凝血检测质量保证【优选课件】

1、凝血检测质量保证,1,精制课件,炮制虽繁 必不敢省人工 品味虽贵 必不敢减物力,2,精制课件,临床实验室的质量控制,3,精制课件,室内质控,室内比对,室间比对,室间质评,分析前 质量控制,分析后 质量控制,4,精制课件,1、抗凝剂：109mmol/L枸橼酸钠抗凝。 与钙离子形成可溶性螯合物而起到抗凝作用 有效阻止凝血因子FV、FVIII的降解 不受肝素影响，以用于肝素治疗的监测 EDTA ：抑制或干扰纤维蛋白凝块形成纤维蛋白单体聚合， 对FV保护性差。 肝素：可与AT-作用抑制凝血因子的反应。 草酸盐：与钙离子形成不溶性沉淀物，影响血凝仪的光电终点,分析前,5,精制课件,2、采血管顺序（CLS

2、I H3-A6）： 血培养管， 凝血项目管（如：蓝帽） 含有或不含促凝剂、含有或不含分离 胶的血清管（如：红帽） 含有或不含分离胶的肝素血浆管（如：绿帽） 含有或不含分离胶的EDTA 管（如：紫帽或珍珠色帽） 含酵解抑制剂管（如：灰帽） 对于凝血项目该文件改变了第一管必须弃置的要求，当凝血管为第一管时，无论是正常人或口服华法令患者其PT或INR均不受影响，正常人的APTT不受影响。但是尚不知其它凝血项目是否受到影响，因此对其它凝血项目，还是建议第二管采集,分析前,6,精制课件,3、采血管：内壁应硅化，而且死腔量越小越好。 4、采血量：通常按1：9的抗凝比例采血。 但对于HCT55%的患者，血浆

3、相对于抗凝剂量会减少，使凝血试验的结果延长，应调整采血量。 需取出抗凝剂量(ml)=0.3-血量（ml）0.00185 (100-HCT%) 5、标本送检条件：室温下2小时内送检，低温会损伤血小板活化因子，使PT结果降低。 6、标本保存时间：2-8 4小时，-20 1周，-80 6个月。 7、凝血、溶血标本为不合格标本,分析前,7,精制课件,造成标本溶血的原因,8,精制课件,室内质控,室内质控的功能：查找分析测定中的误差，即用室内质控物的检测结果去确认常规标本检测结果的有效性，如果确认通过，此时的常规标本检验结果才可用于疾病的诊断、治疗及预后观察等,9,精制课件,室内质控,质控品的选择 1.1

4、 检测系统配套的质控品 1.2 第三方质控品 1.3 质控品要求,10,精制课件,自动质控,室内质控,室内质控项目、质控频度 2.1 室内质控项目 PT、INR、APTT、Fbg、TT、DD、FDP 2.2 质控频度,11,精制课件,12,精制课件,允许CV建立与评估 2012年凝血允许CV评估,失控率 仪器失控率 项目失控率,室内质控,质控目标的确立,13,精制课件,室内质控,质控靶值及SD的累积 4.1 靶值设定？ 质控厂商提供的数据仅供参考！ 不同仪器对同一批号质控的反应程度不一样！ 4.2 SD设定,14,精制课件,室内质控,质控规则（Westgard多规则）http:/ 5.1 警告

5、：12s、10 x、41s 5.2 失控：22s、13s、R4s,15,精制课件,室内质控,6. 室内质控月报表、失控处理记录,16,精制课件,室内比对,1、频率：每年2次。 2、参与仪器：所有仪器，以参加EQA的仪器为参考仪器。 3、执行人员：当班人员、质控员；组长、主任签字确认。 4、比对血浆：收集高、中、低水平新鲜血浆共20份。 5、比对项目：PT、INR、APTT、FBG、TT、DD。 6、数据处理：录入专用的EXCEL表格，统计r、bias%。 7、判断标准：PT、INR、APTT、FBG、DD各项 r0.975，并且80%的样本bias%在下列标准 范围内为合格。 8、比对试验不合

6、格的仪器需启用校准程序,17,精制课件,室内比对,18,精制课件,WFH,卫生部、北京市,CAP,室间质评,19,精制课件,室间质评,20,精制课件,室间质评,室间质评失控处理,21,精制课件,室间质评,室间质评失控处理-1,22,精制课件,室间质评,室间质评失控处理-2,23,精制课件,室间质评,室间质评失控处理-3,APTT、TT无定标项目 1、订货量； 2、东西两院保持批号一致； 3、试剂更换批号后进行标本传递（质控品、标本），观察批间差,24,精制课件,室间质评,标本传递举例,25,精制课件,怎么来？ 怎么用,APTT 100s或 15s； Fbg 1.0g/L； FDP 40g/ml

7、，同时Fbg 1.0g/L； PT 70s或9s； TT 150s,危急值,分析后,26,精制课件,分析后,27,精制课件,华法林凝血酶原时间（Prothrombin Time, PT,Local ISI,28,精制课件,ISI值确定？ ISI是什么：反映试剂对Vitamin K依赖的凝血因子水平的敏感程度，通过国际参考品（International reference preparation，IRP）来溯源,Local ISI,计算MNPT和ISI值,PT-INR系统校准,Local ISI,30,精制课件,Local ISI,31,精制课件,直接INR测定 用56个浓度的认证血浆（不同系统

8、的定值不一样）产生本实验室的校准线。 使用本实验的凝血活酶/联合试剂测定认证血浆的PT值，将所得的结果和认证血浆的INR赋值绘成对数图。 可以用线性的或正交的回归方法绘制校准线，从校准线上读取患者的INR值。这种方法与ISI和正常人PT均值（MNPT）无关。所有的本地因素都被消除了,PT-INR系统校准,Local ISI,32,精制课件,用参考血浆对试剂进行定标作校准曲线，根据定标曲线直接得到INR 室间的变异可以大大降低 多点定标进行的校准更加精密准确 所有的当地因素都被消除了,Local ISI,采用INR定值血浆校准当地的PT/INR检测系统，不仅使INR结果更加准确，而且加强了实验室

9、间的INR结果的一致性，使口服抗凝剂的监测更加有效,33,精制课件,Local ISI定标: PT-INR的标准化绝不仅仅是对某一仪器或某一试剂的校准，从实验室角度出发是对整个系统（System）的标准化！ “一个样本，一个结果”，不同系统结果趋于一致,Local ISI,34,精制课件,性能验证的目的,确保正确的选择实验室方法，并在方法使用前进行充分、有效的评价，以保证方法的可靠性 对实验室正在使用的检验系统/方法进行定期的、有效的验证，以保证所使用的检验系统/方法能够满足临床和患者的需求，并保证检验系统/方法的可靠性,35,精制课件,定量方法的性能验证,精密度 准确度评价 线性 携带污染

10、方法学比较 参考范围验证 分析干扰及稀释验证,36,精制课件,性能验证内容,批内不精密度,37,精制课件,性能验证内容,日间精密度,38,精制课件,性能验证内容,准确度：是测量结果中系统误差与随机误差的综合，表示测量结果与真值的一致程度。保证检验结果准确性最有效的手段是建立和保证检验结果的溯源性 计算定值参考物质或校准品的测定值（测定三次取均值）与靶值的偏差 判断标准：小于1/2CLIA88允许变异,39,精制课件,性能验证内容,线性：选取一份接近预期上限的高值血浆样本（H），分别按100%、90%、75%、50%、25%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定2次，计算均值。将实测值与预测值作比较

11、（偏离应小于10%），计算 y=ax+b，验证线性范围。 判断结果：a值在10.1范围内，相关系数R2 0.95,40,精制课件,性能验证内容,携带污染：指分析物含量高的标本对分析物含量低的标本其测定结果的影响 携带污染率=(L1-L3)/(H3-L3)*100% 携带污染率3,41,精制课件,性能验证内容,稀释验证：选取高值样本，分别以仪器自动稀释和手工法两种方式，按照 原倍、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32的比例进行稀释，将两次结果比较，偏离应小于10,42,精制课件,性能验证内容,参考范围验证： 收集20例健康人血浆，年龄20-70岁，男10例，女10例 计算检测系统的R值（R值=落在参考范围内的样本数/总样本数）。要求R0.9,43,精制课件,性能验证内容,方法学比对：为保证检验结果的可比性，使用实验室的不同分析系统和/或公认的参考方法同时检测一批病人标本，从测定结果的差异了解不同分析系统之间的偏倚 标本范围应涵盖所比对项目的高中低值，正常结果占4060%，分别用被比较的仪器方法以及比较仪器方法检测,44,精制课件,性能验证内容,