冻存淋巴细胞的活性和稳定性；通过比较治疗前后RSA患者

2、HLA-、类特异性封闭抗体转阳率和再次妊娠成功率，评价冻存外周淋巴细胞用于RSA治疗的效果。结果：与新鲜分离的淋巴细胞比较，存活7、15、30、60、90 d的淋巴细胞存活率和细胞表型稳定性比较，差异均无统计学意义（P0.05）；经冻存淋巴细胞主动免疫治疗后，封闭抗体累计转阳率为93.5%。封闭抗体阳性者再次妊娠成功率为90.3%，显著高于阴性者的20.0%，差异有统计学意义（P0.05）.Furthermore，after treatment，the positive rate of blocking antibodies was up to 93.5%.In addition，the pr

3、obability of successful pregnancy rate was 90.3% in patients with positive blocking antibodies，which was significantly higher than 20.0% in negative patients，the difference was statistically significant（P0.05），见表1。 2.3 冻存淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体转阳率比较 77例接受冻存淋巴细胞主动免疫治疗的RSA患者，第一疗程结束后55例HLA-、类特异性抗体转阳，第一疗程转阳率为71

4、.4%；第二疗程结束后17例HLA-、类特异性抗体转阳，第二疗程转阳率为77.3%，累计转阳率为93.5%，见表2。2.4 冻存淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体阳性与阴性者再次妊娠成功率比较 77例接受冻存淋巴细胞主动免疫治疗的RSA患者再次妊娠后66例妊娠14周，11例患者再次妊娠丢失，再次妊娠成功率为85.7%。其中封闭抗体阳性者再次妊娠成功率为90.3%，阴性者为20.0%，封闭抗体阳性者再次妊娠成功率显著高于阴性者，比较差异有统计学意义（P0.05），并且细胞免疫表型稳定。回顾性分析2014年11月-2016年1月完成12疗程淋巴细胞主动免疫治疗的77例RSA再次妊娠患者的临床资料，结果

5、显示：经自体血浆冻存淋巴细胞免疫治疗后，HLA-和HLA-类特异性抗体累计转阳率，即封闭抗体累计转阳率为93.5%，再次妊娠成功率（以妊娠14周计算）为85.7%。综上所述，与传统淋巴细胞制备方法比较，本法获得的淋巴细胞来源于血站，严格按照血液制品使用规范采集，安全性高，供血方无需多次抽血，依从性好。并且，供血方所献全血的其他成分也能得到充分利用。另本法获得的淋巴细胞经自体血浆冻存后不影响细胞存活率和封闭抗体的转阳率，对RSA患者淋巴细胞主动免疫治疗效果明确，且可一定程度缓解临床血液制品来源困难的处境，具有进一步临床推广使用的价值。参考文献1肖世金，赵爱民.复发性流产病因学研究进展J.中国实用

6、妇科与产科杂志，2014，30（1）：41-45.2 Saravelos S H，Regan L.Unexplained recurrent pregnancy lossJ.Obstetrics and Gynecology Clinics of North America，2014，41（1）：157-166.3张建平，林其德，李大金，等.复发性流产的诊断与治疗J.现代妇产科进展，2006，15（7）：481-492.4余江，张进，何晓宇.封闭抗体在反复自然流产中的作用J.中华妇产科杂志，2000，35（4）：248-249.5许春月，郭洁，宋殿荣.子宫螺旋动脉重铸障碍在复发性流产中的研究进

7、展J.国际妇产科学杂，2017，44（2）：180-184.6罗振宇，柴冬宁，李萍，等.复发性流产病因分析及免疫治疗J.中国妇幼保健，2016，31（4）：782-784.7王源，韩宝生，高丹丽.同种免疫型复发性流产淋巴细胞免疫治疗研究进展J.河北联合大学学报，2016，18（3）：250-253.8黎丽芬.淋巴细胞主动免疫治疗封闭抗体缺乏所致反复流产的疗效观察J.中国实用医药，2017，12（10）：78-80.9元涛，兰炯采.主动免疫治疗不明原因习惯性流产的研究进展J.中国输血杂志，2003，16（4）：290-292.10李大金，余江，李超荆，等.母-胎免疫识别低下型反复自然流产的供者及

8、配偶淋巴细胞免疫疗法的改进J.上海免疫学杂志，2003，23（6）：393-395.11张振武，刘津.淋巴细胞主动免疫在复发性流产治疗中的效果及血液流变学的临床意义J.中国妇幼保健，2016，31（10）：2154-2156.12方伟祯，蔡振华，谢晓英，等.封闭抗体检测与反复自然流产患者主动免疫治疗的相关性分析J.中国微生态学杂志，2014，26（9）：1059-1061.13王爱娟，孙振高，张兴兴，等.复发性流产的免疫学病因研究进展J.中国优生与遗传杂，2017，25（4）：1-4.14马韵，郑梅玲.不明原因复发性流产发病机制研究进展J.中华妇幼临床医学杂志：电子版，2016，12（2）：2

9、37-240.15 Ramhorst R，Agriello E，Zittermann S，et al.Is the paternal mononuclear cells immunization a successful treatment for recurrent spontaneous abortionJ.Am J Reprod Immunol，2000，44（3）：129-135.16杜涛，黄海，刘玉昆，等.不明原因复发性流产与蜕膜组织中巨噬细胞自噬状态之间关系探讨J.中国实用妇科与产科杂志，2015，31（8）：763-767.17 Cauchi M N，Lim D，Young D E，et al.Treatment of recurrent aborters by immunization with paternal cells-controlled trialJ.Am J Reprod Immunol，1991，25（1）：16-17.18马征兵，王艳秋，张爱英，等.淋巴细胞主动免疫疗法在不明原因复发性流产患者中的应用J.中国性科学，2015，24（6）：88-90.19郭雯娓，李博，肖西峰，等.不明